Клиническая биохимия / Кленова Н.А. Биохимия патологических состояний

кольца эквимолярного количества биливердина IX-α. В этой реакции гем участвует в качестве катализатора.

У птиц и земноводных зеленый пигмент биливердин IX-α экскретируется из организма; у млекопитающих фермент НАДФН- биливердинредуктаза катализирует восстановление метенильного мостика между пиррольными кольцами III и IV в метиленовую группу, в результате образуется желтый пигмент билирубин IX-α. Суточное образование билирубина у взрослого человека составляет около 250-350 мг.

Дальнейшее превращение билирубина происходит в основном в печени и включает три процесса: поглощение билирубина паренхимальными клетками печени; конъюгацию билирубина в гладком ЭР и секрецию билирубина из эндоплазматического ретикулума в желчь.

Билирубин слабо растворим в плазме и специфически связывается альбумином. Каждая молекула альбумина имеет два центра связывания билирубина – высоко- и низкоаффинный. Поэтому часть билирубина (около 25 мг на 100 мл плазмы) связывается прочно, а часть легко диссоциирует с молекулы белка. В печени происходит переход билирубина от альбумина на синусоидальную поверхность гепатоцитов при участии насыщаемой системы переноса, в функционировании которой участвует специфический переносчик. Эта система облегченного транспорта имеет очень большую емкость и даже при патологических условиях не лимитирует скорость метаболизма билирубина. Потребление билирубина зависит от его потребления в последующих метаболических процессах.

Вгепатоцитах к билирубину присоединяются полярные группировки, повышающие его растворимость в воде. Процесс получил название конъюгации, он осуществляется специальной системой ферментов ЭПС. У млекопитающих билирубин секретируется в кровь преимущественно в форме билирубиндиглюкуронида. При нарушении метаболизма билирубина его конъюгаты находятся в форме билирубинмоноглюкуронидов. Секреция конъюгированного билирубина в желчь идет против весьма высокого градиента концентрации и осуществляется с помощью механизма активного транспорта, который, вероятно, является скорость-лимитирующей стадией всего процесса метаболизма билирубина в печени.

Вусловиях физиологической нормы практически весь секретируемый

вжелчь билирубин (97%) находится в коньюгированной форме. В толстом кишечнике билирубин подвергается воздействию специфических бактериальных ферментов и восстанавливается в группу бесцветных тетрапиррольных соединений, называемых уробилиногенами. Небольшая часть уробилиногенов всасывается из толстого кишечника в кровь и снова попадает

впечень, совершая внутрипеченочный уробилиногеновый цикл. При пато-

логических состояниях, например при накоплении избыточного количества желчных пигментов или при заболеваниях печени, нарушающих работу внутрипеченочного цикла, уробилиноген может выделяться с мочой.

111

Внорме большая часть бесцветных уробилинногенов, образующихся

втолстой кишке под действием кишечной микрофлоры, окисляется в уробилины (окрашенные соединения) и удаляется с фекалиями.

Диагностическую значимость имеет определение общего билирубина,

конъюгированного(прямого) и свободного (непрямого) билирубина в плазме крови. В норме количество общего билирубина составляет 8,5-20,5 мкМ/л;

– свободного 6,4-17,1 мкМ/л; конъюгированного – 0,9-4,3 мкМ/л. Гипербилирубинемия может быть следствием образования билирубина в бόльшем количестве, чем то, которое нормальная печень может экскретировать или же быть следствием повреждений печени, нарушающих экскрецию билирубина. Помимо повреждений самой печени к развитию гипербилирубинемии приводит закупорка желчевыводящих протоков печени, препятствующая выделению билирубина. Накопление билирубина в крови по достижении им определенной концентрации приводит к диффундированию его в ткани и развитию желтухи. В зависимости от того, какой тип билирубина превышает норму, в плазме различают постгепатитную гипербилирубинемию (повышен неконъюгированный билирубин) и регургитационную гипербилирубинемию (повышен конъюгированный билирубин). В центральную нервную систему через гематоэнцефальный барьер может проникать неконъюгированный билирубин, поэтому энцефалопатия, связанная с токсическим действием билирубина, характерна только для постгепатитной гипербилирубинемии.

