Патогенез

Фактором патогенности можно считать капсулу бактерий, защищающую их от действия микробицидного потенциала фагоцитов. Как фактор вирулентности рассматривают способность пастерелл связывать и утилизировать ионы Fe²⁺.

Лабораторная диагностика

Основана на выделении и индикации возбудителя. В мазках из клинического материала выявляют грамотрицательные мелкие палочки, часто окрашивающи­еся биполярно. Хорошо растут на КА; колонии 1-2 мм в диаметре; большинство видов не проявляет гемолитической активности, но может вызвать окрашивание среды в зеленый или коричневый цвет. Колонии отличаются затхлым запахом плесени.

Питательные среды для культивирования пастерелл

Пригодны общепринятые плотные и жидкие питательные среды, однако при выделении из патологического материала следует применять среды, обогащенные кровью, сывороткой крови, дрожжевым экстрак­том.

Идентификация Р. multocida сероварианта А в использованием гиалуронидазы стафилококка. Метод основан на способности гиалуронидазы, выделяемой стафилококком, деполимеризовать капсулу Р. mul­tocida сероварианта А, состоящую из гиалуроновой кислоты.

На поверхность агара Хоттингера в чашке Петри штрихом высева­ют суточную бульонную культуру Р. multocida. После этого перпенди­кулярно линиям посева по всему диаметру чашки петлей высевают суточную бульонную культуру Staphilococcus aureus. Чашки с посевами инкубируют при 37°С с периодическим просмотром в течение 24 ч. Деполимеризующее действие гиалуронидазы проявляется уменьшением размера колоний пастерелл и примыкающих к линии роста стафилокок­ков. При просмотре чашек в косопроходящем свете колонии Р. multo­cida сероварианта А, находящиеся в непосредственной близости от линии роста стафилококка, тусклые, серого или голубого цвета, в то время как остальные колонии — яркие флюоресцирующие. У колоний, об­разуемых другими серовариантами (В, D, Е), изменений в размерах и окраске не наблюдается.

Идентификация Р. multocida сероварианта D с использованием акрифлавина. Испытуемую культуру высевают на агар Хоттингера с 10% крови быка или барана и инкубируют при 37°С 24 ч, затем пе­ресевают в пробирки, содержащие 3 см³ бульона Хоттингера. Инку­бируют при 37°С 18-24 ч. Бульонные культуры переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют в режиме, обеспечивающем осаж­дение бактериальных клеток. После центрифугирования 2,5 см³ надосадочной жидкости сливают, а в оставшейся ресуспендируют осевшие клетки и добавляют 0,5 см³ свежеприготовленного водного раство­ра (1:1000 - 1:500) нейтрального акрифлавина (син. трипафлавин, флавакридин, флавин). Перемешивают и оставляют при комнатной температуре.

Если испытуемая культура относится к сероварианту D, то в те­чение 10-20 мин образуется крупнохлопчатый осадок. Штаммы дру­гих серовариантов (А, В, Е) в осадок не выпадают и сохраняют ста­бильность суспензии в течение длительного времени (от нескольких часов до суток и более).

Микроорганизмы рода Brucella

Brucella — бактерии представляют собой мелкие (0,5-0,70,6-1,5 мкм) неподвижные палочки или коккобациллы. В мазках обычно расположены одиночно, реже парами, короткими цепочками, небольшими группами. Легко окрашиваются анилиновыми красителями, грамотрицательны. Полноценного биполярного окрашивания обычно не обнаруживают. Настоящих капсул не имеют, спор не образуют.Неподвижные, жгутиков не образуют. Хемоорганотрофы, метаболизм дыхательный; для роста необходи­мы тиамин, ниацин и биотин; рост часто стимулирует внесение пантотената кальция. Восста­навливают нитраты (исключая Brucella ovis); каталазо-положительны и обычно оксидазо – положительны, цитрат не утилизируют; индол не образуют; реакции с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательные. Строгие аэробы (некоторые нуждаются в уве­личении концентрации СО₂ до 5-10%); растут в пределах 20-40°С (оптимальная температура 37°С); оптимум рН 6,6-7,4. Факультативные внутриклеточные паразиты; человек заболевает при непосредственном контакте с больным животным (доярки, скотники), а также при употреб­лении в пищу зараженных продуктов.

Патогенные для человека Brucella abortus (палочка Банга), В. melitensis, В. suis, В. canis и их биотипы вызывают бруцеллез (также известен как ундулирующая, средиземноморская, мальтийская лихорадка или болезнь Банга). Заболевание описывал еще Гиппократ, но как самостоятельную нозоединицу его предложил выделить Мерстон в 1860 г. Возбудитель бруцеллеза был открыт и выделен английским медицинским врачем Брюсом (1986,1887)из селезенки погибшего от этой инфекции солдата из гарнизона на Мальте и позднее назван Brucella melilensis.В 1904-1907 г.г. Заммитом была установленна теснейшая связь инфекции людей и потреблением козьего молока и, что козы и козье молоко являются источником и резервуаром инфекции для людей. В 1897 датские ветеринарные врачи Банг и Стрибольт из околоплодной жидкости коровы выделили второй вид - Brucella abortus (палочка Банга). В 1914 г. Траумом, а затем в1916 г. Гудом и Смитом выделен возбудитель инфекционного аборта свиней, названный позднее - В. suis. В 1918 году американская исследовательница Ивенс, изучив биологические и серологические свойства всех трех культур, установила их большое сходство. Результаты этих наблюдений были подтверждены Майером и Фезье (1920), которые и предложили объединить данные микроорганизмы в одну группу.