Практична робота студентів

1. Вивчити демонстраційні препарати та оформити протокол.

2. Прибрати робоче місце та підписати протокол у викладача.

Алгоритм практичної роботи:

Переглянути демонстрацію та оформити протокол.

ДЕМОНСТРАЦІЯ

МІКРОПРЕПАРАТИ

Yersinia pestis, фарбування по Граму

Збудник має овальну форму, довжина до 2 мкм, поперечник – 0,3-0,7 мкм, Грам негативний. Розміщуються бактерії поодиноко. В препаратах, приготовлених з культур які вирощувались на щільному поживному середовищі можливі паличкоподібні форми, подібні до кишкової палички. При фарбуванні метиленовим синім по Лефлеру виразніше, ніж при фарбуванні по методу Грама, видна біполярність фарбування (полюси фарбовані більш інтенсивно, ніж центральна частина клітини).

Francisella tularensis, фарбування по Граму

Дуже дрібні Грам негативні кокобактерії (форма, проміжна між паличкоподібною і кулеподібною) з яскраво вираженим поліморфізмом. Звичайно їх розміри 0,2-0,7 мкм.

ДІАГНОСТИКУМИ

Туляремійний

Представляє собою завис культури збудника туляремії в формалінізованому ізотонічному розчині хлориду натрію. Діагностикум містить 25 млрд. мікробних тіл в 1 мл. Його використовують для проведення:

• кров’яно-краплинної реакції (застосовують у нерозведеному вигляді);

• розгорнутої реакції аглютинації (РРА) по типу реакції Відаля ( в цьому випадку розводять ізотонічним розчином натрію хлориду в 5 раз).

Частіше ставлять РРА з парними сироватками для виявлення зростання титру антитіл. Сироватку хворого розводять від 1:12,5 до 1:400. Реакцію вважають позитивною при титрі 1:100 і більше.

Чумний еритроцитарний антитільний

Представляє собою еритроцити з адсорбованими на них антитілами проти збудника чуми. Використовується для виявлення збудника в РНГА при експрес-діагностиці.

БАКТЕРІОФАГИ

Чумний

Містить живі бактеріофаги. Використовується для проведення реакції фаголізису з метою ідентифікації виділеної чистої культури при бактеріологічному методі діагностики.

АЛЕРГЕНИ

Тулярин

Є два види тулярину і відповідно два методи введення: тулярин для нашкірного застосування і тулярин для внутрішньошкірного застосування.Перший препарат більш зручний при масових обстеженнях для виявлення поствакцинального імунітету або імунного шару серед населення. Внутрішньошкірний тулярин застосовують для діагностики гострих захворювань, підозрілих на тулюремію.

Різні види тулярину містять різні концентрації алергена, тому категорично заборонено використовувати нашкірний тулярин для проведення внутрішньошкірних проб і навпаки.

ЛІКУВАЛЬНІ І ПРОФІЛАКТИЧНІ ІМУНОБІОЛОГІЧНІ ПРЕПАРАТИ

ВАКЦИНИ

Чумна жива EV

Висушена жива культура Y.pestis вакцинного штаму EV. Використовується для профілактики чуми по епідеміологічним показанням.

Туляремійна жива

Містить завис живих мікроорганізмів вакцинного штаму збудника туляремії. Щепленню підлягають люди, що проживають на території, епізоотичній по туляремії, а також виїжджаючі в такі місця.Вакцину наносять нашкірно, одноразово. Через 1-2 тижні провіряють ефективність щеплення постановкою нашкірної алергічної проби з тулярином або серологічної реакції (РА і РНГА). У разі негативного результату проводять повторне щеплення. Вакцина забезпечує імунітет, котрий зберігається до 5, іноді до 10-15 років.

СИРОВАТКИ

Імуноглобулін протичумний

Гамма-глобулінова фракція сироватки крові коней, гіперімунізованих вакциною EV. Використовується з профілактичною і лікувальною метою.

Чумна мічена ФІТЦ

Використовується для проведення прямої реакції Кунса РІФ при експрес-діагностиці чуми.

Туляремійна мічена ФІТЦ

Цю стандартну сироватку отримують класичним способом. Використовується для виявлення збудника в мазках крові і мазках-відбитках із органів тварин, заражених матеріалом від хворого (пунктатом бубона, харкотинням та ін.).

РНГА З ЕРИТРОЦИТАРНИМ ДІАГНОСТИКУМОМ, ЩО МІСТИТЬ ЧУМНИЙ АНТИГЕН

Серологічний метод відноситься до додаткових методів діагностики чуми.

РНГА поставлена з сироваткою крові хворого; мета – виявлення антитіл до антигенів чуми (він адсорбований на поверхні баранячих еритроцитів), що може вказувати на наявність захворювання чумою. Позитивна реакція виглядає у вигляді перевернутої парасольки.