vse_metody_MIKROB

ской формы) является одновременное присутствие в крови HBs- и HВeAg. При хронической форме в стадии ремиссии в крови длительно и стабильно обнаруживается только HBs-антиген.

определение IgM к HBcAg, что свидетельствует об острой форме заболевания.

2.ПЦР: определение ДНК вируса гепатита В в крови, что свидетельствует об

остром течении гепатита.

Активная (плановая) специфическая профилактика гепатита В: ре-

комбинантная генно-инженерная вакцина (Россия) – содержит HBsAg (входит в календарь прививок). Длительность поствакцинального иммунитета не менее 7 лет.

Вирус гепатита D (дельта вирус): дефектный РНК-содержащий вирус (не имеет суперкапсидной оболочки), является сателлитом (спутником) вируса гепатита В, т.к. способен к репродукции только в HBV-инфицированных клетках. Дельта-вирус использует HBsAg в качестве своего оболочечного белка для защиты собственного генома.

Источник инфекции: больной или вирусоноситель. Пути передачи: аналогичные гепатиту В.

Клиническая картина аналогична проявлениям гепатита В, но с преобладанием более тяжелого течения.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к вирусу гепатита D.

2.ПЦР: обнаружение РНК вируса в крови больного.

Вирус гепатита С (HCV): РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку. Нуклеиновая кислота вируса обладает высокой генетической изменчивостью вследствие частых мутаций.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

11

Пути передачи: парентеральный (основной) – при инъекциях и гемотрансфузиях, реже – трансплацентарный и половой.

Каждый второй пациент с HCV-инфекцией относится к лицам, вводившим внутривенно наркотики (гепатит наркоманов). В мире более 1/3 населения инфицированы HCV.

Инкубационный период: от 6 до 120 недель.

Клиническое течение: В связи с высоким уровнем генетической изменчивости в течение заболевания, HCV «ускользает» от иммунного надзора организма. Эта особенность определяет значительное количество (до 85%) хронических форм заболевания. Острое заболевание протекает, как правило, в виде стертой или бессимптомной (инаппарантной) форм, но в 50% случаев переходит в хроническую форму.

Осложнения: цирроз печени, первичный рак печени.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к HCV в сыворотке крови больного.

2.ПЦР: определение РНК вируса гепатита С в крови больного.

Вирус гепатита G: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку. Гепатит G в большинстве случаев протекает как микст-инфекция с гепати-

том C.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Основной путь передачи: парентеральный.

Репродукция вируса происходит по типу продуктивной инфекции. Клиническое течение: заболевание протекает в острой (как правило, бес-

симптомно) или в хронической форме.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к вирусу гепатита G в сыворотке больного.

2.ПЦР: выявление вирусной РНК в крови больного.

12

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Изучение схемы вирусологического исследования фекалий больного энтеровирусной инфекцией.

Учет реакции нейтрализации в культуре клеток с типоспецифическими диагностическими сыворотками к вирусам Коксаки В

Заключение о типе вируса сделать самостоятельно.

13

Занятие № 31

Тема. Герпетическая инфекция. ВИЧ-инфекция. Характеристика вируса бешенства. Характеристика арбовирусов, вирусов клещевого энцефалита, геморрагических лихорадок. Вирусы папилломы человека. Вирусы группы оспы.

Цель занятия. Изучить характеристику герпетических вирусов, возбудителей ВИЧ-инфекции, вирусов бешенства, арбовирусов, клещевого энцефалита, геморрагических лихорадок, папилломавирусов, вирусов группы оспы. Изучить микробиологическую диагностику, специфическую профилактику и специфическое лечение вызываемых заболеваний.

I.Теоретические знания:

1.Общая характеристика представителей семейства Herpesviridae.

2.Характеристика вирусов простого герпеса, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

3.Характеристика Herpesvirus varicella-zoster, вызываемые заболевания.

4.Характеристика Herpesvirus cytomegalus, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика.

5.Характеристика вируса Эпштейна-Барр, вызываемые заболевания, диагностика.

6.ВИЧ-инфекция, микробиологическая диагностика, СПИД-ассоциированные заболевания.

7.Характеристика вируса бешенства, микробиологическая диагностика, ле- чебно-профилактическая иммунизация.

8.Общая характеристика арбовирусов. Роль отечественных исследователей в их изучении.

