диссертации / 10
.pdf71
Sхл) характеризующих секрецию АФК ПМЛ крови доноров при воздействии дан-
ным комплексным АГ. Выявляются концентрации комплексного АГ Staphylococcus aureus оказывающие предстимулирующее влияние на суммарную секрецию АФК и на секрецию О2ˉ.
Таблица 14.
Регистрируемые параметры ХЛ крови доноров, при воздействии комплексного АГ Staphylococcus aureus, (M ± m)
|
Вид |
|
САГ, |
|
I спонт, |
|
I стим, |
|
|
I мах, |
|
|
Тмах, |
|
|
Sхл, |
||||||
|
|
микр.кл |
|
|
|
|
|
|
|
|
отн. ед., |
|||||||||||
|
ХЛ |
|
|
имп/с |
|
имп/с |
|
|
имп/с |
|
|
с |
|
|
||||||||
|
|
/мл, ×104 |
|
|
|
|
|
|
|
×103 |
|
|||||||||||
|
|
5 |
|
160,1 |
± 42,4* |
|
675,3 |
± 27,1* |
|
835,4 |
± 48,8* |
|
1330,7 ± 47,6 |
|
937,0 ± 69,7* |
|
||||||
|
|
|
25 |
|
|
55,3 ± 15,7* |
|
|
509,1 ± 21,2 |
|
|
564,4 |
± 21,2* |
|
|
1384,0 ± 34,8 |
|
|
652,0 ± 32,6* |
|
||
|
Л-ХЛ |
50 |
|
104,9 |
± 30,6* |
|
497,1 |
± 28,2* |
|
602,0 |
± 47,6* |
|
1357,4 ± 49,8 |
|
681,2 ± 29,9* |
|
||||||
|
|
125 |
|
|
61,7 ± 12,9* |
|
|
304,1 |
± 69,3* |
|
|
368,0 |
± 78,0* |
|
|
1433,4 ± 75,3 |
|
|
431,6 ± 25,0* |
|
||
|
250 |
|
64,7 ± 18,5* |
|
285,9 |
± 66,9* |
|
350,6 |
± 79,5* |
|
1361,0 ± 37,9 |
|
386,4 ± 80,5* |
|
||||||||
|
|
|
500 |
|
|
34,8 |
± 4,5* |
|
|
189,3 |
± 44,3* |
|
|
224,1 |
± 48,2* |
|
|
1425,9 ± 38,4 |
|
|
256,1 ± 50,4* |
|
|
|
1000 |
|
26,4 |
± 1,9* |
|
94,1 ± 26,0* |
|
121,7 |
± 25,7* |
|
1361,2 ± 27,3 |
|
139,0 ± 19,1* |
|
|||||||
|
|
|
К |
|
|
48,0 ± 1,5 |
|
|
468,7 ± 67,0 |
|
|
514,6 ± 27,1 |
|
|
1350,9 ± 58,2 |
|
|
537,8 ± 67,8 |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
5 |
|
180,6 |
± 40,7* |
|
64,7 |
± 9,4* |
|
245,2 |
± 49,0* |
|
1591,1± 95,2 |
|
385,7 ± 24,7* |
|
||||||
|
|
|
25 |
|
|
195,7 |
± 59,6* |
|
|
58,0 ±17,1* |
|
|
253,7 |
± 70,4* |
|
|
1803,8±180,8 |
|
|
387,5 ± 14,8* |
|
|
|
ХЛ |
50 |
|
101,9 |
± 48,4* |
|
26,9 ± 3,8 |
|
121,4 |
± 42,4* |
|
1648,0 ± 95,2 |
|
179,8 ± 22,0* |
|
|||||||
|
|
125 |
|
|
132,3 |
± 33,3* |
|
|
46,4 ± 14,4* |
|
|
181,7 |
± 46,1* |
|
|
1654,9±140,7 |
|
|
268,2 ± 69,0* |
|
||
- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Лц |
250 |
|
92,6 ± 34,9* |
|
28,9 |
± 8,5* |
|
121,9 |
± 41,2* |
|
1693,4±133,5 |
|
186,1 ± 67,0* |
|
|||||||
|
|
|
500 |
|
|
54,9 ± 16,5* |
|
|
16,6 |
± 3,4* |
|
|
69,6 ± 20,0* |
|
|
1577,9±116,3 |
|
|
101,5 ± 29,6 |
|
||
|
|
1000 |
|
77,9 |
± 25,6 |
|
15,4 |
± 7,4* |
|
93,4 |
± 30,3 |
|
1746,1±209,0 |
|
139,0 ± 47,3 |
|
||||||
|
|
|
К |
|
|
62,6 |
± 15,7 |
|
|
25,4 ± 7,0 |
|
|
87,1 |
± 19,0 |
|
|
1558,8±103,1 |
|
|
126,4 ± 30,5 |
|
Примечание. n=14; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
В таблице 15 показано влияние комплексного АГ Staphylococcus aureus на вычисляемые параметры ХЛ ПМЛ крови доноров. Индексы, характеризующие праймирующее влияние на суммарную секрецию АФК и секрецию О2ˉ ПМЛ крови, положительно коррелируют между собой (r=0,99; p< 0,05 и r=0,97; р<0,05
соответственно) и также, как и регистрируемые параметры ХЛ, имеют обратно пропорциональную дозовую зависимость от концентрации комплексного АГ
Staphylococcus aureus.
