Использование натрий карбоксиметилцеллюлозы для формирования матрикса при тестировании чувствительности опухолевых клеток к химиопрепаратам

Важной особенностей солидных опухолей является биологическая неоднородность или гетерогенность. Клиническое течение опухолевого заболевания различно даже в пределах однородной группы пациентов. Молекулярно-генетическая характеристика опухоли становится необходимым компонентом при выборе оптимальной терапии наравне с морфологической верификацией и основными методами обследования. Очевидна целесообразность перехода к персонализированной медицине, подразумевающей назначение конкретного лекарственного препарата конкретному больному. Именно определение чувствительности опухолевых клеток к химиопрепаратам является перспективным методом, позволяющим уменьшить токсичность химиотерапевтического лечения. Поэтому нами предлагается модифицировать способ определения индивидуальной чувствительности конкретного новообразования (в данном случае, плоскоклеточного рака шейки матки) к противоопухолевым препаратам в культуре клеток по аналогии с применяемым в клинике методом определения чувствительности инфекции к антибиотикам. В настоящее время показано, что трёхмерный матрикс формирует наиболее адекватные условия для опухолевых клеток, чем достигается наибольшая корреляция с результатами, получаемыми в клинике. Однако, формирование трехмерного матрикса из коллагеновых волокон требует разной смены pH в присутствие исследуемых клеток, что сопровождается их значительной гибелью. Цель нашего исследования - изучить возможность применения натрий карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ) для формирования трёхмерного матрикса, необходимого для тестирования чувствительности опухолевых клеток к химиопрепаратам. Основные этапы заключаются в ферментативном измельчении оперативно удаленных опухолей и инкубации их в культуральной среде с химиопрепаратами. Химиопрепараты используются 4 комбинаций: цисплатин (в чистом виде), цисплатин +блеомицин, цисплатин+фторурацил, цисплатин+гемзар. Затем плашки помещают в СО₂-инкубатор. Экспозиция с цитостатиками продолжается сутки, затем производится оценка количества погибших клеток для определения чувствительности. Таким образом, можно заключить,что КМЦ позволяет создать трёхмерный матрикс, формирующий адекватные условия для тестирования чувствительности опухолевых клеток к химиопрепаратам.

Газизянова В.М.

«Казанский государственный медицинский университет»

Сердечная недостаточность и анемия: клинические параллели

Актуальность. Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) является приоритетной проблемой современной кардиологии в связи с её большой распространённостью, частыми госпитализациями и высоким уровнем смертности (Арутюнов Г.П. и др., 2012; Шляхто Е.В. и др., 2013). Как известно, по мере прогрессирования сердечной недостаточности периферические органы и ткани получают всё меньше кислорода, что приводит к запуску компенсаторных механизмов. Однако ценой компенсации недостатка кислорода у некоторых больных является анемия. Распространенность анемии у пациентов с ХСН составляет от 10 до 50% и более, что зависит от изучаемой популяции, тяжести сердечной недостаточности (СН) и используемых критериев оценки степени анемии. Особенно часто (до 80%) она развивается у больных с IV функциональным классом (ФК) по NYHA, рефрактерных к медикаментозной терапии, тогда как при высокой толерантности к физической нагрузке (I-II ФК по NYHA) ее частота может не достигать l0%. Актуальность данной проблемы обусловлена независимым влиянием анемии на прогноз у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ), которое было продемонстрировано в достаточно большом числе исследований.

Цель исследования. Оценка влияния уровня гемоглобина на течение и прогноз больных с хронической сердечной недостаточностью с коморбидной патологией.

Задачи исследования:

1. Сформировать группу исследования больных с ХСН и СД и/или хронической болезнью почек (ХБП) по критериям включения/исключения и группу сравнения с ХСН без коморбидной патологии.

2. Провести клиническое обследование больных с выявлением факторов риска, коморбидной патологии − сахарного диабета (СД) и нарушения функции почек со снижением скорости клубочковой фильтрации (СКФ), оценкой результатов теста толерантности к физической нагрузке и шкалы клинического состояния (ШОКС), а также с анализом предшествующей медикаментозной терапии.

3. Определить уровень гемоглобина у всех пациентов с ХСН.

4. Оценить влияние уровня гемоглобина на прогноз у больных с коморбидной патологией и при её отсутствии.