Неконъюгированная гипербилирубинемия. Наиболее распространенной формой данного вида гипербилирубинемии является так называемая физиологическая желтуха, наблюдаемая как временное явление у новорожденных. Причиной этой гипербилирубинемии служат ускоренный гемолиз

инезрелое состояние печеночной системы поглощения, конъюгации и секреции билирубина. При этом не только понижается активность УДФглюкуронилтрансферазы, но и, вероятно, сказывается недостаточность синтеза субстрата этого фермента – УДФ-глюкуроновой кислоты. Поскольку накапливающийся билирубин находится в неконъюгированной форме, то существует угроза развития у новорожденных с физиологической желтухой энцефалопатии. К данному типу гипербилирубинемии относится синдром Криглера-Найяра I и II типа. Синдром Криглера-Найяра I типа представляет собой метаболическое нарушение конъюгации билирубина. Причиной заболевания считается отсутствие активности билирубин- УДФ-глюкуронилтрансферазы в гепатоцитах. Болезнь обычно приводит к летальному исходу в первые 15 месяцев жизни. Синдром Криглера-Найяра II типа – редкое наследуемое заболевание, характеризующееся менее серьезными дефектами в системе конъюгирования билирубина и более доброкачественным течением. Весь накапливающийся билирубин относится к неконъюгированному типу, хотя кровь больных содержит билирубинглюкуронид. Отсюда возникло предположение, что генетическое нарушение

112

может затрагивать печеночную УДФ-глюкуронилтрансферазу, которая катализирует присоединение второй глюкуронильной группировки к билирубинмоноглюкурониду. Было показано, что больные с этим синдромом поддаются лечению большими дозами фенобарбитала. Снижение гипербилирубинемии вызвано, вероятно, индукцией системы метаболизма билирубина, а не только стимуляцией конъюгирования билирубина. К этому виду гипербилирубинемии относится также болезнь Гильберта. Заболевание представляет собой гетерогенную группу нарушений, многие из которых являются следствием компенсированного гемолиза, сопряженного с неконъюгированной гипербилирубинемией. А также имеются повреждения паренхимы печени, приводящие к снижению поглощения билирубина этими клетками. У больных выявляется уменьшение активности билирубин- УДФ-глюкуронилтрансферазы.

Неконъюгированная гипербилирубинемия может быть следствием дисфункции печени, наступающей после токсического действия хлороформа, четыреххлористого углерода и других токсинов или как результат вирусного гепатита, цирроза. Большинство этих приобретенных нарушений наступает из-за повреждения паренхимы печени и обозначается как

токсическая гипербилирубинемия.

Конъюгированная гипербилирубинемия. Поскольку конъюгированный билирубин растворим в воде, то он обнаруживается в моче большинства больных конъюгированной гипербилирубинемией, поэтому ее называют холеурической желтухой. К конъюгированной гипербилирубинемии отно-

сится хроническая идиопатическая желтуха (синдром Дубина-Джонсона),

которая представляет собой аутосомно-рецессивное нарушение печеночной секреции конъюгированного билирубина в кровь. Нарушение секреции конъюгированных веществ не ограничивается билирубином, оно касается также и других конъюгированных соединений: эстрогенов, пигментов, индикаторов.

Конъюгированная гипербилирубинемия возникает также при холестазе – закупорке желчных протоков. В этом случае желчный пигмент, поступающий из крови в гепатоциты, не может экскретироваться и вновь поступает в печеночные вены и лимфатические сосуды.

Некоторые особенности обмена гликопротеидов и его нарушения.