72
Таблица 15.
Сравнение индексов стимуляции и соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови доноров, при воздействии комплексного АГ Staphylococcus aureus, (M ± m)
|
Вид ХЛ |
|
САГ, |
|
|
|
ИС |
|
r |
|
|
|
ИП |
||||
|
|
микр.кл/мл, ×104 |
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
1,55 |
± 0,20* |
|
|
|
|
|
2,13 ± 0,17* |
|
|||||
|
|
|
25 |
|
|
|
1,17 ± 0,12 |
|
|
|
|
|
|
|
1,33 ± 0,16* |
|
|
|
-ХЛ |
50 |
|
1,02 ± 0,07 |
|
|
|
|
|
1,21 ± 0,09* |
|
||||||
|
|
125 |
|
|
|
0,70 ± 0,08* |
|
|
|
0,99 |
|
|
|
0,92 ± 0,16 |
|
||
|
250 |
|
0,61 |
± 0,04* |
|
|
|
(р<0,05) |
|
0,72 ± 0,05* |
|
||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|
||||||||||
|
|
|
500 |
|
|
|
0,41 ± 0,05* |
|
|
|
|
|
|
|
0,50 ± 0,04* |
|
|
|
|
1000 |
|
0,22 ± 0,03* |
|
|
|
|
|
0,31 ± 0,04* |
|
||||||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
5 |
|
|
2,84 |
± 0,13* |
|
|
|
|
|
|
3,12 ± 0,14* |
|
|||
|
|
|
25 |
|
|
|
1,37 |
± 0,18* |
|
|
|
|
|
|
|
1,78 ± 0,15* |
|
|
-ХЛ |
50 |
|
|
1,46 |
± 0,22* |
|
|
|
|
|
|
1,27 ± 0,08* |
|
|||
|
|
125 |
|
|
|
1,28 |
± 0,22* |
|
|
|
0,97 |
|
|
|
1,59 ± 0,11* |
|
|
|
250 |
|
|
1,18 ± 0,28 |
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
1,30 ± 0,09* |
|
|||||
|
Лц |
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
500 |
|
|
|
0,72 |
± 0,11* |
|
|
|
|
|
|
|
0,90 ± 0,11 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
1000 |
|
|
0,50 |
± 0,08* |
|
|
|
|
|
|
0,75 ± 0,06* |
|
|||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
1,00 |
|
Примечание. n=14; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
Проанализировав результаты таблицы 14 и 15 можно выделить концентра-
цию данного комплексного АГ, которая вызывает наибольший праймирующий эффект на суммарную секрецию АФК ПМЛ крови доноров - это 5×104 микр.
кл/мл. В диапазоне концентраций 25×104 - 50×104 микр. кл/мл также наблюдает-
ся предстимулирующий эффект комплексного АГ, а на концентрациях 500×104 -
1000×104 микр. кл/мл происходит достоверное угнетение суммарной секреции АФК ПМЛ крови у доноров. Праймирующее влияние на секрецию О2ˉ наблюда-
ется в диапазоне концентраций 5×104 - 250×104 микр. кл/мл данного комплексно-
го АГ, на концентрации 5×104 микр. кл/мл - он является наибольшим. Концентра-
ции 500×104 микр. кл/мл и 1000×104 микр. кл/мл оказывают угнетающий эффект на секрецию О2ˉ ПМЛ.