9.Вирусы весенне-летнего клещевого энцефалита, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и специфическое лечение.

10.Геморрагические лихорадки, характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика.

11.Характеристика вирусов папилломы человека, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

12.Вирусы группы оспы.

II.Практические навыки:

1.Световая микроскопия срезов слюнных желез в окраске гематоксилинэозином с целью обнаружения типичных гигантских клеток («совиный глаз») для посмертной диагностики цитомегаловирусной инфекции.

2.Световая микроскопия мазков-отпечатков из области гиппокампа человека в окраске по Селлерсу для посмертной диагностики бешенства.

1

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1. Общая характеристика представителей семейства Herpesviridae

Семейство Herpesviridae разделено на 3 подсемейства ( , и -virinae), которые включают 8 типов герпесвирусов человека (табл.3).

Герпесвирусы (греч. herpes – ползучий): ДНК-содержащие, имеют суперкапсидную оболочку.

Таблица 3

Герпес-вирусы человека, вызываемые заболевания

2

2. Характеристика вирусов простого герпеса, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика

Вирусы простого герпеса (HSV) подразделяют на 2 антигенных типа:

HSV-1 и HSV-2.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Заражение HSV-1 происходит обычно в раннем возрасте (от 6 месяцев до 3 лет) контактным (через инфицированную слюну при поцелуях или попадании на кожу) и воздушно-капельным путями. Около 90% населения земного шара инфицированы HSV-1.

Патогенез: после проникновения в организм вирус размножается в клетках эпителия зон первичного инфицирования (слизистые оболочки ротовой полости и кожи), а затем через нервные окончания проникает в паравертебральные ганглии и ганглии тройничного нерва, где длительно (чаще пожизненно) персистирует в нейронах и находится в латентном состоянии.

Под действием активирующих факторов (УФ-излучение, лихорадка, переохлаждение, эмоциональный стресс, иммуносупрессия и др.) геном вируса мигрирует по аксону в эпителиальные клетки, латентная инфекция переходит в острую и сопровождается различными клиническими симптомами.

Клинические формы:

герпес кожи: пузырьковые высыпания на губах, крыльях носа, щеках, ягодицах и др.;

герпетический стоматит;

офтальмогерпес (кератит): при этой форме заболевания возможна необратимая потеря зрения вследствие развития язв роговицы с последующим рубцеванием;

энцефалит (редкая форма заболевания) с высокой летальностью.

Заражение HSV-2 происходит преимущественно половым путем.

Патогенез: HSV-2 из первичного очага поражения (слизистые половых путей) мигрирует в поясничные и крестцовые ганглии, где, подобно HSV-1, длительно персистирует и формирует латентную инфекцию. HSV-2 нередко ак-

3

тивируется под действием тех же факторов, что и HSV-1, а также при менструации, что приводит к манифестации инфекции.

Клинические формы:

генитальный герпес при половом пути заражения. Заболевание характеризуется пузырьково-язвенными высыпаниями на коже и слизистой оболочке половых органов, сильным зудом и болевым синдромом;

герпес новорожденных: тяжелая генерализованная инфекция, которая чаще проявляется в форме герпетической экземы или менингоэнцефалита. Инфицирование происходит во время родов (интранатально);

HSV-2 причастен к возникновению рака шейки матки и карциномы простаты.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-методы: РИФ и ИФА для определения вирусных антигенов в содержимом везикул, слюне и соскобах из области поражений.

2.ПЦР.

3.Серологический: ИФА, РИФ, РСК – для диагностики первичной инфекции.

4.Вирусологический: заражение культуры клеток или куриных эмбрионов исследуемым материалом;

Ввиду значительной инфицированности населения, обнаружение сывороточных антител не имеет существенной диагностической ценности.

Специфическая профилактика рецидивирующего герпеса осуществляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины, содержащей HSV-1 и HSV-2.

3. Характеристика Herpesvirus varicella-zoster, вызываемые заболевания

Herpesvirus varicella-zoster (HVZV): ДНК-содержащий, имеет суперкап-

сидную оболочку.

4

H.varicella-zoster вызывает:

ветряную оспу – при первичном инфицировании;

опоясывающий герпес – в случае активации оставшегося в организме вируса после переболевания ветряной оспой.