Муцины и мукоиды содержатся в соединительной ткани и слюне. Небольшие количества мукоидов обнаруживаются в сыворотке крови и моче. При электрофорезе гликопротеиды движутся с фракцией α1- и α2-глобулинов. Увеличение содержания этих фракций характерно для тяжелых воспалительных процессов: туберкулеза, пневмонии, плеврита, ревматизма, аппендицита и др. При ревматизме определение гликопротеидов имеет прогностическое значение – служит для оценки тяжести процесса (повышение может составить 50-60%).

113

По природе связей между полипептидными и олигосахаридными цепями гликопротеиды можно разделить на 4 класса: 1) содержащие связь Сер (или Тре)—N-ацетилгалактозамин; 2) содержащие связь Сер— ксилоза; 3) коллагены, содержащие связь гидроксилизин—галактоза; 4) содержащие связь Асн—N-ацетилглюкозамин.

Наиболее характерными нарушениями обмена гликопротеидов являются изменения соединительной ткани при патологических процессах: амилоидозы и коллагенозы. Амилоидозы объединяют разные патологические процессы, ведущие к образованию в тканях амилоида. Основной компонент амилоида – фибриллярные белки типа коллагена и плазменные гликопротеиды: α- и β-глобулины, фибриноген. Среди полисахаридов, присутствующих в амилоиде, преобладают хондроитинсульфаты. Амилоид имеет фибриллярную структуру, каждая фибрилла состоит из двух субфибрилл, расположенных параллельно друг другу. Клиническая картина зависит от локализации амилоида и интенсивности амилоидных отложений. Особенно четкие проявления свойственны поражениям почек, сердца, нервной системы и кишечника. Лабораторно регистрируется протеинурия (преимущественно альбуминурия) с потерей от 2 до 20 г белка в сутки. В крови диспротеинемия: снижение альбуминов при повышении уровня α 2- и γ-глобулинов, рост глико- и липопротеинов.

Часть коллагенозов преимущественно связана с нарушениями иммуногенеза. Морфологически эти состояния проявляются генерализованной альтерацией внеклеточных компонентов соединительной ткани, в основном – коллагеновых волокон и самого коллагена. Отдельные заболевания из группы коллагенозов, такие как: системная красная волчанка, ревматизм, системная склеродермия, ревматоидный артрит, отличаются по клинической картине и этиологии. Однако общность патогенетических механизмов обусловливает тем не менее однородность биохимических проявлений коллагенозов. К ним относятся прежде всего биохимические признаки воспаления, рассмотренные нами в первой главе: рост уровня α 2- и γ-глобулинов, серомукоидов, появление С-реактивного белка, повышение содержания α1-антитрипсина и α1-гликопротеида, увеличение СОЭ и фибриногена и другие.

Другая разновидность коллагенозов обусловлена аномалиями самого коллагена и его сборки. В тканях млекопитающих присутствует не менее пяти различных типов коллагенов. Наиболее характерная особенность коллагеновых белков – это их трехспиральная структурная организация. Каждая субъединица представляет собой левозакрученную спираль с шагом три аминокислотных остатка. Три такие левозакрученные спирали организуются в правозакрученную суперспираль. В результате формируется жесткая палочковидная молекула с диаметром 1,4 нм и длиной около 300 нм. Еще одной характерной особенностью молекул коллагенов является то, что каждый третий аминокислотный остаток тройной спирали

114

представляет собой глицин. Размеры глициновых остатков позволяют им разместиться под центральным ядром тройной спиральной молекулы. Таким образом, центральное ядро этой молекулы состоит из глициновых остатков всех трех субъединиц. Эту повторяющуюся структуру можно представить как (Гли-Х-Y)n, где X,Y – любые аминокислотные остатки. У коллагена млекопитающих около 100 Х-положений заняты пролином, около 100 Y-положений – 4-гидрооксипролином. Остатки гидрооксипролина придают структуре дополнительную стабильность за счет образования большого количества внутримолекулярных водородных связей (для этого используются окружающие молекулы воды). В некоторых Х-положениях коллагена содержится также 3-гидроксипролин, а в Y-положениях – 5-гидроксилизин. Тройная спираль коллагена стабилизируется многочисленными межцепочечными поперечными сшивками между лизиловыми и гидроксилизиловыми остатками. Зрелый коллаген представляет собой гликопротеин, содержащий сахариды, связанные с белковой цепью по остаткам гидроксилизина О-гликозидной связью. Молекулы коллагена ассоциируются в фибриллы. Коллагеновые фибриллы образуют продольные зигзагообразные структуры длиной чуть меньше ¼ длины тройной спирали. Между концом одной тройной спирали и началом следующей имеется пространство, которое может служить местом отложения кристаллов гидроксиапатита при формировании костной ткани.

