диссертации / 10

81

3.3.4. Праймирующее влияние комплексного антигена Pseudomonas

aeruginosa на секрецию активных форм кислорода полиморфно-

ядерными лейкоцитами крови в норме

В таблице 22 показано влияние комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa на регистрируемые параметры Л-ХЛ и Лц-ХЛ ПМЛ крови доноров. Наблюдается обратная дозовая зависимость регистрируемых параметров ХЛ крови доноров при воздействии данного комплексного АГ.

Примечание: n=19; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.

В таблице 23 показано влияние комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa на вычисляемые параметры ХЛ ПМЛ крови у доноров. Индексы, характеризующие праймирующее влияние на секрецию АФК ПМЛ крови, положительно коррели-

руют между собой (r=0,99; p<0,05) и также как и регистрируемые параметры ХЛ имеют обратную дозовую зависимость от концентрации комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa.

82

Проанализировав результаты табл. 22 и 23 можно отметить, что в диапазоне концентраций 5×104 - 50×104 микр. кл/мл наблюдается праймирующий эффект на суммарную секрецию АФК, на концентрации 5×104 микр. кл/мл – он наи-

больший. В диапазоне концентраций 125×104 - 1000×104 микр. кл/мл происходит достоверное угнетение суммарной секреции АФК ПМЛ крови у доноров. Прай-

мирующее влияние на секрецию О2ˉ наблюдается в диапазоне концентраций

5×104 - 25×104 микр. кл/мл данного комплексного АГ. Наибольший праймирую-

щий эффект наблюдается на концентрации 5×104 микр. кл/мл. На концентрации комплексного АГ 50×104 микр. кл/мл достоверных отличий от контроля не най-

дено, а в диапазоне концентраций 125×104 - 1000×104 микр. кл/мл происходит угнетение секреции О2ˉ ПМЛ крови у доноров.

Таблица 23.

Сравнение индексов стимуляции и соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови доноров, при воздействии комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa, (M ± m)

Примечание: n=19; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.

На рисунке 9 показано, что более выраженное предстимулирующее действие

комплексный АГ Pseudomonas aeruginosa оказывает на ИП, характеризующий

83

суммарную секрецию АФК ПМЛ крови у доноров. Кривая зависимости ИП от

концентрации данного комплексного АГ при измерении Л-ХЛ располагается

выше аналогичной кривой при измерении Лц-ХЛ.

Рис. 9. Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми Л-ХЛ и Лц-ХЛ ПМЛ крови доноров при воздействии комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa.

Примечание. *- р <0,05 относительно контроля; **- р <0,05 относительно аналогичной точки на кривой Лц-ХЛ.

Далее, чтобы выявить влияние компонентов цельной крови в механизмах праймирующего влияния на секрецию АФК ПМЛ комплексным АГ Pseudomonas aeruginosa проведено изучение воздействия данного комплексного АГ на регист-

рируемые и вычисляемые параметры Л-ХЛ и Лц-ХЛ выделенных лейкоцитов крови у доноров.

Из результатов таблицы 24 видно, что при воздействии данного комплексно-

го АГ на выделенные ПМЛ крови также как и в цельной крови наблюдается об-

ратная дозовая зависимость на регистрируемые параметры ХЛ. Абсолютные ве-

личины регистрируемых параметров ХЛ отличаются от таковых в цельной крови за счет экранирования ХЛ излучения присутствующими в цельной крови эритро-

цитами, но тенденция дозовой зависимости аналогична.

84

Таблица 24.

Регистрируемые параметры ХЛ суспензии выделенных ПМЛ доноров,

при воздействии комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa, (M ± m)

При вычислении индексов, характеризующих праймирующее влияние на суммарную секрецию АФК и секрецию О2ˉ выделенными ПМЛ доноров (таблица

25) также как и в предыдущей серии экспериментов на цельной крови была полу-

чена обратная дозовая зависимость данных параметров при воздействии ком-

плексного АГ Pseudomonas aeruginosa.

