Ход исследования для выявления возбудителя газовой гангрены.

1 День исследования

1. Взятие материала от больного:

экссудат;

отделяемое гнойных ран;

кусочки некротизированных тканей

2. Приготовление мазков из исследуемого материала

окраска по Граму;

выявление капсул методом Йоне

3. Посев на:

стерильное лакмусовое молоко;

среду Вильсон-Блера;

среду Врублевского

среду Китта-Тароцци

желточная среда;

5% кровяной МПА

культивирование в анаэростате.

4 Постановка реакции нейтрализации с экзотоксином:

Для постановки реакции берут ряд пробирок, в каждую вносят по 0,9 мл выращенной культуры и 0,6 мл известных поливалентных или моновалентных антитоксических сывороток (C.perfringens; C.novyi A и B; C. septicum; C.bifermentans). Смесь в количестве 0,5 мл вводят внутрибрюшинно лабораторным животным (белым мышам).

2-3 день исследование

1. Учет и описание результатов роста микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах:

2. Приготовление мазков из колоний, окраска по Граму

3. Посев чистой культуры на среду Врублевського

4-5 день исследование

1. Изучение роста микроорганизмов на среде Врублевського

2. Окраска по методу Грама.

3. Учет реакции нейтрализации:

В случае нейтрализации токсина антитоксином животное выживает (позитивный результат); в случае несоответствия сыворотки и типа токсина - погибает.

Демонстрационные препараты для специфической профилактики, диагностики и терапии клостридиозов :

• АКДС;

• Столбнячный анатоксин;

• Противостолбнячная сыворотка;

• Противоботулинические сыворотки;

• Противогангренозные сыворотки.

Работа №1. Ознакомиться с морфологическими и тинкториальными свойствами клостридий (демонстрация; сделать рисунок).

Clostridium tetani Clostridium botulinum Clostridium perfringens

Окраска по Граму.

Сделать вывод.

Работа №2. Изучить ускоренную диагностику анаэробной раневой инфекции.

М атериал для исследования :

посев на

с реду Врублевского стерильное лакмусовое молоко среду Вильсон-Блера

Сделать вывод.

6. Вопросы для самоконтроля.

• История открытия возбудителей анаэробных инфекций.

• Классификация анаэробов.

• Морфологические и биологические свойства возбудителей столбняка, ботулизма, анаэробной инфекции ран.

• Патогенетические и иммунобиологические особенности столбняку, ботулизма и анаэробной раневой инфекции.

• Факторы патогенности возбудителей столбняку, ботулизма и анаэробной раневой инфекции.

• Методы микробиологической диагностики анаэробной инфекции.

• Препараты для профилактики и лечения столбняку, ботулизма, анаэробной инфекции ран.

Рекомендованная литература. Основная:

1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология; М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2005, 734 с.

2. Воробьев А. А., Кривошеин Ю. С., Широбоков В. П. Медицинская и санитарная микробиология: учебное пособие.— М., 2008.-462 с.

3. Широбоков В. П., Янковский Д. С., Дымент Г. С. Микробная экология человека с цветным атласом : учеб. пособие для студ. высш. мед. учеб. заведений IV уровня аккредитации и врачей-интернов / В. П. Широбоков, - К. : Червона рута-Турс, 2010. – 336 с.