Синтез коллагена осуществляется в виде предшественника, который подвергается значительной посттрансляционной модификации. Наиболее ранним предшественником коллагена является препроколлаген, который содержит на N-конце лидерную (сигнальную) последовательность из 100 аминокислотных остатков. Препроколлаген образуется на рибосомах, прикрепленных к ЭПС. При поступлении в каналы ЭПС сигнальная последовательность отщепляется, пролиновые и лизиновые остатки подвергаются гидроксилированию по мере продвижения по ЭПС с помощью ферментов: пролил-4-гидроксилазы, пролил-3-гидроксилазы и лизилгидроксилазы. Фермент гликозилтрансфераза переносит глюкозу или галактозу на ряд остатков гидроксилизина. Молекула проколлагена содержит на концах пептиды, которые отсутствуют в зрелом коллагене. Оба пептида содержат остатки цистеина; N-концевой пептид образует за счет этих остатков только внутрицепочечные дисульфидные связи, С-концевой – и внутри- и межцепочечные. После образования этих связей идет формирование тройной спирали, что делает невозможным дальнейшее гидроксилирование пролиловых и лизиловых остатков, а также гликозилирование гидроксилизиловых остатков. После завершения этого процесса молекулы выводятся из клеток через аппарат Гольджи. Внеклеточные аминопротеаза и карбоксипротеаза отщепляют концевые пептиды, и цепи коллагена спонтанно собираются в фибриллы. Однако коллагеновые волокна приобретают зрелость только тогда, когда произойдет перекрестное связывание их ковалентными

115

связями. Процесс происходит с помощью фермента лизилоксидазы (медьсодержащей), осуществляющей окислительное дезаминирование ε-аминогрупп некоторых лизиловых и гидроксилизиловых остатков с образованием реактивных альдегидов. Перекрестное связывание цепей и спиральных молекул идет через Шиффовы основания и альдольную конденсацию и ε-аминогруппами других лизиловых, гидроксилизиловых и гликозилированных остатков.

Клетки, секретирующие коллаген, образуют также фибронектин, который связывается с агрегирующимися коллагеновыми волокнами, а также с протеогликанами: гепаратсульфатами и дерматансульфатами, формируя экстрацеллюлярный матрикс соединительной ткани.

Наследственные заболевания, связанные с нарушением синтеза и созревания коллагеновых волокон, включают несовершенный остеогенез,

синдром Марфана, синдром Элерса-Данлоса, синдром Менке. Несовершен-

ный остеогенез обусловлен генетической поломкой синтеза препроколлагена на рибосомах (нефункционирующие или неэффективно функционирующие аллели про-α-цепей коллагена I типа). Синдром Марфана – удлинение про-α-цепей коллагена II типа, нарушение формирования поперечных сшивок. Синдром Элерса-Данлоса – мутации, обусловливающие изменения про-α-цепей коллагена III типа, резкое уменьшение коллагена III типа; дефицит лизилгидроксилазы – нарушение образования поперечных связей; нарушение метаболизма меди – нарушение образования поперечных связей. Синдром Менке – нарушение метаболизма меди (дефицит лизиноксидазы и нарушение образования поперечных сшивок).