На рисунке 7 показано, что более выраженное предстимулирующее действие комплексный АГ Staphylococcus aureus оказывает на ИП, характеризующий сек-
73
рецию О2ˉ ПМЛ крови доноров. Кривая зависимости ИП от концентрации дан-
ного комплексного АГ при измерении Лц-ХЛ располагается выше аналогичной
кривой при измерении Л-ХЛ.
Рис. 7. Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми Л-ХЛ и Лц-ХЛ ПМЛ крови доноров при воздействии комплексного АГ Staphylococcus aureus.
Примечание. *- р <0,05 относительно контроля; **- р <0,05 относительно аналогичной точки на кривой Лц-ХЛ.
Для подтверждения роли опсонинов и других компонентов цельной крови в механизмах праймирующего влияния на секрецию АФК ПМЛ комплексным АГ
Staphylococcus aureus, проведено изучение воздействия данного комплексного АГ на регистрируемые и вычисляемые параметры Л-ХЛ и Лц-ХЛ выделенных лей-
коцитов крови у доноров. Из результатов таблицы 16 видно, что при воздействии данного комплексного АГ на выделенные клетки не наблюдается аналогичная ПМЛ цельной крови дозовая зависимость на регистрируемые параметры ХЛ вы-
деленных ПМЛ у доноров. Абсолютные величины регистрируемых параметров ХЛ отличаются от таковых в цельной крови за счет экранирования ХЛ излучения присутствующими в цельной крови эритроцитами.
74
Таблица 16.
Регистрируемые параметры ХЛ суспензии выделенных ПМЛ доноров,
при воздействии комплексного АГ Staphylococcus aureus, (M ± m)
|
|
|
САГ, |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вид ХЛ |
|
микр. |
|
Iспонт, |
|
I стим, |
|
Iмах, |
|
Тмах, |
|
Sхл, |
|||||||
|
кл/мл, |
|
имп/с |
|
имп/с |
|
имп/с |
|
с |
|
отн. ед., х103 |
||||||||
|
|
×104 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
160,0±36,9* |
|
17529,5±1346,0* |
|
17689,5± 1383,7* |
|
1281,5 ± 54,0 |
16445,1 ± 201,6* |
|
|||||||
|
-ХЛ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
50 |
|
|
233,8±73,1* |
|
|
16698,2±5214,0* |
|
|
16872,0± 5299,0* |
|
|
1215,4 ± 60,1 |
|
|
15889,0 ± 6694,2* |
|
|
|
250 |
|
201,2±57,2* |
|
23732,0±7120,0* |
|
23913,2± 7184,0* |
|
1216,0 ± 45,9 |
20914,3 ± 7208,9* |
|
||||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 |
|
|
211,4±34,0* |
|
|
21366,4±3511,1* |
|
|
21577,8± 3532,0* |
|
|
1246,8 ± 64,0 |
|
|
21895,9 ± 3554,2* |
|
|
|
|
К |
|
|
121,0±18,7 |
|
|
14316,6±3713,0 |
|
|
14470,0± 3722,0 |
|
|
1233,4 ± 38,9 |
|
|
15437,6 ± 6283,6 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
-ХЛ |
5 |
|
30,5 ± 5,5* |
|
295,0 ± 55,0* |
|
325,5 ± 49,5* |
|
1243,5 ± 94,5 |
|
368,3 ± 44,4* |
|
||||||
|
|
50 |
|
|
29,8 ± 4,4* |
|
|
443,8 ± 57,2* |
|
|
481,6 ± 66,3* |
|
|
1272,2 ± 51,9 |
|
|
544,4 ± 57,9* |
|
|
|
250 |
|
29,8 ± 3,7* |
|
476,6 ± 25,9* |
|
538,4 ± 29,2* |
|
1230,0 ± 76,5 |
|
559,8 ± 74,0* |
|
|||||||
|
Лц |
|
|
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 |
|
|
29,2 ± 4,1* |
|
|
357,6 ± 67,8* |
|
|
386,8 ± 69,2* |
|
|
1289,6 ± 63,8 |
|
|
483,2 ± 62,4* |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
К |
|
|
17,3 ± 3,4 |
|
|
200,9 ± 44,2 |
|
|
219,3 ± 39,4 |
|
|
1244,5 ± 95,4 |
|
|
221,8 ± 93,7 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Примечание. n=15; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
В результате проведенного корреляционного анализа получена сильная об-
ратная взаимосвязь между ИП ПМЛ крови и ИП выделенных ПМЛ у доноров
при регистрации Л-ХЛ и Лц-ХЛ (r= 0,95; р<0,05 и r= 0,56; р<0,05 соответствен-
но; таблица 17).
