Дифференциально- диагностическая среда Серова

Глюкоза 0,5 г

Мочевина 0,25 г

Молибденовокислый аммоний 0,1 г

Сода безводная 0,1 г

30% водный раствор сухой желчи 2,0 мл

1,6% водный раствор конго-рот 0,8 мл

1% водный раствор генцианвиолета 0,1 мл

Сухой агар 3,5 г

Дистиллированная вода 100,0 мл

Конго-рот и генцианвиолет растворить в горячей дистиллированной воде. Раствор сухой желчи готовить в стерильной воде.

Указанные инградиенты вносить в дистиллированную воду, нагревать и кипятить 5 мин при помешивании, разлить в чашки Петри. Цвет среды темно-вишневый, pH — 7,2-7,4. Среду можно хранить в течение недели в холодильнике.

Среда с индикатором бромтимоловым синим (бтс)

Желчь медицинская 20 мл

Раствор NaOH 4% 10-12 капель

Сухой питательный агар 35 г

Глюкоза 10 г

Мочевина 5 г

1,6% спиртовой раствор с индикатором бромтимоловым синим 8 мл

Дистиллированная вода 1 л

К 1 л воды довавить сухой питательный агар, медицинскую желчь и автоклавировать 20 мин при 0,5 атм. После охлаждения до 80°С добавить глюкозу, мочевину, индикатор бромтимоловый синий, смешать и сразу разлить в стерильные чашки Петри, pH – 7,8. Хранить среду при температуре 5-8°С в течение недели.

Универсальный скошенный столбик

Агар сухой питательный 3,5 г

Лактоза 0,4 г

Глюкоза 0,08 г

Крахмал растворимый 0,05 г

Сахароза 1,5 г

Мочевина 0,25 г

Уксуснокислый свинец 0,3-0,04 г

Тиосульфат натрия 0,03 г

Цистин 0,003 г

1% феноловокрасный водорастворимый 2,5 мл

Дистиллированная вода 100 мл

Ингредиенты вносить в любом порядке. Количество питательного агара, вносимого в среду, зависит от его серии. Если на этикетке указано, что на 100 мл воды его надо брать 5 г, то в среду добавляют 3,5 г, если на этикетке имеется рекомендация 3,5 г на 100 мл, то добавляют 2,5 г. Среду кипятить в течение 10-15 минут, разливать в стерильные пробирки по 5 мл, автоклавировать при 0,5 атм. 15 мин, после чего скашивать. Цвет среды абрикосовый.

Щелочной раствор

Раствор А – калия гидроокись: 400 г; вода дистиллированная: до 1 л. Раствор В – натрия хлорид: 5,0 г; вода дистиллированная: до 1 л. Оба раствора приготовить отдельно и хранить в условиях холодильника. Перед началом работы готовить рабочий раствор: смешивая 9,7 мл раствора В и 0,13 мл раствора А. Щелочной раствор должен быть прозрачным.

Среда Кларка для аутоагглютинации

Двузамещенный фосфат калия 5,0 г

Пептон 7,0 г

Глюкоза 5,0 г

Вода до 1 л

Пептон и фосфат калия растворить в воде и кипятить 2-5 мин. После удаления осадка среду стерилизовать при 120°С в течение 20 мин, асептично добавить стерильный раствор глюкозы и разлить по 3-4 мл в пробирки.

Микроорганизмы рода Pasteurella

Pasteurella — род паразитических бактерий, вызывающих поражения у млекопитающих и птиц. Пастереллезы (геморрагическая септицемия) инфекционная болезнь многих видов с-х животных, птиц и людей. Она характеризуется явлениями септицемии и воспалительно-геморрагическими процессами во внутренних органах, на серозных и слизистых оболочках. Родовое название, по предложению Trevisan дано в честь Луи Пастера. установившего их патогенность. Микроорганизмы впервые были обнаружены при нолере кур Perroncito, Semmer 1878. Выде­лены и обстоятельно изучены Pasteur (1880). Позднее данный возбу­дитель был выделен при септеиемми кроликов Gaffks 1881, Боллингеревской повальной болезни диких животных (Kitt. 1883), сеп­тицемии свиней (.Loeffler, 1886), септической плевропневмонии те­лят Poels» 1886), повальной болезни буйволов (Orste, Armanni. 1887), септицемии овец (Galtier, 1889). P.multoclda выде­лена из пищеварительного или респираторного тракта домашних ко­шек, собак, мышей, крыс, кроликов, северных оленей, лошадей, обезьян, львов, пантер, волков, опоссума.

Под названием Pasteurella multocida в 1939 г. Rosenbush, Merchant объединили возбудителей куриной холеры и септицемии КРС. Тем самым они узаконили точку зрения Kitt (1885) и Hueppe (1886) о родстве этих микроорганизмов. Микроорганизмы данного рода объединены в 14 видов и представлены короткими овоидными палочками. Неподвижны, не об­разуют эндоспор; при окраске по Романовскому-Гимзе или метиленовым синим дают бипо­лярное окрашивание (особенно в препаратах из живых инфицированных тканей); в мазках расположены одиночно, реже — парами или короткими цепочками. Хемоорганотрофы; луч­ше растут на средах, содержащих кровь; метаболизм бродильный; углеводы ферментируют с образованием кислоты; восстанавливают нитраты. Каталазоположительны, почти всегда оксидазоположительны, желатиназо­отрицательны; реакции с метиленовым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательны. Аэробы (факультативные анаэробы); температурный оптимум 37°С. Род включает много видов, основные из которых — Р. multocida с подвидами (multocida, septica и gallicida), P. dagmatis, P. gallinarum, P. canis, P. stomatis, P. anatis, P. langaa, P. avium, Р. aerogenes, P. haemolytica, P. pneumotropica и Р. volantium. Типовой вид — Р. multocida. Си­стематику рода нельзя считать законченной; на основании изучения ДНК-гомологии Р. aerogenes, Р.haemolytica, Р. иrеае и Р. pneumotropica оказались близки к бактериям рода Actinobacillus и частично включены в его состав (Р. иrеае). Дифференциальные признаки некоторых видов рода Pasleurella даны в табл. 17. Часто входят в состав микрофлоры дыхательных путей и глотки многих животных и птиц. При неблагоприятных условиях (обычно на фоне стресса) Р. multocida спо­собна вызывать пневмонии и сепсис у животных (заболевания известны как транспортная лихо­радка и куриная холера, гемморагическая септицемия). P. haemolytica – возбудитель септецемии ягнят и пневмонии КРС и овец. Заболевания человека до настоящего времени слабо изучены.