1. Химические методы:

1. С ванилином – красная окраска

2. С пергидролем (30% H2O2) – красная окраска

3. С р-м Драгендорфа – кристаллы оранжевого цвета

4. С солью Рейнеке – призматические кристаллы

5. С золотохлороводородной кислотой на анабазин – кристаллы

6. С пикриновой кислотой – желтые кристаллы

7. С рактивом Бушарда на пахикарпин – зелёные кристаллы

8. С тиоцианатом кобальта на пахикарпин – голубые кристаллы

2. Инструментальные методы:

1. ТСХ никотина и анабазина. Система растворителей хлороформ-этанол (9:1). Пятна на пластинке обнаруживают путем опрыскивания реактивом Драгендорфа. Цвет пятен и значения величин Rf должны совпадать с таковыми «стандартов».

2. УФ-спектрофотометрия для обнаружения анабазина и никотина. Определяют максимумы светопоглощения при определенной длине волны.

3. Фармакологическое испытание на никотин. На спинку лягушки наносят очищенное с помощью ТСХ извлечение из объекта. Лягушка через 30-60 мин принимает характерную позу. (подтверждающая).

Количественное определение:

1. Экстракционно-фотоколориметрический метод на анабазин и никотин. Оптическую плотность измеряют с помощью фотоэлектроколориметра в кювете с толщиной слоя 10 мм с фиолетовым светофильтром. Расчет концентрации анабазина и никотина проводят по калибровочному графику.

2. Фотоэлектроколириметрия на анабазин. Часть хлороформного экстракта насыщают газообразным хлороводородом и выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл воды, прибавляют 2 мл 1% раствора цианида калия и 5 мл 1% водного раствора хлорамина Б. При этом образуется производное глутаконового альдегида

Жидкость взбалтывают и через 5 мин прибавляют 10 мл 0,5% водного раствора бар

битуровой кислоты. Образуется краситель, имеющий желто-оранжевую окраску

Опт. плотность окрашенного раствора определяют с помощью ФЭК-М с зеленым светофильтром. Расчет кол-ва анабазина проводят по калибровочному графику

3. ВЭЖХ. Определение никотина и анабазина проводят после очистки извлечений, используя методы добавок, внутреннего и внешнего стандарта. Расчет количества алкалоидов в извлечении ведут по соответствующим формулам.

Вопрос 69

Алкалоиды производные тропана и экгонина (атропин, скополамин, кокаин) Химикотоксикологическая характеристика, физикохимические свойства, метаболизм. Особенности изолирования и химико-токсикологического анализа.

Токсикологическое значение.

Атропина сульфат и скополамина гидробромид – применяются в медицине как холиноблокаторы и спазмолитики в виде таблеток и растворов. Кокаин не применяют, а исп-ют только как наркотик: кокаина гидрохлорид, кокаин-основание - «крэк», смесь кокаина и героина - «спидболл».

Антропин – сухость слизистых, расстройства речи, тошнота, рвота, расширение зрачков, не реагирующих на свет, скарлатиноподобная сыть, характерно двигательное возбуждение, а после судорожные приступы, потеря сознания, падение АД, смерть от паралича дыхательного центра.

Скополамин – в отличие от атропина стадия возбуждения при отравлении слабо выражена. Токсические дозы через несколько минут вызывают потерю сознания и кому. При более умеренных формах наступает помешательство, потеря уверенности в себе, галлюцинации, отсутствует самокритика. После выздоровления полная амнезия.

Кокаин – сильнодействующий стимулятор ЦНС. Он способен изменять сознание, снимать усталость и стимулировать работу различных систем организма (аналогично амфетаминам): проявляется в виде опьяняющего веселья, галлюцинаций, позже появляются бред, страх, понижение слуха, вкуса, зрения, конвульсии и паралич. Желание испытать эйфорию и стимулирующее действие приводит к болезненному пристрастию - кокаинизму. Смерть от паралича дых. центра.

Попадают инъекционно, перорально.

Метаболизм. 1 фаза – гидролиз, деметилирование, гидроксилирование.

2 фаза – глюкуронирование.

Объекты: как обычно (трупы, нарики, отравления)

Изолирование. Общими методами – в щелочное извлечение. Частный метод – Крамаренко.

Особенности изолирование кокаина из трупного материала. Обнаруживают только при приеме значит. кол-в, т.к. он быстро гидролизуется в организме до экгоина и бензойной кислоты.

При изолировании алкалоидов объекты подкисляют щавелевой или серной кислотами до рН=2-3. В этих условиях экгонин существует в форме цвиттер-иона.

Последующее подщелачивание на второй фазе изолирования раствором аммиака перед экстракцией хлороформом до рН=8-10 приводит к образованию аммонийной соли по карбоксильной группе

Соли экгонина нерастворимы в хлороформе, поэтому в процессе экстракции они не извлекаются ни при рН=2-3, ни при рН=8-10. Это позволяет отделить алкалоид от продуктов деструкции.

Для изолирования экгонина перед проведением экстракции его переводят в метиловый эфир, экстрагируют его хлороформом и проводят исследование.

Обнаружение.