Наибольший предстимулирующий эффект на суммарную секрецию АФК вы-
деленными ПМЛ наблюдается при воздействии самой большой концентрацией комплексного АГ - 1000×104 микр. кл/мл. Концентрация 5×104 микр. кл/мл, вы-
зывающая наибольшее праймирование суммарной секреции АФК ПМЛ крови у доноров, на выделенных клетках дает достоверный угнетающий эффект. При ис-
следовании праймирующего влияния на секрецию О2ˉ выделенными ПМЛ у до-
норов на всем диапазоне концентраций данного комплексного АГ наблюда-
ется предстимулирующий эффект. На концентрации 250×104 микр. кл/мл - он наибольший. Концентрация 5×104 микр. кл/мл, вызывающая наибольшее прайми-
рование секреции О2ˉ ПМЛ крови у доноров, на выделенных клетках дает невы-
сокий праймирующий эффект (ИП=1,11; р<0,05).
75
Таблица 17.
Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови и суспензии выделенных ПМЛ доноров, при воздействии
комплексного АГ Staphylococcus aureus, (M ± m)
|
Вид ХЛ |
|
САГ, |
|
|
ПМЛ крови |
|
r |
|
|
Выделенные ПМЛ |
|||
|
|
микр.кл/мл, ×104 |
|
|
ИП |
|
|
|
ИП |
|||||
|
|
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
2,13 ± 0,17* |
|
|
|
|
0,93 ± 0,04* |
|
||||
|
-ХЛ |
|
50 |
|
|
|
1,21 ± 0,09* |
|
|
-0,95 |
|
|
1,10 ± 0,09 |
|
|
250 |
|
0,72 ± 0,05* |
|
|
|
1,48 ± 0,11* |
|
||||||
|
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
||||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 |
|
|
|
0,31 ± 0,04* |
|
|
|
|
1,60 ± 0,19* |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
5 |
|
|
3,12 ± 0,14* |
|
|
|
|
1,11 ± 0,03* |
|
|||
|
-ХЛ |
|
50 |
|
|
|
1,27 ± 0,08* |
|
|
-0,56 |
|
|
1,26 ± 0,05* |
|
|
250 |
|
|
1,30 ± 0,09* |
|
|
|
1,64 ± 0,08* |
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
Лц |
|
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
||||||
|
|
1000 |
|
|
|
0,75 ± 0,06* |
|
|
|
|
1,45 ± 0,07* |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
1,00 |
|
Примечание: n=15; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
Таким образом, можно заключить, что малые концентрации данного ком-
плексного АГ предстимулируют секрецию АФК ПМЛ в цельной крови в большей степени, чем у выделенных клеток. Можно констатировать, что участие компо-
нентов цельной крови в механизмах прайминга ПМЛ крови при воздействии ком-
плексного АГ Staphylococcus aureus очевидно.