2.3. Нарушения обмена липидов и липоидов [3,8,10,11,13,14]

Несмотря на значительную энергетическую ценность липидов, это не является их основной функцией в организмах. Компоненты пищевых липидов служат для синтеза фосфолипидов мембран клеток, облегчают поступление жирорастворимых витаминов, содержат незаменимые жирные кислоты: линолевую, линоленовую, арахидоновую. У людей арахидоновая кислота образуется из линолевой и не является эссенциальной (незаменимой), если линолевая присутствует в пище в достаточном количестве. На основе арахидоновой кислоты осуществляется синтез биологически активных соединений: лейкотриенов, простагландинов, тромбоксанов. Подкожная жировая ткань у млекопитающих участвует в теплоизоляции, а жировые капсулы внутренних органов защищают их от механических повреждений. Жироподобные соединения (липоиды), главным образом производные фенантрена, также необходимы как мембранные компоненты и предшественники биологически активных соединений: половых гормонов, кортикостероидов, кальциферолов.

116

Нарушения процессов переваривания и всасывания липидов

Наибольшую часть пищевых липидов составляют триглицериды, меньше – фосфолипиды, стероидные соединения. Они подвергаются гидролитическому расщеплению под действием панкреатических ферментов: липазы, фосфолипазы А2 и холестеролэстеразы.

Панкреатическая липаза действует на поверхности раздела жир-вода тонкоэмульгированных липидных капель. Оптимум рН липазы равен 7,8. Она выделяется в неактивной форме (колипаза). Для ее активации необходимы ограниченный гидролиз с помощью трипсина и желчные кислоты. Эмульгирование жиров также осуществляется желчными кислотами (их солями). Желчь, имеющая щелочной рН, способствует нейтрализации кислотности желудочного сока и оптимизации действия ферментов панкреатического сока. Панкреатическая липаза специфична в основном по отношению к гидролизу эфирных связей в 1 и 3 положениях, а гидролиз 2 связи затруднен. Удаление последней жирной кислоты требует изомеризации в первичную эфирную связь, что осуществляется в пищеварительной системе крайне медленно, поэтому продуктами переваривания триацилглицеролов оказываются преимущественно 2-моноацилглицеролы. До глицерола и жирных кислот расщепляются менее одной четверти триацилглицеролов.

Панкреатический сок содержит фосфолипазу А2, также в виде проформы, которая активируется по тому механизму, что и липаза (ограниченный гидролиз трипсином). Для проявления активности фосфолипазы А2 необходимы ионы кальция. Фосфолипаза А2 гидролизует эфирную связь во 2 положении глицерофосфолипидов как желчного, так и пищевого происхождения с образованием лизофосфатидов.

Холесторолэстераза катализирует гидролиз эфиров холестерина с жирными кислотами, холестерол всасывается затем в неэстерированной, свободной форме.

2-Моноацилглицеролы, жирные кислоты, небольшие количества

1-моноацилглицеролов диффундируют в смешанные мицеллы, состоящие из желчных солей, фосфатидилхолина и холестерола желчного происхождения. В мицеллы также поступают лизофосфатиды и пищевой холестерол. Мицеллы всасываются через щеточную каемку активными энтероцитами кишечника. Здесь происходит ресинтез триацилглицеролов по механизму, сходному с этим процессом в других клетках. Всосавшиеся лизофосфолипиды вместе с большей частью всосавшегося холестерола также реацитилируются ацил-КоА с регенерацией фосфолипидов и холестериловых эфиров. Все вновь синтезированные липиды, включая триглицериды, фосфолипиды, холестерол и его эфиры, свободные жирные кислоты, жирорастворимые витамины, объединяются в хиломикроны, которые в составе млечной жидкости (хилуса) собираются в лимфатических сосудах брюшной полости, а затем поступают в кровь через грудные лимфатические протоки.

117

Расстройства жирового обмена могут возникать в процессе переваривания и всасывания. Большое значение эта патология имеет в детском возрасте из-за несовершенства процессов пищеварения. Заболевания, связанные с нарушением процессов переваривания и всасывания жиров, можно разделить на четыре группы.