Объект. На базе терапевтического отделения клинической больницы №7» г.Казани было обследовано 122 пациента с ХСН в возрасте от 35 до 88 лет, в среднем 63,5±9,8г. Продолжительность ХСН составила в среднем 9-10 лет. Диагноз устанавливался в соответствии с «Национальными рекомендациями по диагностике и лечению ХСН», сформулированными Российским обществом кардиологов и обществом специалистов по сердечной недостаточности 4-го пересмотра (2013). Собрана информация о кардиоваскулярных событиях в течение 1-го года после включения в исследование. Конечными точками наблюдения считали сердечно-сосудистую смертность, несмертельные инфаркт миокарда и мозговой инсульт (МИ), тромбоэмболические осложнения (ТЭО).

Методы исследования. 1. Количественная оценка симптомов ХСН по шкале оценки клинического состояния (ШОКС). 2. Тест с физической нагрузкой (6-минутный тест ходьбы). 3. Уровень гемоглобина определялся колориметрическим методом (норма лаборатории 120-160 г/л). 4. Скорость клубочковой фильтрации определялась по формуле Кокрофта-Гаулта (сниженная СКФ оценивалась как <90 мл/час). 5. Статистическая обработка проводилась с использованием стандартного пакета программ Statistica 6.

Результаты. Средняя величина уровня гемоглобина у больных с ХСН независимо от коморбидности составила 128,5±20,4 г/л. По нормативам лаборатории данный уровень соответствует норме. В ходе исследования пациенты были распределены на две группы: 1. Пациенты с ХСН без СД и снижения СКФ. 2. Пациенты с наличием ХСН и СД и/или сниженной СКФ (группа с коморбидной патологией). Каждая из групп в свою очередь делилась на подгруппы: 1. Пациенты с ХСН ФК Ι-ΙΙ. 2. Пациенты с ХСН ФК ΙΙΙ-ΙV. Было показано, что у пациентов с сопутствующей патологией уровень гемоглобина ниже, чем в группе без СД и снижения СКФ (107±20,6 г/л и 140±19,5 г/л соответственно, р<0,05). В последующем был проведён анализ распределения больных в зависимости от ФК − группа с ХСН І-ІІ и ІІІ-IV ФК. В группе с коморбидной патологией получены следующие результаты: более высокие значения гемоглобина отмечались у пациентов с ХСН І-ІІ ФК – 117,3±19,8 г/л по сравнению с пациентами с ХСН ФК ІІІ-IV – 107,8±13,4 г/л. В группе пациентов без сопутствующей патологии было продемонстрировано, что при ХСН І-ІІ ФК средний уровень гемоглобина выше, чем при ІІІ-IV ФК течении (160,5±13,6 г/л и 120,9±15,7 г/л соответственно).