3.3.3. Праймирующее влияние комплексного |
антигена Klebsiella |
pneumoniae на секрецию активных форм кислорода полиморфно-
ядерными лейкоцитами крови в норме
В таблице 18 показано влияние комплексного АГ Klebsiella pneumoniae на регистрируемые параметры Л-ХЛ и Лц-ХЛ ПМЛ крови доноров. Характерно двухфазное изменение зависимости регистрируемых параметров ХЛ ПМЛ крови доноров от концентрации комплексного АГ Klebsiella pneumonia. Праймирующее влияние на суммарную секрецию АФК и секрецию О2ˉ ПМЛ крови наблюдается на всем диапазоне исследуемых концентраций комплексного АГ. В случае реги-
страции Л-ХЛ фаза прямой дозовой зависимости наблюдается в диапазоне кон-
76
центраций 5 - 50×104 микр. кл/мл, а фаза обратной дозовой зависимости в диа-
пазоне концентраций 50 - 1000×104 микр. кл/мл. При регистрации Лц-ХЛ фаза прямой дозовой зависимости наблюдается в диапазоне концентраций 5 - 25×104
микр. кл/мл, а фаза обратной дозовой зависимости в диапазоне концентраций 25
- 1000×104 микр. кл/мл.
Таблица 18.
Регистрируемые параметры ХЛ ПМЛ крови доноров, при воздействии комплексного АГ Klebsiella pneumoniae, (M ± m)
|
Вид |
|
САГ, |
|
I спонт, |
|
I стим, |
|
I мах, |
|
Тмах, |
|
Sхл, |
||||||||||
|
|
микр.кл |
|
|
|
|
|
отн. ед., |
|||||||||||||||
|
ХЛ |
|
|
имп/с |
|
имп/с |
|
имп/с |
|
с |
|
||||||||||||
|
/мл, ×104 |
|
|
|
|
×103 |
|
||||||||||||||||
|
|
5 |
|
140,7± 24,2* |
|
970,7 ± 129,9* |
|
1111,1± 147,6* |
|
1308,1 ± 74,2 |
|
1127,4± 43,0* |
|
||||||||||
|
|
|
25 |
|
|
106,5 ±10,5* |
|
|
1086,4± 125,9* |
|
|
1192,9± 128,9* |
|
|
1278,0 ± 70,3 |
|
|
1168,7± 75,5* |
|
||||
|
Л-ХЛ |
50 |
|
124,8± 22,6* |
|
1095,8± 129,7* |
|
1200,6 134,5* |
|
1283,5 ± 79,6 |
|
1182,4± 54,5* |
|
||||||||||
|
|
125 |
|
|
162,5±30,9* |
|
|
906,4 ± 107,6* |
|
|
1068,9± 105,4* |
|
|
1242,6 ± 73,3 |
|
|
1060,6± 97,2* |
|
|||||
|
250 |
|
110,6 ± 9,9* |
|
746,9 |
± 72,6* |
|
857,5 |
± 77,3* |
|
1233,4 ± 72,7 |
|
791,7 |
± 45,4* |
|
||||||||
|
|
|
500 |
|
|
103,0 ± 9,9* |
|
|
553,9 |
± 48,7* |
|
|
656,9 |
± 54,0* |
|
|
1223,0 ± 67,9 |
|
|
623,9 |
± 55,3* |
|
|
|
|
1000 |
|
92,6 ±10,4* |
|
308,6 |
± 37,7* |
|
401,2 ± 41,2 |
|
1211,8 ± 72,2 |
|
368,0 ± 38,4* |
|
|||||||||
|
|
|
К |
|
|
29,5 ± 2,7 |
|
|
362,3 ± 57,7 |
|
|
393,5 ± 59,9 |
|
|
1417,7 ± 97,3 |
|
|
411,3 |
± 58,5 |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
5 |
|
115,5 |
± 24,7* |
|
34,9 |
± 6,9* |
|
150,4 |
± 27,6* |
|
1660,5 ± 188,0 |
228,6 |
± 41,9* |
|
|||||||
|
|
|
25 |
|
|
168,1 |
± 44,2* |
|
|
35,0 |
± 6,8* |
|
|
203,1 |
± 45,1* |
|
|
1583,4 ± 115,8 |
|
|
309,4 |
± 61,5* |
|
|
ХЛ |
50 |
|
136,1 |
± 29,8* |
|
26,6 |
± 4,2* |
|
162,7 |
± 29,4* |
|
1396,7 ± 122,2 |
250,1 |
± 45,4* |
|
|||||||
|
|
125 |
|
|
153,7 |
± 38,1* |
|
|
31,8 |
± 5,9* |
|
|
185,6 |
± 38,8* |
|
|
1486,0 ± 85,4 |
|
|
284,4 |
± 61,1* |
|
|
- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Лц |
