Иммуномодулирующее действие препаратов рнк у животных

Особенности стимуляции гуморального иммунитета под действием препаратов РНК были подтверждены в исследованиях адъювантных и иммуностимулирующих свойств при усилении действия вакцины БЦЖ на модели экспериментального заражения туберкулезом морских свинок и телят. Эти исследования выполнялись совместно с Отделом туберкулеза ИЭВСиДВ, с В.Н.Донченко, Г.П.Протодьяконовой и другими под руководством чл.-корр. РАСХН А.С.Донченко.

На рисунке 4 представлены данные по развитию туберкулезного процесса у 3 групп морских свинок: вакцинированных одной вакциной БЦЖ (верхний рисунок), БЦЖ + полирибонат при однократном применении (средний рисунок) и БЦЖ + ридостин (нижний рисунок). После заражения животных оттитрованной дозой культуры туберкулеза бычьего типа (М. bovis, шт.14 ВНИИБТЖ) наблюдали следующие изменения. Одна вакцина не обеспечивает полноценного иммуного ответа, начиная с 20 по 60 день (см. 1 строку верхнего рисунка) у всех животных развивается туберкулез в тяжелой генерализованной форме. Однократное введение полирибоната с БЦЖ снижает заболеваемость животных тяжелой генерализованной формой до 20% и полностью защищает 20% животных (см. 1 и 4 строку среднего рисунка). У свинок, привитых БЦЖ с ридостином генерализованная форма отсутствует полностью, не заболевает 40% животных (см. 4 строку нижнего рисунка).

Вакцинация БЦЖ экспериментальных животных (морских свинок и кроликов) с однократным введением индуктора интерферона вестин (ридостин) повышает показатели гуморального и клеточного иммунитета, увеличивает иммуногенность вакцины и препятствует заражению животных оттитрованной дозой возбудителя туберкулеза бычьего типа.

Наибольшая степень иммунной защиты от заражения возбудителем туберкулеза отмечена у животных, привитых вакциной БЦЖ в сочетании с дробным введением полирибоната в дозах 15 мг\голову через 14 дней. Как уже было отмечено выше в опытах на морских свинках по оценке гемопоэза под влиянием полирибоната, иммуномодулятор в эти сроки максимально активировал созревание и миграцию стволовых клеток. Можно считать, что это один из основных механизмов действия однонитевых РНК у млекопитающих.

Рис 4. Группа животных, вакцинированных БЦЖ.

Группа животных, вакцинированных БЦЖ + полирибонат.

Группа животных, вакцинированных БЦЖ + ридостин.

1 - тяжелая степень, 2 - средняя степень, 3 - слабая степень, 4 - без изменений

Подобная схема была испытана при вакцинации БЦЖ у телят и оказалась оптимальной. Первый раз полирибонат (поливедрим) вводится одновременно с вакциной в дозах 0,5 мг\кг, второй раз - через 14 дней без вакцины в той же дозе. Это обеспечивало эффективную 100%-ную защиту телят от экспериментального заражения туберкулезом бычьего типа по сравнению с контрольной, не вакцинированной группой и вакцинированной одной вакциной. В тех группах животных, которым вводился полирибонат в сочетании с вакциной БЦЖ, на протяжении всего опыта отмечались высокие показатели неспецифического иммунитета: ОФР (опсоно-фагоцитарной реакции) и РБТЛ (реакции бласттрансформации лейкоцитов), а показатели ГЗТ угасали раньше, чем в группе животных, вакцинированных только БЦЖ. Это связано с тем, что полирибонат подавляет ГЗТ, как показатель клеточного иммунитета, что было отмечено нами ранее в опытах на мышах и подтвердилось в данном случае.

Изучение возможности использования индуктора интерферона при вакцинации поросят вирусной вакциной против классической чумы свиней представляет как теоретический, так и практический интерес. Теоретически считалось маловероятным использование дсРНК в качестве иммуноадьюванта при вакцинации аттенуированной (живой) оттитрованной вирус-вакциной. Ответ на этот вопрос и стал целью экспериментов, выполненных совместно с Лабораторией болезней свиней ИЭВСиДВ (под рук. д.в.н. С.И.Прудникова). Вестин (ридостин) эффективно стимулирует гуморальный иммунный ответ (таблица 4) (В табл. 1 гр. - вакцина+вестин, 2 гр. - одна вакцина, 3 гр. - контроль, интактные животные), а также показатели фагоцитоза нейтрофилов периферической крови поросят (см. столбик ФА\ФИ) при вакцинации их вирус-вакциной против классической чумы свиней. Весьма показательной была активация фагоцитоза нейтрофилов. Если ФА повышалась в 3 раза по сравнению с контрольной группой, то поглотительная способность нейтрофилов возрастала в 28-30 раз. Именно эти механизмы, по-видимому, обеспечивают эффективность вакцинации.

Таким образом, установлено, что иммуностимулирующие эффекты вп- и дсРНК, а также препаратов на их основе, отмеченные у экспериментальных животных, подтверждены на моделях вакцинации БЦЖ против туберкулеза морских свинок, кроликов и телят, с вирус-вакциной против классической чумы свиней.

 Таблица 4 Результаты исследования сыворотки крови поросят в РНГА с эритроцитарным диагностикумом после вакцинации вирус-вакциной против классической чумы свиней и введения иммуномодулятора

Сроки исследования после введения вакцины и иммуномодулятора	Группа поросят	Титры антител, Lg2	Показатели фагоцитарной реакции*, ФА/ФИ
До введения вакцины и иммуномодулятора	1 2 3	1 0 0	13/0,5 14/0,5 15/0,4
После 1-ой вакцинации через 15 дней	1 2 3	5 2 0	30/6,2 18/0,8 17/0,6
через 30 дней	1 2 3	6 3 0	38/7,0 24/2,4 19/1,2
через 50 дней	1 2 3	6 2 0	38/7,5 26/3,0 20/1,5
После 2-ой вакцинации через 15 дней	1 2 3	7 4 0	44/14,0 32/ 4,5 20/ 2,0
через 30 дней	1 2 3	8 6 0	48/15,0 34/ 5,8 23/ 3,0
через 120 дней	1 2 3	7 5 0	41/13,8 36/ 6,1 26/ 3,1

* Примечание: в числителе - фагоцитарная активность нейтрофилов; в знаменателе - поглотительная способность нейтрофилов.

 1 гр. - вакцина + ридостин; 2 гр. - вакцина; 3 гр. - интактный контроль.