I группа. Различные заболевания поджелудочной железы приводят к недостаточности панкреатической липазы: врожденное недоразвитие поджелудочной железы, аплазия выводного протока, некроз, фиброз, ги-

поплазия. Пациенты жалуются на тошноту и тяжесть при употреблении жирной пищи, рвоту, диарею; имеют малую массу тела. При непереваривании жиров они появляются в каловых массах. Жиры плохо перевариваются также при острых и хронических панкреатитах, раковых опухолях поджелудочной железы.

IIгруппа. Недостаточное поступление желчи в двенадцатиперстную кишку приводит к нарушению эмульгирования жиров и активации липазы.

Ктаким заболеваниям относятся: врожденная аплазия желчных путей, гепатиты, циррозы печени.

IIIгруппа. Желудочно-кишечные заболевания, связанные с ускорением прохождения пищи, анатомическое и функциональное поражение слизистой оболочки кишечника.

IV группа. Воспаления кишечника различной этиологии: язвенные колиты, дизентерия.

Для определения степени переваривания жиров определяют их наличие в каловых массах.

Транспорт липидов кровью и взаимодействие липопротеидных ком-

плексов с клетками. В плазме крови, куда липиды поступают из лимфы через лимфатические протоки, определяется в среднем 5,7 г/л общих липидов (от 4 до 8 г/л). Все липиды находятся в связанной с белками форме в виде липопротеидных мицелл. Свободные жирные кислоты составляют около 5% от всей липидной фракции и транспортируются в связи с альбумином.

Липопротеины плазмы – водорастворимые белково-липидные комплексы – являются основной транспортной формой липидов в крови. Липопротеины делят на несколько классов по плотности и составу [1,5,14]: хиломикроны (ХМ), липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП); липопротеины низкой плотности (ЛПНП); липопротеины промежуточной плотности (ЛППП); липопротеины высокой плотности (ЛПВП); липопротеины очень высокой плотности (ЛПОВП). Все липопротеидные частицы включают в себя 5 основных компонентов: белки (апопротеины), фосфолипиды, холестерин, эфиры холестерина и триглицериды. Эфиры холестерина и триглицериды формируют гидрофобное ядро мицеллы, а свобод-

118

ный холестерин и фосфолипиды образуют поверхностный липидный монослой, в который встроены апопротеины.

Хиломикроны образуются в эпителиальных клетках тонкой кишки (энтероцитах) в процессе всасывания пищевых жиров и характеризуются наименьшим содержанием апопротеинов (1-2%), среди которых преобладают апопротеины В и С. Диаметр частиц около 500 нм, а плотность составляет в среднем 0,94 г/мл. При низком содержании апопротеинов хиломикроны имеют высокий процент триглицеридов пищевого происхождения (86-94%) и являются транспортной формой последних на пути: кишечная стенка → грудной лимфатический проток → кровяное русло → жировая ткань и некоторые другие ткани.

Липопротеины очень низкой плотности образуются в клетках пе-

чени. На долю белков в них приходится 7-10% от общей массы, причем преобладают апопротеины В, С и Е. Диаметр частицы составляет от 30 до 100 нм, плотность – 0,94-1,006 г/мл. От хиломикронов их отличает, кроме более высокого процента апопротеинов и их состава, то, что они являются транспортной формой эндогенно синтезированных триглицеридов.

Липопротеины низкой плотности и липопротеины промежуточ-

ной плотности формируются в крови при частичном или полном распаде ЛПОНП. На долю белков приходится 22-25% от общей массы, диаметр частиц 15-20 нм, плотность – 1,006-1,063 г/мл. Доминирует апопротеин В. ЛПНП содержат самый высокий процент холестерина и его эфиров (до 50%) и около 30% фосфолипидов. Частицы представляют собой основную транспортную форму холестерина.

Липопротеины высокой плотности характеризуются высоким со-

держанием белка (около 50%), частью формируются в печени или в энтероцитах, а другая часть образуется при распаде ХМ и ЛПОНП. Диаметр частиц 10-15 нм, плотность – 1,06-1,125 г/мл. Среди апопротеинов преобладают А-I и А-II, меньше апопротеина С. В условиях гиперхолестеринемии ЛПВП могут содержать в числе основных белков апопротеины Е. Основной функцией ЛПВП служит обратный транспорт холестерина из периферических тканей в печень для последующего окисления в желчные кислоты или выведения в составе желчи.