250 |
|
112,2 ± 29,0* |
|
29,3 |
± 3,5* |
|
141,6 |
± 30,1* |
|
1370,3 ± 63,7 |
|
207,6 |
± 46,5* |
|
|||||||
|
|
|
500 |
|
|
122,2 |
± 43,3* |
|
|
25,2 |
± 5,6* |
|
|
147,1 |
± 42,8* |
|
|
1238,2 ± 69,8 |
|
|
216,6 |
± 63,1* |
|
|
|
1000 |
|
64,2 |
± 6,2* |
|
12,4 |
± 1,5* |
|
74,9 ± 5,2 |
|
1210,2 ± 82,2 |
|
109,5 ± 5,1 |
|
||||||||
|
|
|
К |
|
|
49,1 |
± 15,8 |
|
|
18,9 ± 2,4 |
|
|
70,1 |
± 17,2 |
|
|
1652,7 ± 151,2 |
|
|
99,3 ± 9,8 |
|
Примечание: n=15; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
В таблице 19 показано влияние комплексного АГ Klebsiella pneumoniae на вычисляемые параметры ХЛ ПМЛ крови доноров. Индексы, характеризующие праймирующее влияние на суммарную секрецию АФК и секрецию О2ˉ ПМЛ кро-
ви, определяют прямую взаимосвязь между собой (r=0,98 при p<0,05 и r=0,85; p<0,05 соответственно) и также как и регистрируемые параметры ХЛ имеют двухфазный характер зависимости от концентрации комплексного АГ Klebsiella pneumoniae.
77
Таблица 19.
Сравнение индексов стимуляции и соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови доноров, при воздействии комплексного АГ Klebsiella pneumoniae, (M ± m)
|
Вид ХЛ |
|
САГ, |
|
|
ИС |
|
r |
|
|
|
ИП |
||||
|
|
микр.кл/мл, ×104 |
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
2,76 ± 0,23* |
|
|
|
|
|
2,80 ± 0,21* |
|
|||||
|
|
|
25 |
|
|
|
3,18 ± 0,26* |
|
|
|
|
|
|
|
3,03 ± 0,25* |
|
|
-ХЛ |
50 |
|
3,15 ± 0,34* |
|
|
|
|
|
3,04 ± 0,30* |
|
|||||
|
|
125 |
|
|
|
2,66 ± 0,24* |
|
|
|
0,98 |
|
|
|
2,85 ± 0,36* |
|
|
|
250 |
|
2,25 ± 0,24* |
|
|
|
(р<0,05) |
|
2,11 ± 0,26* |
|
||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|
|||||||||
|
|
|
500 |
|
|
|
1,70 ± 0,20* |
|
|
|
|
|
|
|
1,70 ± 0,24* |
|
|
|
1000 |
|
0,92 ± 0,12 |
|
|
|
|
|
1,02 ± 0,17 |
|
|||||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
5 |
|
|
1,91 ± 0,37* |
|
|
|
|
|
|
2,41 ± 0,36* |
|
|||
|
|
|
25 |
|
|
|
1,97 ± 0,39* |
|
|
|
|
|
|
|
3,17 ± 0,26* |
|
|
-ХЛ |
50 |
|
|
1,45 ± 0,23* |
|
|
|
|
|
|
2,72 ± 0,39* |
|
|||
|
|
125 |
|
|
|
1,74 ± 0,32* |
|
|
|
0,85 |
|
|
|
2,86 ± 0,31* |
|
|
|
250 |
|
|
1,66 ± 0,22* |
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
2,17 ± 0,31* |
|
||||
|
Лц |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
500 |
|
|
|
1,40 ± 0,26* |
|
|
|
|
|
|
|
2,05 ± 0,21* |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
1000 |
|
|
0,78 ± 0,15* |
|
|
|
|
|
|
1,14 ± 0,13 |
|
|||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
1,00 |
|
Примечание: n=15; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
Проанализировав полученные результаты табл. 18 и 19 можно выделить концентрации данного комплексного АГ, которые вызывают наибольший прай-
мирующий эффект на секрецию АФК ПМЛ крови у доноров - это 25×104 и
50×104 микр. кл/мл. На самой большой концентрации, равной 1000×104 микр.