В результате проведенного корреляционного анализа получена прямая взаимосвязь между ИП ПМЛ крови и ИП выделенными ПМЛ у доноров (r=0,99;

р<0,05 и r=0,98; р<0,05 соответственно). Наибольший предстимулирующий эф-

фект на секрецию АФК выделенными ПМЛ наблюдается при воздействии кон-

центрацией 5×104 микр. кл/мл. Самая большая концентрация комплексного АГ -

1000×104 микр. кл/мл на выделенных клетках дает угнетающий эффект на секре-

цию АФК как и на ПМЛ крови. Из данных результатов можно сделать вывод, что компоненты цельной крови не участвуют в механизмах праймирующего влияния на секрецию АФК ПМЛ у доноров при воздействии на них комплексным АГ

Pseudomonas aeruginosa.

85

Таблица 25.

Сравнение соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови и выделенных

ПМЛ доноров, при воздействии комплексного АГ Pseudomonas aeruginosa,

(M ± m)

Примечание: n=19; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.

Таким образом, резюмируя полученные результаты по изучению влияния бактериальных комплексных АГ на секрецию АФК ПМЛ у доноров, следует от-

метить, что все исследуемые комплексные АГ праймируют секрецию АФК ПМЛ как в цельной крови, так при выделении ПМЛ из цельной крови. Диапазоны предстимулирующих концентраций для каждого комплексного АГ различны, что связано с индивидуальными микробиологическими свойствами бактерий. Для ка-

ждого комплексного АГ определены Сопт (оптимальная концентрация, вызываю-

щая наибольший предстимулирующий эффект на секрецию АФК) и Смах (макси-

мальная концентрация, вызывающая угнетение секреции АФК ПМЛ) (таблица

26).

На основании определенной силы праймирующего влияния (по величине

ИП) на суммарную секрецию АФК ПМЛ у доноров комплексные АГ можно рас-

положить в следующей последовательности: Klebsiella pneumoniaе >Staphylococcus aureus >Esheriсhia coli >Pseudomonas aeruginosa. Тот же ряд по влиянию на секрецию О2ˉ выглядит так: Staphylococcus aureus > Klebsiella pneumoniae >Esheriсhia coli >Pseudomonas aeruginosa. Исходя из полученных закономерно-

86

стей влияния бактериальных комплексных АГ на секрецию АФК ПМЛ у доноров,

необходимо определить, в какой мере данные закономерности сохранятся при ОДП. В связи с этим следующим этапом изучения влияния специфических факто-

ров на секрецию АФК ПМЛ стало исследование данного воздействия при ОДП. В

связи с полученными различиями во влиянии компонентов цельной крови в ме-

ханизмах праймирования секреции АФК ПМЛ целесообразно дальнейшие иссле-

дования у пациентов с ОДП проводить на цельной крови, чтобы не искажать ре-

альную картину секреции АФК ПМЛ.

Таблица 26.

Оптимальные и максимальные концентрации исследуемых бактериальных комплексных АГ

3.4. Изучение влияния бактериальных комплексных антигенов на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите

3.4.1. Изучение влияния комплексного антигена Escherichia coli на секрецию активных форм кислорода полиморфно-ядерными лейкоцитами крови при остром деструктивном панкреатите

В таблице 27 показано влияние комплексного АГ E.coli на регистрируемые

параметры Л-ХЛ ПМЛ крови пациентов с ОДП. Не наблюдается обратной дозо-

87

вой зависимости регистрируемых параметров Л-ХЛ, характеризующих суммар-

ную секрецию АФК ПМЛ крови в исследуемых группах пациентов с ОДП при воздействии данного комплексного АГ. Для 1 группы пациентов характерно дос-

товерное увеличение регистрируемых параметров Л-ХЛ, характеризующих сум-

марную секрецию АФК ПМЛ крови пациентов по сравнению с донорами и паци-

ентами 2 группы.

Таблица 27.

Регистрируемые параметры Л-ХЛ ПМЛ крови пациентов с ОДП при воздействии комплексного АГ E.coli, (M ± m)

Примечание: *- р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ контрольной пробы; **- р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ 1 группы; # р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ группы доноров. Жирным шрифтом выделены Сопт и Смах.

