- •Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений
- •Введение
- •Оборудование микробиологической лаборатории.
- •Правила работы в микробиологической лаборатории.
- •Тема 1. Микроскопический метод исследования микроорганизмов
- •Световая микроскопия.
- •Фазово-контрастное устройство
- •Темнопольный конденсор.
- •Люминесцентная микроскопия.
- •Электронная микроскопия.
- •Тема 2. Морфология микроорганизмов
- •2.1. Форма бактерий
- •Определение подвижности микроорганизмов.
- •Приготовление красителей и окраска мазков-препаратов. Методы пересева микроорганизмов.
- •Приготовление микроскопических препаратов.
- •Тема 3. Морфология грибов
- •Тема 4. Методы стерилизации
- •Стерилизация паром под давлением
- •Тема 5. Культивирование микроорганизмов
- •Тема 6. Методы выделения чистой культуры. Определение биохимических свойств микробов
- •Тема 7. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Бактериофаги
- •Тема 8. Определение биологических свойств микроорганизмов
- •Упаковка и пересылка патологического материала.
- •Принципиальная схема микробиологического исследования.
- •Определение патогенности.
- •Тема 9. Методы изучения генетики бактерий
- •Индукции мутаций под действием ультрафиолетового излучения
- •Постановка опыта трансформации.
- •Постановка опыта специфической трансдукции.
- •Определение Col-плазмид (колицикогенных факторов).
- •Метод генных зондов.
- •Тема 10. Микробиологические методы исследования объектов окружающей среды
- •Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов.
- •Санитарно-бактернологическое исследование мяса, колбасных изделий к мясных продуктов.
- •Тема 11. Изучение неспецифической резистентности организма и серологические методы диагностики инфекционных болезней
- •Количественное определение лизоцима в сыворотке крови.
- •Количественное определение комплемента в сыворотке крови.
- •Демонстрация фагоцитоза бактерии.
- •Методы оценки иммунного статуса макроорганизма.
- •Серологические методы исследования.
- •Реакция агглютинации (ра).
- •Реакция преципитации (рп).
- •Реакция связывания комплемента (рск).
- •Иммуноферментный метод.
- •Тема 12. Биологические препараты и их контроль
- •Тема 13. Стафилококки и стрептококки
- •Тема 14.Энтеробактерии
- •Тема 15. Бруцеллы и возбудитель туляремии
- •Тема 16. Пастереллы
- •Тема 17. Иерсинии
- •Тема 18. Возбудители рожи и листериоза
- •Тема 19. Псевдомонады
- •Тема 20. Возбудитель сибирской язвы
- •Тема 21. Патогенные анаэробы
- •Возбудитель дизентерии ягнят
- •Возбудитель брадзота овец
- •Возбудитель энтеротоксемии овец
- •Возбудитель эмфизематозного карбункула (эмкар)
- •Тема 22. Патогенные микобактерии Возбудитель туберкулеза.
- •Тема 23. Возбудитель актиномикоза
- •Тема 24. Патогенные спириллы
- •Тема 25. Микоплазмы
- •Тема 26. Риккетсии
- •Тема 27. Хламидии
- •Тема 28. Патогенные грибы
- •Приложение методические указания к проведению практических занятий для преподавателей
- •Частные методики.
- •Тема 3. Цель занятия: ознакомить студентов с особенностями морфологии и методами исследования микроскопических грибов различных таксономических групп.
- •Тема 4. Цель занятия: ознакомить студентов с назначением и основными методами стерилизации, применяемыми в микробиологии.
- •Тема 6. Цель занятия: ознакомить студентов с методами изучения ферментативной активности и принципами идентификации микроорганизмов.
- •Тема 7. Цель занятия, ознакомить студентов с методами определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, а также с действием бактериофагов и их практическим использованием.
- •Тема 8. Цель занятия: ознакомить студентов с основными методами и показателями санитарно-микробиологической оценки состояния объектов окружающей среды.
- •Тема 9. Цель занятия: ознакомить студентов с фенотипической и генотипической изменчивостью, генетическими методами идентификации микроорганизмов.
- •Тема 12. Цель занятия: ознакомить студентов с вакцинами различных типов, лечебно-профилактическими и диагностическими иммунными сыворотками, антигенами, аллергенами и принципами их контроля.
- •Тема 13. Цель занятия: ознакомить студентов с этапами лабораторной диагностики, основными свойствами возбудителей стафи-лококкозов, стрептококкозов и биопрепаратами.
- •Тема 14. Цель занятия: ознакомить студентов с методами лабораторной диагностики и биологическими свойствами возбудителей эшерихиозов и сальмонелл; биопрепаратами.