Прогноз оценивался по конечным точкам через год после включения в исследование. Кардиоваскулярная смертность среди всех больных с ХСН составила 9,8% (12 пациентов). В структуре смертности преобладал ИМ - 83,4% (10 человек), в меньшей степени встречались МИ - 8,3%(1 человек) и ТЭО - 8,3%(1 человек). В группе больных с коморбидной патологией сердечно-сосудистая смертность составила 11,2 % (7 пациентов). В структуре смертности преобладал ИМ (71,4 %), в меньшей степени встречался МИ (14,3%) и ТЭО (14,3%). В группе больных без коморбидности сердечно-сосудистая смертность была почти в 2 раза меньше (7,1%) – 5 человек. Все пациенты данной группы умерли от инфаркта миокарда, такие состояния как МИ и ТЭО не наблюдались. При оценке сердечно-сосудистых событий (ССС) в группе с коморбидной патологией в подгруппе с пониженным гемоглобином было показано, что только в данной группе встречались пациенты, умершие от ТЭО и МИ (33,3% и 33,3% соответственно). Оставшаяся часть в структуре смертности принадлежала ИМ (33,3%). Тогда как в подгруппе с более высокими показателями гемоглобина встречался только ИМ (100%), МИ и ТЭО не отмечались (рисунок 4). При распределении группы без коморбидной патологии по уровню гемоглобина и анализе в данной группе прогноза различий не наблюдалось. В обеих подгруппах (с пониженным и нормальным уровнем гемоглобина) в 100% случаев причиной смерти был ИМ. Также была проанализирована взаимосвязь прогноза с ФК ХСН в обеих группах (с сопутствующей патологией и при отсутствии). У пациентов с коморбидной патологией и ХСН (ФК Ι-ΙΙ) частота возникновения ССС следующая: сердечно-сосудистая смертность – 14%, в том числе смертность от ИМ - 100%, смертности от ТЭО и МИ не отмечалось. У пациентов с коморбидной патологией и ХСН (ФК ΙΙΙ-ΙV) частота наступления ССС несколько отличалась. Сердечно-сосудистая смертность - 16%, в том числе смертность от ИМ – 71,6%, от ТЭО – 14,2%, МИ – 14,2%. Далее была проанализирована структура смертности пациентов без коморбидной патологии (в группе было 60 человек, умерли 5 человек). Респонденты по длительности ХСН были поделены на 2 группы: 1. Пациенты с ХСН ФК Ι-ΙΙ. 2. Пациенты с ХСН ФК ІІІ-IV. В первой группе общая сердечно-сосудистая смертность была меньше (9,3%), в том числе в структуре смертности в 100% случаев был ИМ. Во второй группе результаты значительно не отличались от показателей первой группы (сердечно-сосудистая смертность −12,1%, в том числе ИМ – 100%). Анализ отдаленного прогноза среди всех больных ХСН выявил у половины больных наступление нефатальных ССС, структура которых следующая: ИМ – 11,3%, МИ – 3,2%, госпитализация по поводу декомпенсации ХСН – 85,5%, 23% дважды, 8% – 3 и более раз. Число госпитализаций возрастало по мере увеличения ФК ХСН: II – 32,8%, III – 75,25%, IV – 96,6%. Пациенты с пониженным гемоглобином госпитализировались в 3 раза чаще, чем с нормальным уровнем гемоглобина в обеих группах (с коморбидной патологией и без неё). В группе пациентов с сопутствующей патологией и ХСН ФК Ι-ΙΙ при сниженном гемоглобине ИМ и МИ встречались в 1,5 раза чаще чем при нормальном его уровне. У пациентов с сопутствующей патологией и ФК ІІІ-IV при сниженном гемоглобине в ИМ и МИ 3 раза чаще чем при нормальном уровне гемоглобина. У респондентов без сопутствующей патологии и ХСН ФК Ι-ΙΙ ИМ и МИ не встречались. В группе без сопутствующей патологии и ФК ІІІ-IV при сниженном гемоглобине ИМ и МИ наблюдались в 1,3 раза чаще по сравнению с пациентами с нормальным его уровнем.

Выводы.

1. Средняя величина уровня гемоглобина у больных ХСН соответствует норме (128,5±20,4 г/л).

2. У больных с ХСН без коморбидной патологии уровень гемоглобина выше (140±19,5 г/л, p<0,05), чем у больных с коморбидной патологией (107±20,6 г/л, р<0,05).

3. У пациентов с ХСН ФК Ι-ΙΙ уровень гемоглобина ниже в группе с коморбидной патологией - 117,3±19,8 г/л, чем при её отсутствии - 160,5±13,6 г/л.

4. У пациентов с ХСН ФК ІІІ-IV гемоглобин ниже в группе с коморбидной патологией по сравнению с группой с её отсутствием (107,8±13,4 г/л и 120,9±15,7 г/л, р<0,05).

5. У пациентов с ХСН и коморбидной патологией сердечно-сосудистая смертность выше в отличие от пациентов с её отсутствием (11,2% и 7,1% соответственно).

6. Только в группе с коморбидной патологией с ХСН ФК ІІІ-IV и сниженным гемоглобином в структуре смертности встречаются ТЭО и МИ, тогда как в другой группе их нет.

7. У пациентов с коморбидной патологией и ХСН ФК Ι-ΙΙ уровень кардиоваскулярной смертности выше (14%) чем в группе без сопутствующей патологии и ХСН ФК Ι-ΙΙ (9,3%).

8. У пациентов с коморбидной патологией и ХСН ФК ΙΙΙ-ΙV уровень кардиоваскулярной смертности выше (16%) чем в группе без сопутствующей патологии и ХСН ФК ΙΙΙ-ΙV (12,1%).

9. У пациентов с пониженным уровнем гемоглобина чаще отмечалась госпитализация по поводу декомпенсации ХСН (в 3 раза чаще).

10. В группе пациентов с сопутствующей патологией и ХСН ФК Ι-ΙΙ при сниженном гемоглобине ИМ и МИ встречались в 1,5 раза чаще чем при нормальном его уровне.

11. У пациентов с сопутствующей патологией и ФК ІІІ-IV при сниженном гемоглобине в ИМ и МИ 3 раза чаще чем при нормальном уровне гемоглобина.

12. В группе без сопутствующей патологии и ФК ІІІ-IV при сниженном гемоглобине ИМ и МИ наблюдались в 1,3 раза чаще по сравнению с пациентами с нормальным его уровнем.

Галявиева А.Р.

«Казанский государственный медицинский университет»