Для 2 группы пациентов характерно достоверное снижение I спонт, I стим и

Sхл Л-ХЛ по сравнению с 1 группой пациентов и группой доноров. Это свиде-

тельствует о снижении суммарной секреции АФК ПМЛ крови у данных пациен-

тов под влиянием комплексного АГ E.coli. При воздействии оптимальной и мак-

симальной концентрациями комплексного АГ во 2 группе пациентов также на-

блюдается достоверное снижение регистрируемых параметров Л-ХЛ. В том чис-

ле и Sхл на Сопт снижена на 41,7 % (р<0,01) по сравнению с донорами и на 82,6% (р<0,05) по сравнению с 1 группой пациентов. Sхл на Сопт в 1 группе увеличена на 235,4% (р<0,05) по сравнению с группой доноров. На Смах Sхл пациентов 2

88

группы снижена на 31,6 % (p<0,05) по сравнению с донорами и на 86,1%

(p<0,05) по сравнению с пациентами 1 группы. Sхл на Смах в 1 группе пациентов увеличена на 621,9% (p<0,05). Изменение уровня суммарной секреции АФК ПМЛ при различном течении ОДП, оцениваемое по величине площади под кри-

вой Л-ХЛ продемонстрировано на рисунке 10.

На рисунке 11 показана концентрационная зависимость вычисляемого па-

раметра Л-ХЛ, характеризующего праймирующее влияние комплексного АГ

E.coli на суммарную секрецию АФК ПМЛ крови больных с ОДП.

89

Рис. 11. Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми Л-ХЛ ПМЛ крови пациентов с ОДП при воздействии комплексного АГ E.coli.

Примечание: *- р<0,05 относительно аналогичной точке на кривой зависимости ИП от концентрации комплексного АГ в группе доноров; **- р<0,05 относительно аналогичной точке на кривой зависимости ИП от концентрации комплексного АГ в 1 группе.

При сравнении значений ИП группы доноров и исследуемых групп пациен-

тов на оптимальной концентрации комплексного АГ E.coli также было выявле-

но, что во 2 группе пациентов с ОДП наблюдается достоверное снижение данного индекса по сравнению с донорами на 40,5% (р<0,001) и с 1 группой на 32,4 % (р<0,001). В 1 группе пациентов ИП увеличен по сравнению с группой доноров на

55,1 % (р<0,001). На максимальной концентрации комплексного АГ ИП во 2

группе пациентов с ОДП снижен на 23,6% (р<0,001) по сравнению с донорами и на 68,0% (р<0,001) по сравнению с 1 группой. В 1 группе ИП на Смах увеличен по сравнению с донорами на 139,8% (р<0,001).

В таблице 28 показано влияние комплексного АГ E.coli на регистрируемые параметры Лц-ХЛ, характеризующие секрецию О2ˉ ПМЛ крови пациентов с ОДП.

Не наблюдается обратной дозовой зависимости регистрируемых параметров Лц-

ХЛ ПМЛ крови в исследуемых группах пациентов с ОДП при воздействии дан-

ного комплексного АГ. Значения величин регистрируемых параметров Лц-ХЛ заметно отличаются в данных группах пациентов.

90

Таблица 28.

Регистрируемые параметры Лц-ХЛ ПМЛ крови пациентов с ОДП

при воздействии комплексного АГ E.coli, (M ± m)

Примечание: *- р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ контрольной пробы; **- р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ 1 группы; # р >0,05 при сравнении с аналогичным параметром ХЛ группы доноров. Жирным шрифтом выделены Сопт и Смах.

Для 2 группы характерно достоверное снижение величин Iспонт, Iстим и Sхл Лц-

ХЛ по сравнению с группой доноров и с 1 группой пациентов. Это свидетельст-

вует о снижении секреции О2ˉ ПМЛ крови в данной группе пациентов под влия-

нием комплексного АГ E.coli. При воздействии на ПМЛ крови оптимальной и максимальной концентрациями комплексного АГ во 2 группе пациентов наблю-

дается достоверное снижение регистрируемых параметров Лц-ХЛ. В том числе и

Sхл на Сопт достоверно снижена на 88,2% (p<0,05) по сравнению с 1 группой па-

циентов и на 81,0% (p<0,05) по сравнению с группой доноров (см. рис. 18). В 1

группе Sхл увеличена на 60,9% (p<0,05) по сравнению с группой доноров. На Смах

Sхл пациентов 2 группы снижена на 19,8% (p<0,05) по сравнению с донорами и на 52,5% (p<0,05) по сравнению с пациентами 1 группы. Sхл на Смах в 1 группе пациентов увеличена на 68,9% (p<0,05). Изменение уровня секреции О2ˉ ПМЛ при различном течении ОДП, оцениваемое по величине площади под кривой Лц-

ХЛ продемонстрировано на рисунке 12.