- •Тема 15. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей и лабораторной диагностикой бруцеллеза и туляремии, а также биопрепаратами.
- •Тема 17. Цель занятия: изучить свойства возбудителей и схемы лабораторной диагностики зооантропонозной чумы и псевдотуберкулеза.
- •Тема 18. Цель занятия: ознакомить студентов с этапами лабораторной диагностики и свойствами возбудителей рожи свиней, ли-стериоза, биопрепаратами.
- •Тема 19. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей и лабораторной диагностикой сапа, мелиоидоза, псевдомоноза норок и биопрепаратами.
- •Тема 20. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителя, схемой лабораторной диагностики сибирской язвы, биопрепаратами.
- •Тема 21. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей анаэробиозов, схемами лабораторного исследования, биопрепаратами.
- •Тема 22. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики туберкулеза и паратуберкулеза, биопрепаратами.
- •Тема 23. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителя актиномикоза.
- •Тема 24. Цель занятия: ознакомить студентов с методами лабораторной диагностики лептоспироза, кампилобактериоза и дизентерии свиней, биологическими свойствами возбудителей, биопрепаратами.
- •Тема 25. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики микоплазмозов.
- •Тема 27. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики хламидиозов, биопрепаратами,
Тема 6. Цель занятия: ознакомить студентов с методами изучения ферментативной активности и принципами идентификации микроорганизмов.
Оборудование и материалы: засеянные среды Гисса (глюкоза, лактоза, сахароза и т. д.) с признаками кислото- и газообразования, культуры Е. colt на МПБ в пробирках, реактив Эрлиха, культуры D. subtilis на молоке, МПЖ, культуры S. aureus на МПА в пробирках, 3%-й раствор пероксида водорода и другие тесты; результаты определения ферментативной активности культур Е. coli и S. typhimurium на ПБДЗ-пластинах, карточки с описанием свойств отдельных видов бактерий для работы с определителями.
Тема 7. Цель занятия, ознакомить студентов с методами определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, а также с действием бактериофагов и их практическим использованием.
Оборудование и материалы: стерильные чашки Петри с МПА, пробирки с чистой культурой стафилококка и кишечной палочки, стерильные градуированные «концевые» пипетки на 2 мл, резиновые груши, набор стандартных дисков с разными антибиотиками, стерильные пинцеты, линейки; культура вакцинного штамма L. monocytogenes, набор листериозных бактериофагов; стерильный МПБ, содержащий 0,5 % глюкозы; 2%-й МПА в чашках Петри, стерильные пипетки Пастера, лечебно-профилактический бактериофаг против паратифа и колибактериоза телят; чувствительная к фагу культура Е. coli.
Тема 8. Цель занятия: ознакомить студентов с основными методами и показателями санитарно-микробиологической оценки состояния объектов окружающей среды.
Оборудование и материалы: прибор для подсчета колоний; колбы с пробами воды, почвы, молока, пробы мяса и мясных изделий; бактериологические пробирки с 9 мл воды, пробирки с 10 мл расплавленного агара, мерные стерильные пипетки (2 мл), стерильные чашки Петри, чашки Петри с МПА, чашки Петри с кровяным МПА, навески почвы, стерильная водопроводная вода в колбе (200 мл), пробирки со средами Кесслера, Вильсона — Блера.
Тема 9. Цель занятия: ознакомить студентов с фенотипической и генотипической изменчивостью, генетическими методами идентификации микроорганизмов.
Оборудование и материалы', культура Proteus vulgaris; пробирки с 2%-м МПА; 1%-й раствор фенола; пробирки с 10 мл и с 1мл МПБ; чашки Петри с 3%-м МПА, содержащим 100 ЕД стрептомицина в 2 мл среды; чашки Петри с обычным МПА; стерильные мерные пипетки (1 мл); диссоциирующая культура Е. coli или P. miitocida на МПА в чашках Петри в виде изолированных колоний; бинокулярная лупа МБС-1; культура Е. coli, продуцирующая колицин, и колицинчувствительная культура Е. coli; чашки Петри с 1,5%-м МПА; хлороформ, пробирки с 0,7%-м МПА; штаммы Е. coli K12F", leir, E. coli К12 Hfr, leu+, str, E. coli lac; трансдуциру-ющий фаг 1 dgal, содержащий р-галактозидазный оперон Е. coli; набор компонентов для ПЦР-диагностики какой-либо инфекционной болезни, амплификатор.