кл/мл происходит снижение праймирования секреции АФК ПМЛ крови у доно-
ров, но оно статистически не отличается от значений контроля.
На рисунке 8 показано, что более выраженное предстимулирующее действие комплексный АГ Klebsiella pneumoniae оказывает на ИП, характеризующий сум-
марную секрецию АФК ПМЛ крови доноров. Кривая зависимости ИП от концен-
трации данного комплексного АГ при измерении Л-ХЛ располагается выше ана-
логичной кривой при измерении Лц-ХЛ.
78
Рис. 8. Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми Л-ХЛ и Лц-ХЛ крови доноров при воздействии комплексного АГ Klebsiella pneumoniae. Примечание.
*- р <0,05 относительно контроля; **- р <0,05 относительно аналогичной точки на кривой Лц-ХЛ.
Также как и в предыдущих сериях экспериментов с комплексными АГ E.coli
и Staphylococcus aureus необходимо выяснить роль компонентов крови в меха-
низмах праймирующего влияния на секрецию АФК ПМЛ комплексного АГ
Klebsiella pneumoniae. Для этого проведено изучение влияния данного комплекс-
ного АГ на секрецию АФК выделенными ПМЛ у доноров по регистрируемым и вычисляемым параметрам Л-ХЛ и Лц-ХЛ.
Из результатов таблицы 20 видно, что при воздействии данного комплексно-
го АГ на выделенные ПМЛ крови не наблюдается двухфазной дозовой зависимо-
сти на регистрируемые параметры ХЛ как в цельной крови. Абсолютные величи-
ны регистрируемых параметров ХЛ отличаются от таковых в цельной крови за счет экранирования ХЛ излучения присутствующими в цельной крови эритроци-
тами.
79
Таблица 20.
Регистрируемые параметры ХЛ суспензии выделенных ПМЛ крови доноров,
при воздействии комплексного АГ Klebsiella pneumoniae, (M ± m)
|
|
|
САГ, |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вид |
|
микр. |
|
Iспонт, |
|
I стим, |
|
Iмах, |
|
Тмах, |
|
Sхл, |
|||||||
|
ХЛ |
|
кл/мл, |
|
имп/с |
|
имп/с |
|
имп/с |
|
с |
|
отн. ед., х103 |
||||||
|
|
×104 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
114,8±5,0* |
|
17703,6±1551,0* |
|
17818,4±1570,0* |
|
1203,4 ± 63,0 |
|
25750,1±1885,6* |
|
||||||
|
-ХЛ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
50 |
|
|
116,4±4,1* |
|
|
19019,0±1403,0* |
|
|
19104,4±1425,0* |
|
|
1177,4 ± 59,0 |
|
|
20525,7±1923,5* |
|
|
|
250 |
|
122,6±4,0* |
|
20816,2±1475,0* |
|
20936,4±1491,0* |
|
1208,8 ± 47,0 |
|
22667,0±1810,0* |
|
|||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 |
|
|
93,2±4,0* |
|
|
19494,2±1589,0* |
|
|
19615,4±1547,0* |
|
|
1213,0 ± 57,0 |
|
|
23105,9±1079,7* |
|
|
|
|
К |
|
|
103,4±3,0 |
|
|
16806,9±1505,0 |
|
|
16817,2±1484,0 |
|
|
1191,5 ± 60,0 |
|
|
20909,5±908,6 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
-ХЛ |
5 |
|
37,8 ± 8,0* |
|
334,2 ± 38,0* |
|
365,4 ± 98,0* |
|
1222,0 ± 61,0 |
|
973,5 ± 60,9* |
|
||||||
|
|
50 |
|
|
38,4 ± 7,0* |
|
|
433,2 ± 41,0* |
|
|
427,6 ± 44,0* |
|
|
1285,6 ± 57,0 |
|
|
753,5 ± 32,0* |
|
|
|
250 |
|
36,4 ± 6,0* |
|
417,9 ± 52,0* |
|
439,8 ± 55,0* |
|
1212,4 ± 83,0 |
|
719,5 ± 86,0* |
|
|||||||
|
Лц |
|
|
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
1000 |
|
|
36,0 ± 7,0* |
|
|
274,6 ± 54,0 |
|
|
287,8 ± 46,0 |
|
|
1244,6 ± 70,0 |
|
|
561,4 ± 28,6* |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
К |
|
|
23,5 ± 2,0 |
|
|
273,0 ± 13,0 |
|
|
297,3 ± 49,0 |
|
|
1254,3 ± 54,0 |
|
|
625,4 ± 21,6 |
|
Примечание: n=15;*-p<0,05 относительно контрольной пробы.