Ветряная оспа – острая детская инфекция.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Основной путь передачи: воздушно-капельный. Реже передача HVZV может происходить трансплацентарно и приводить к развитию тяжелой формы врожденной ветряной оспы.

Патогенез: после попадания в организм вирус размножается в клетках эпителия слизистой оболочки верхних дыхательных путей, затем попадает в кровь (виремия) и распространяется по всему организму, главным образом в эпителий кожи и слизистых оболочек.

Инкубационный период: 11-23 дня.

Клинические проявления: лихорадка, интоксикация и папулезновезикулезная сыпь на коже и слизистых оболочках.

После выздоровления вирус персистирует в нейронах паравертебральных ганглиев и ганглиях тройничного и лицевого нервов. У некоторых переболевших людей вирус периодически активируется, обычно в возрасте старше 40-50 лет, и вызывает опоясывающий герпес, который характеризуется везикулезными высыпаниями на коже, чаще по ходу межреберных нервов, и резкими болями (невралгии) в очаге поражения.

4. Характеристика Herpesvirus cytomegalus, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика

H.cytomegalus (HCMV): ДНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку, вызывает цитомегаловирусную инфекцию (ЦМВИ).

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

5

Инфицирование вирусом распространено повсеместно (антитела против HCMV выявляют у 80% людей старше 30 лет).

Вирус содержится во всех биологических жидкостях организма (слюна, вагинальный секрет, сперма, кровь, грудное молоко и др.), что приводит к многообразию путей заражения.

Пути заражения:

1.воздушно-капельный;

2.контактно-бытовой;

3.половой;

4.гемотрансфузионный (фактор передачи – кровь инфицированного донора);

5.трансплацентарный и интранатальный;

6.алиментарный (чаще через грудное молоко);

7.трансплантационный.

Патогенез: вирус обладает выраженным тропизмом к эпителию слюнных желез и почечных канальцев, где происходит его репродукция и персистенция при латентной инфекции. Вирус активируется при ослаблении Т-клеточного иммунитета с развитием манифестированной формы заболевания. В связи с этим, ЦМВИ относится к наиболее частой СПИД-ассоциированной инфекции.

Клинические проявления характеризуются поражением многих органов и тканей с разнообразной симптоматикой – от пожизненной латентной инфекции до генерализованной формы.

Беременность может приводить к реактивации вируса.

Наибольшую опасность представляет врожденная ЦМВИ, характеризующаяся гепатоспленомегалией, желтухой, микроцефалией и другими пороками развития с частым летальным исходом. Врожденные аномалии наиболее типичны в случаях, когда плод инфицируется в I триместре, т.к. в этот период идет закладка органов. Заражение плода происходит при первичном инфицировании беременной, у которой нет антител, способных нейтрализовать вирус. Поэтому врожденная ЦМВИ возникает редко (≈1%).

Реактивация вируса из латентного состояния в шейке матки иногда приводит к интранатальному заражению новорожденного.

6

Материал на исследование: моча, слюна, ликвор (при поражении ЦНС), кровь, отделяемое цервикального канала, уретры.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-методы:

микроскопический: выявление в мазках, окрашенных гематоксилинэозином, гигантских клеток («совиный глаз») с внутриядерными включениями вируса;

РИФ: выявление вирусных антигенов в исследуемом материале.

2.ПЦР.

3.Серологический метод: ИФА – определение IgM и IgG. Доказательством врожденной ЦМВИ является наличие в сыворотке новорожденного IgM, которые не передаются через плаценту.

5.Характеристика вируса Эпштейна-Барр, вызываемые заболевания,

диагностика

Вирус Эпштейна-Барр (HEBV): ДНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель. Возбудитель выделяется со слюной.

Пути передачи: контактный (при поцелуях), воздушно-капельный, реже – гемотрансфузионный.

Патогенез: HEBV поражает лимфоидную ткань всего организма и имеет тропизм к В-лимфоцитам, где происходит репродукция вирусов. Вследствие этого происходит размножение В-лимфоцитов без их гибели, но с преобладанием незрелых клеток.

Вирус Эпштейна-Барр вызывает:

Инфекционный мононуклеоз: чаще болеют в детском и юношеском возрасте. Антитела к вирусу имеются у большинства людей. Заболевание характеризуется лихорадкой, болями в горле, фарингитом, лимфоаденопатией (увеличение всех групп лимфоузлов, особенно затылочных, подчелюстных, задне-

7