Липопротеины очень высокой плотности открыты недавно, плот-

ность может составлять от 1,125 до 1,21 г/мл. Частицы имеют особый состав: 27% белков, 65% липидов и 8% углеводов. По белковому составу апопротеин В – 65%; альбумин – 15%; специфический апопротеин – 20%. Функции данного класса еще не выяснены.

Взаимодействие липопротеиновых мицелл с клетками

Гидролиз триглицеридов ХМ и ЛПОНП протекает на поверхности капилляров жировой ткани, сердечной мышцы, легких, селезенки, почек, диафрагмы и, возможно, других тканей при действии на липопротеиновую частицу фермента липопротеинлипазы. Последняя локализована в мембра-

119

не эндотелия. В результате действия липопротеинлипазы на триглицериды хиломикронов образуются β-моноглицеролы и жирные кислоты. Гидролиз триглицеридов, расположенных в ядре мицеллы, сопровождается значительным уменьшением размера частицы, а неэтерифицированный холестерол, фосфолипиды и апопротеины оказываются в избытке. Показано, что апопротеины С и Е переходят на ЛПВП, а продукты гидролиза триглицеридов - β-моноглицеролы и жирные кислоты вместе с неэтерифицированным холестеролом и фосфолипидами поступают в клетки путем латеральной диффузии. В результате действия липопротеинлипазы на ХМ последние превращаются в «ремнантные» (остаточные) частицы, которые задерживаются в печени и распадаются. Подобным образом происходит и превращение ЛПОНП, при этом апопротеины С и Е переходят на ЛПВП, а апопротеины В остаются на ЛПОНП, которые становятся липопротеинами промежуточной плотности (ЛППП). ЛППП подвергаются атаке фермента триглицеридлипазы, секретируемой в кровь гепатоцитами. Этот фермент продолжает расщепление триглицеридного компонента. В конечном счете образуются мицеллы, обедненные триглицеридами, потерявшие большую часть апопротеинов С и Е, но обогащенные холестеролом и апопротеином В, то есть ЛПНП.

В середине 70-х годов прошлого столетия было показано, что различные клетки – гладкомышечные, эндотелиальные, фибробласты и другие – имеют на своей мембране рецепторы для связывания ЛПНП. Такое связывание, осуществляющее транспорт холестерола в клетки, было названо ре- цепторно-опосредованным эндоцитозом [1,7]. Авторы отмечали, что данный процесс предполагает наличие специфических рецепторов, узнающих частицы и стимулирующих физиологический ответ: захват, образование кластеров – «окаймленных везикул», то есть мицелл, окруженных молекулами рецепторов, формирование эндоцитозных пузырьков и деградацию их в лизосомах клетки. Поступивший в клетку в составе мицелл холестерол подавляет активность 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА-редуктазы, катализирующей собственный биосинтез холестерола клеткой; активирует ацил-КоА-холестеролацилтрансферазу (АХАТ), которая этерифицирует внутриклеточный холестерол и подавляет синтез рецепторов. Рецепторы, обеспечивающие специфический захват ЛПНП, получили название В,Е- рецепторов, поскольку они активно связывают липопротеидные частицы с высоким содержанием апопротеинов В и Е. Они обнаруживаются на клетках печени, фибробластах, гладкомышечных клетках, эндотелии сосудов, макрофагах. В мембранах гепатоцитов обнаружены также рецепторы другого типа – избирательно взаимодействующие с апопротеином Е – Е- рецепторы. Регулируемый уровнем холестерола в клетках синтез рецепторов не сопровождается накоплением холестерина в клетках.

Однако в последующем было показано наличие проникновения в клетку ЛПНП путем нерегулируемого эндоцитоза, который приводит к

120