При вычислении параметров, характеризующих праймирующее влияние на суммарную секрецию АФК выделенными ПМЛ у доноров (таблица 21) также не наблюдается двухфазной дозовой зависимости данных параметров как в цельной крови при воздействии комплексного АГ Klebsiella pneumoniae. Наибольший предстимулирующий эффект на суммарную секрецию АФК выделенных ПМЛ крови наблюдается при воздействии концентрацией комплексного АГ - 250×104
микр. кл/мл. Концентрация комплексного АГ - 1000×104 микр. кл/мл на выделен-
ных клетках также вызывает предстимулирующий эффект.
В результате корреляционного анализа нами была получена прямая взаимо-
связь между ИП ПМЛ крови и ИП выделенных ПМЛ у доноров (r=0,94; р<0,05),
характеризующими секрецию О2ˉ.
80
Таблица 21.
Сравнение индексов соотношения площадей под кривыми ХЛ ПМЛ крови и выделенных ПМЛ доноров, при воздействии комплексного АГ
Klebsiella pneumoniae, (M ± m)
|
Вид ХЛ |
|
САГ, |
|
|
ПМЛ крови |
|
r |
|
|
Выделенные ПМЛ |
|||
|
|
микр.кл/мл, ×104 |
|
|
ИП |
|
|
|
ИП |
|||||
|
|
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5 |
|
2,80 ± 0,21* |
|
|
|
|
1,16 ± 0,01* |
|
||||
|
-ХЛ |
|
50 |
|
|
|
3,04 ± 0,30* |
|
|
- 0,43 |
|
|
1,01 ± 0,08 |
|
|
250 |
|
2,11 ± 0,26* |
|
|
|
1,29 ± 0,02* |
|
||||||
|
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
||||||||
|
Л |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 |
|
|
|
1,02 ± 0,17 |
|
|
|
|
1,16 ± 0,01* |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
5 |
|
|
2,41 ± 0,36* |
|
|
|
|
1,69± 0,002* |
|
|||
|
-ХЛ |
|
50 |
|
|
|
2,72 ± 0,39* |
|
|
0,94 |
|
|
1,63 ± 0,03* |
|
|
250 |
|
|
2,17 ± 0,31* |
|
|
|
1,33 ± 0,02* |
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
Лц |
|
|
|
|
(р<0,05) |
|
|
||||||
|
|
1000 |
|
|
|
1,14 ± 0,13 |
|
|
|
|
0,96 ± 0,07 |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
К |
|
|
|
1,00 |
|
|
|
|
|
1,00 |
|
Примечание: n=15; *-p<0,05 относительно контрольной пробы.
В тоже время из результатов таблицы 20 также видно, что при воздействии данного комплексного АГ на регистрируемые параметры Лц-ХЛ выделенных ПМЛ у доноров не наблюдается двухфазной дозовой зависимости, она имеет ха-
рактер обратной дозовой зависимости. Наибольший предстимулирующий эффект на секрецию О2ˉ выделенных ПМЛ наблюдается при воздействии самой низкой концентрацией препарата 5×104 микр. кл/мл. Концентрация 25×104 микр. кл/мл также оказывает предстимулирующий эффект, а самая большая концентрация
1000×104 микр. кл/мл на выделенных клетках вызывает угнетение праймирующе-
го влияния на секрецию О2ˉ, но оно статистически не достоверно.
Таким образом, при сравнении полученных результатов на ПМЛ цельной крови и на выделенных ПМЛ у доноров при воздействии препарата АГ Klebsiella pneumoniae можно заключить, что влияние компонентов крови на механизмы прайминга оказывается в большей степени на суммарную секрецию АФК ПМЛ. В
случае влияния на секрецию О2ˉ ПМЛ прослеживается аналогичная тенденция прайминга, но данный эффект на выделенных ПМЛ выражен слабее.