Определение группы крови цоликлонами

Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательству.

Оснащение:

• пробирка с исследуемой кровью;

• цоликлоны анти-А и анти-В

• пипетки (для цоликлонов, изотонического раствора и крови) – 4 шт.;

• флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой;

• песочные часы на 2-3 минуты;

• перчатки;

• планшет;

• стеклянные палочки – 2 шт.;

• стеклограф.

№ п/п	Последовательность действий	Обоснование
Подготовка к процедуре
	Промаркировать планшет (написать на нём номер пробирки с кровью, цоликлон анти-А и анти-В).	Обеспечение эффективности проведения процедуры.
	Надеть перчатки.	Обеспечение инфекционной безопасности.
	Проверить качество цоликлонов (прозрачность, срок годности).	Обеспечение достоверности результата проведения процедуры.
Проведение процедуры
	Отдельными пипетками нанести на планшет по капле цоликлонов под соответствующими обозначениями.	Обеспечение эффективности проведения процедуры.
	Пригласить врача.	Контроль правильности проведения процедуры.
	Нанести на планшет каплю крови пациента.	Обеспечение эффективности проведения процедуры.
	Смешать кровь пациента с цоликлонами (в разведении 1:10) разными стеклянными палочками. Перевернуть песочные часы. Наблюдать 2,5-3 минуты. Температура в комнате 15-25°С.	Обеспечение достоверности результата проведения процедуры.
	Для исключения неспецифической агглютинации добавить по 1-2 капли изотонического раствора натрия хлорида в каждую каплю.	Обеспечение достоверности результата проведения процедуры.
	Оценка результатов (оценивает врач) (см. таблицу).	Обеспечение достоверности результата проведения процедуры.
Окончание процедуры
	Снять перчатки, погрузить в ёмкость для дезинфекции, вымыть и высушить руки.	Обеспечение инфекционной безопасности.

Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлоном		Исследуемая кровь (группа крови)
Анти-А	Анти-В
		0 (I)
		А (II)
		В (III)
		АВ (IV)

Ошибки при определении групп крови

Ошибки технического характера:

1. не маркированы тарелки;

2. использована одна палочка при смешивании сывороток разных групп и крови;

3. нарушено соотношение между стандартными сыворотками и исследуемой кровью (эритроцитов должно быть в 5-10 раз меньше, чем сыворотки);

4. оценка результатов проводится до истечения 5 мин.;

5. не соблюден температурный режим (температура должна быть не выше 25ºС);

6. если не добавляется 0,9% раствор хлорида натрия, за агглютинацию принимают монетные столбики.

Ошибки биологического характера, т. е. неспецифическая агглютинация:

1. способность эритроцитов давать агглютинацию со всеми стандартными сыворотками;

2. эритроциты агглютинируются с собственной сывороткой – для исключения ошибки необходимо тарелку поставить в термостат при t +37°С на 5-6 мин. Может быть у людей с заболеваниями крови, печени, почек, хроническими воспалительными процессами;

3. полная панагглютинация – испытуемые эритроциты и сыворотка обладают панагглютинирующими свойствами, физиологический раствор, помещение тарелки в термостат, отмывание эритроцитов трижды физиологическим раствором неэффективно. В этом случае необходимо исследовать агглютиногены А и В в слюне больного;

4. феномен Томпсона – инфицированная кровь дает неспецифическую агглютинацию;

5. у новорожденных агглютиногены А и В еще не достаточно активны и поэтому исследование должно проводится сыворотками с высоким титром антител;

6. наличие слабых агглютиногенов А2, А3.

Ошибки, связанные с сыворотками:

1. использование сывороток с титром ниже 1:32;

2. у сывороток истек срок годности;

3. использование инфицированных сывороток.