Тема 10. Цель занятия: ознакомить студентов с методами оценки иммунного статуса организма, реакциями агглютинации (РА), гемагглютинации (РГА) и реакцией Кумбса, с техникой их постановки и учета результатов; с сущностью и техникой постановки реакций кольцепреципитации, диффузионной преципитации (РДТ), методом иммуноэлектрофореза; рассмотреть их практическое использование; ознакомить студентов с принципом метода флуоресцирующих антител и техникой постановки реакции имму-нофлуоресценции, с принципом и техникой проведения иммуно-ферментного анализа, с реакцией нейтрализации (РН); освоить технику постановки РН для обнаружения и идентификации бактериальных токсинов; ознакомить с методами тестирования факторов неспецифической резистентности и методами оценки иммунного статуса животного организма; дать общее представление о сущности иммуноферментного метода; ознакомиться с компонентами и оборудованием для проведения этого метода; освоить технику постановки иммуноферментного метода.
Оборудование и материалы, культуры Е. coli различной серогруп-повой принадлежности на МПА, О-агглютинирующие диагностические эшерохиозные сыворотки, бруцеллезный розбенгал антиген, положительная бруцеллезная сыворотка, планшеты с результатами титрования иммунной сыворотки в РИГА, единый бруцеллезный антиген, мерные пипетки; инактивированные культуры бруцелл и сальмонелл, 96%-й этанол; ФСФБ (рН 7,7...8,4), «влажная камера» (чашки Петри, эксикатор), люминесцирующие сыворотки против бруцелл, сальмонелл, иммуноглобулинов кролика, позитивная бруцеллезная сыворотка, готовый препарат для демонстрации результатов ИФА, люминесцентный микроскоп; сибиреязвенная преци-питирующая сыворотка, стандартный сибиреязвенный антиген, стерильный физиологический раствор, пипетки Пастера, пробирки Уленгута, 1,5%-й агаровый гель с мертиолатом (конечное разведение 1: 10 000), стериальные чашки Петри, камера для иммуноэлек-трофореза, готовые иммунофореграммы, штаммы для РДП; бульонные токсинсодержащие культуры С. perfringens, центрифуга, центрифужные пробирки, стерильные бактериологические пробирки, стерильный физиологический раствор, воронки, ватно-марлевые фильтры, стерилизатор со шприцами и инъекционными иглами, диагностические антитоксические сыворотки С.perfringens, белые мыши массой 16... 18 г; культура Е.соНна МПА, стерильный МПБ, стерилизатор, шприцы и иглы, спирто-водный раствор метилено-вой сини, нормальная и иммунная (противоэшерихиозная) кроличьи сыворотки, стерильные пастеровские пипетки, 1%-й агар Диф-ко, ацетоновый порошок М. lysodeicticus (или культура), стерильные чашки Петри, кристаллический лизоцим, фосфатно-солевой буферный раствор (рН 7,2...7,4), эритроциты барана, стерильный физиологический раствор, веронал-мединаловый буферный раствор (рН 7,3...7,4), гемолизин, комплемент морской свинки, дистиллированная вода, фотоэлектроколориметр, пластины с результатами радиальной иммунодиффузии по определению иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови, калибровочная кривая для определения содержания иммуноглобулинов разных классов; имму; нологический планшет, специфические сыворотки или иммуноглобулины, термостат, фосфатный буфер (рН 7,2...7,4) с твин-20, специфический антиген (для контроля — неспецифический антиген), шприц-дозатор, пероксидазный антивидовой конъюгат (антивидовая меченая сыворотка), субстратная смесь (индикатор ортофецил-диамин с 3%-м раствором пероксида водорода); препараты для подсчета Е-РОК и ЕАС-РОК.
Тема 11. Цель занятия: ознакомить студентов с общими правилами отбора, консервирования, транспортировки и хранения материалов для микробиологического исследования, а также этапами микробиологического исследования; освоить технику заражения лабораторных животных, цели и правила бактериологического исследования, методы определения вирулентности микроорганизмов и тестирования факторов патогенности бактерий.
Оборудование и материалы: кролик; иглы для взятия крови, центрифужные пробирки, центрифуги, 96%-й этанол, ватные тампоны, глицерин, физиологический раствор, лед, поваренная соль, термос, термометр; труп животного (кролик, морская свинка), кюветы с парафином или доски для вскрытия животных, пинцеты, ножницы, склянки для патологического материала; схемы бактериологического исследования при диагностике болезней бактериальной этиологии (бруцеллез, стафилококкоз и др.); кровяной МПА в чашках Петри; стерильная плазма кролика (человека); культуры Е. coli, трупы мышей, зараженных Е. coli; белые мыши, морские свинки, кролики, стерильные шприцы, иглы, физиологический раствор.
