1. Бактериологический – выделение коагулоположительной культуры s.Aureus с последующим обнаружением энтеротоксина и др. Факторов патогенности.

Clostridium botulinum - возбудитель ботулизма.

Таксономия:

Семейство: Bacillaceae;

Род: Clostridium;

Вид: C. botulinum

Ботулизм – это тяжелая форма пищевой токсикоинфекции, связанная с употреблением продуктов, зараженных Clostridium botulinum, и хар-ся специфическим поражением ЦНС.

Морфологические, тинкториальные и культуральиые свойства клостридий ботулизма. Резистентность вегетативной формы и спор.

C. botulinum довольно крупные полиморфные палочки с закругленными концами, длинной 4-9 мкм, диаметром 0,5-1,5 мкм, иногда образуют укороченные формы; располагаются беспорядочно, иногда парами в виде коротких цепочек; грамположительные, подвижны, имеют перитриальные жгутики; капсулы не образуют; споры овальные (придают палочке форму «теннисной ракетки»). Окраска по Ожешко. Размножаются на глюкозо-кровяном агаре, образуя небольшие прозрачные колонии с ровными или изрезанными краями, окруженные зоной гемолиза. На жидких средах наблюдается равномерное помутнение и осадок. Является сапронозом и вегетирует в почке, в анаэробных условиях споры прорастают, вегетативные клетки продуцируют ботулотоксин.

Ботулотоксины: химический состав, резистентность, антиген­ные свойства.

Ботулотоксин обладает нейротоксическим, лейкотоксическим, гемолитическим, лецитиназным д-ем. 8 антигенных вариантов: ботулотоксина: А, В, С1, С2, D, Е, F, G. Заболевания чел-ка вызывают ботулотоксины типов А, В, Е, F. Токсин – это полипептидная цепь с одной или несколькими внутримолекулярными связями, молекулярная масса = 150 000, относится к бинарным токсинам. Продуцируются в виде токсичных белковых комплексов: нейротоксин=нетоксичный белок. Ботулотоксин в виде высокомолекулярного комплекса малотоксичен и является прототоксином. Прототоксин распадается на два субкомпонента: L-легкие и Н-тяжелые; между ними дисульфидная связь. L-субкомпонент соответствует фрагменту А (активатор) --- оказывает токсическое д-е на клетку-мишень (мотонейрон); Р-субкомпонент – фрагменту В (акцептор) --- осущ-ет прикрепление к рецептору клетки-мишени.

Патогенез ботулизма. Роль токсинов в развитии заболевания. Ботулизм протекает как токсикоинфекция. Организм поражается не только токсином, содержащимся в пищевом продукте, но и токсином, который образуется в пищеварительном тракте и тканях в связи с проникновением туда возбудителя. Наиболее чувствителен чел-к к ботулиническим токсинам типов А, В, С, Е, F. Ботулинический токсин быстро всасывается в желудке и кишечнике, проникает в кровь и избирательно д-ет на ядра продолговатого мозга и ганглиозные клетки спинного мозга. Попадая в пищеварительный тракт человека или животного, клостридии ботулизма размножаются, проникают в кровь и оттуда во все органы, продуцируя при этом токсины. Инкубационный период у детей варьирует от 2 часов до 10 дней (чаще 18-24 часа). Чем больше инфицирующая доза, тем короче инкубационный период и тем тяжелее протекает заб-ние.

Исследуемые материалы и методы лабораторной диагностики ботулизма. Биопроба и серологические тесты для определения типа ботулотоксина. Материалы: кровь, рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, моча, секционный материал, пищевые продукты. Лаб. Диагностику проводят в 2-х направлениях – обнаруживают ботулотоксин и выделяют возбудителя.

1. Выявление ботулотоксина и определение его типа: а) серологическим методом, с помощью РОНГА, ИФА, р-ции преципитации в геле; б) биопроба на мышах: в 4-е пробирки разливают исследуемый материал, в каждую из 3-х добавляют разные противоботулинические сыв-ки А, В и Е, в 4-ю - нормальную сыв-ку, в термостат на 30 мин; содержимое пробирок вводят 4-м группам мышей и наблюдают в течении 4-х суток. Если есть ботулотоксин выживают мыши только одной группы, из-за нейтрализации токсина гомологичной сыв-кой (позволяет определить тип ботулинического токсина).

2. Бактериологический – выделение и идентификация культуры C. botulinum проводят, с помощью методов выделения анаэробных бактерий.

Препараты для специфической профилактики и лечения боту­лизма, механизм их действия. Вакцинопрофилактика не проводится. В основе профилактики ботулизма лежит строгое соблюдение санитарно-гигиенического режима при обработке продуктов на предприятиях пищевой промышленности - изготовление различных консервантов, солении рыбы и т.д. Если нарушены эти требования и клостридии сохраняются в консервах – они вызывают вздутие банок, а содержимое их издает запах прогорклого масла.

При лечении ботулизма применяются антитоксические противоботулинические поливалентные сыворотки. Пока не установлен тип токсина, больному вводят в,м по 10000 МЕ антитоксической сыв-ки типов А, С и Е и 5000 МЕ сыв-ки типа В (всего 35 000 МЕ). В первые сутки сыв-ку вводят повторно через каждые 5-10 ч, в тяжелых случаях – в/в. Промыванием желудка и дачей слабительного добиваются скорейшего удаления токсина и возбудителя кишечника. Также используется антибиотикотерапия.