Тема 5. Культивировше аэробов и анаэробов

Контрольные вопросы

1. Представители аэробов и методы их культивирования.

2. Представители анаэробов и методы их культивирования.

3. Питательные среды для аэробов и анаэробов.

Оборудование и материалы (на I рабочее место)

Две пробирки с МПЖ или МПА, средой Эшби, препаровальная игла, спиртовка, культуры бактерий аэробов и анаэробов в питательных средах.

Методические указания

Микроорганизмы существуют в присутствии кислорода и при его отсутствии. Первые называются аэробами, вторые - ана­эробами (“ан” - отрицание, “аэр” - воздух, ”биос” - жизнь). Аэробные бактерии, их в природе большинство, нуждаются в кислороде для окисления минеральных и органических веществ в процессе дыхания.

Анаэробные бактерии, строгие анаэробы, существуют при отсутствии атмосферного кислорода. Аэробы и анаэробы мож­но культивировать искусственно в лаборатории. Посев их делают в столбики желатина или агара (МПЖ, среда Эшби) уко­лом. Для этого пробирку держат вверх дном, вынимают пробку и стерильной иглой с захваченным для посева материалом осто­рожно делают прокол среды по прямой линии.

Степень равномерности роста по уколу свидетельствует об отношении микроба к кислороду воздуха. Так, аэробы растут в виде гвоздя, анаэробы располагаются в нижней части укола.

Ход работы

1. Сделать посев аэробов уколом в столбик МПА из питательной культуры Bac. subtilis, Bac. mesenterieus или Azotobacter (последнюю сеют в среду Эшби).

2. Сделать посев анаэробов в столбик МПА из накопительной среды масляно-кислых бактерий. Поставить пробирки в термостат при температуре 37⁰С до появления видного роста, посев Azotobacter – при температуре 28-30⁰С.

3. Сделать мазки препарата из исходного материала, окрасить по Граму, микроскопировать, зарисовать.

4. Через сутки изучить состояние посева анаэробов и аэробов.

5. Сделать рисунок характера роста анаэробов и аэробов в тетради, сделать мазки-препараты, окрасить их по Граму и зарисовать.

Тема 6. Влияние ультрафиолетовых лучей на микроорганизмы

Контрольные вопросы

1. Особенности воздействия света с различной длиной волн на микроорганизмы.

2. Использование света в борьбе с вредными микроорганизмами.

Оборудование

1. Чашки Петри с питательной средой (МПА, среда Эндо).

2. Культуры микроорганизмов.

3. Лампа ультрафиолетовых лучей.

4. Стерильные буквы из черной бумаги.

5. Шпатели, пробирки, вода.

Методические указания

Свет обладает неодинаковым действием на микроорганизмы. Наиболее чувствительны к действию солнечных лучей болезнетворные микроорганизмы. Сапрофиты обладают относительной устойчивостью к свету. Пурпурные и фотобактерии хорошо развиваются при освещении. Большое гигиеническое значение имеет применение ультрафиолетового облучения, прямых солнечных лучей.

Убедиться в губительном действии ультрафиолетовых лучей удается в простом опыте, где часть засеянной микробами среды подвергают облучению. Через несколько дней выращивания культуры отмечают наличие и отсутствие роста культуры в зависимости от действия света.

Ход работы

1. В стерильной пробирке с 0,5 мл дистиллированной воды готовят суспензию культуры.

2. Каплю приготовленной суспензии наносят на поверхность среды и растирают стерильным шпателем.

3. на засеянную поверхность наносят стерильные бумажные буквы и сверху облучают лампой ультрафиолетовых лучей в течении 5 – 10 мин.

4. Буквы убирают, чашки ставят в термостат.

Учет результата опыта проводят на следующем занятии. Данные заносят в таблицу.