Лабораторная диагностика

Несмотря на отсутствие особых сложностей, адекватное распознавание актиномикоза остается непростой задачей, что во многом обусловлено неин­формированностью клиницистов о его частоте. Наиболее распространенный метод лабора­торной диагностики — обнаружение друз Actinomyces в экссудате или гнойном отде­ляемом из очагов поражения; последние, иначе обозначаемые как серные гранулы (тельца Боллингера) размером в среднем 0,3-2 мм. Они образованы агрегатами мицелия, имеющими вид округлых или овальных базофильных масс с эозинофильными структурами на поверхно­сти. Иногда в мазках можно обнаружить четкообразные атипичные формы Actinomyces israelii, a A. meyeri представлен мелкими неветвящимися клетками. Веское подтверждение диагноза — выделение и идентификация возбудителя (рис. 10).

A. bovis

Возбудитель актиномикоза крупного рогатого скота, реже других видов животных. Естественная среда обитания не извест­на, предположительно это слизистые оболочки ротовой полости или кишечник животных.

Морфология клетки и тинкториальные свойства типичны для ро­да. В препаратах из культур обнаруживаются грамположительные па­лочки, коккобактерии, палочки с утолщенными или разветвляющи­мися концами, могут присутствовать нити различной длины. В пора­женных тканях формируются друзы — скопление клеток с булавовидным утолщением на концах и расходящихся радиально из цент­ра друзы. Центральная часть окрашивается по Граму положительно, периферическая — отрицательно (Спесивцева, 1964).

Рисунок 10. Принципиальная схема бактериологического выделения возбудителей актиномикозов

Факультативный анаэроб, но в аэробных условиях без добавле­ния СО₂ на плотных средах не растет.

На плотных питательных средах образует нитевидные микроко­лонии за 24 ч при 36°С; позднее — макроколонии диаметром около 2 мм, выпуклые, иногда с вдавленным центром, ровным или волнис­тым краем, непрозрачные, белые, серо-белые, кремовато-белые, ше­роховатые или гладкие, мягкие. Рост медленный, типичные колонии формируются к 14-15 дн. культивирования. На кровяном агаре во­круг колоний может наблюдаться зона -гемолиза. В жидких средах образует мучнистый осадок (Курасова, Костин, Малиновская, 1971).

Не образует каталазу, цитохромоксидазу, не редуцирует нитра­ты и нитриты, тест Фогес-Проскауэра отрицательный, с метиловым красным — положительный. Продуцирует Н₂S, не гидролизует ксантин, тирозин, твин-20, 40, 60, 80, крахмал, лецитин, гиппурат, гуанин, желатин, казеин, часть штаммов гидролизует эскулин. Не расщепля­ет мясо, не разжижает свернутую сыворотку, в молоке образует кис­лоту, пептонизации нет. Образует ДНК-азу (но не липазу и гиалуронидазу). Не деаминирует аргинин, аланин. Расщепляет сахарозу, часть штаммов — мелибиозу, инертен по отношению к раффинозе, рамнозе, салицину, рибозе, сорбиту, трегалозе, ксилозе.

В эксперименте при подкожном, внутрибрюшинном и внутривен­ном заражении культурой восприимчивы мыши.

A. viscosus

Вызывает некоторые формы актиномикоза у челове­ка, его изолируют при актиномикозе свиней, собак, кошек. Естест­венная среда обитания — слизистые ротовой полости.

Морфология клетки соответствует общей родовой характеристике.

Факультативный анаэроб. Температурный оптимум 35-37°С. На плотных средах хорошо растет в обычных аэробных условиях и с по­вышенный содержанием СО₂, в анаэробных условиях не растет без наличия в атмосфере СО₂.

Микроколонии нитевидные. Макроколонии диаметром до 2 мм и более, плоские или возвышающиеся, с ровным или волнистым кра­ем, с нитевидными отростками, прозрачные или непрозрачные, белые, серо-белые, кремово-белые, шероховатые или гладкие, сухие, мягкие или мукоидные. Гемолитической активностью не обладает.

Образует каталазу. Тесты на редукцию нитратов, цитохромоксидазу, гидролиз эскулина, крахмала, твин-40, -60, закисление и свер­тывание молока, деаминацию аргинина, образование кислоты из мелибиозы, рибозы, салицина, крахмала, трегалозы, варьирует в зави­симости от штамма. Положительные реакции с метиловым красным, раффинозой, сахарозой, на сероводород (TSI-arap).

Отрицательные реакции на редукцию нитритов, Фогес-Проскауэ-ра, на гидролиз аденина, казеина, желатина, гуанина, гиппурата, гипоксантина, лецитина, твин-20, -80, тирозина, ксантина. Сыворотку не раз­жижает, казеин молока не пептонизирует, липазы, ДНК-азы, гиалуронидазы не образует. Не деаминирует аланин. Не образует кислоты из мелецитозы, рамнозы, сорбита, сорбозы, ксилозы.

Известны два серовара (1,2), отличающиеся по физиологическим характеристикам. В пределах данного вида выделяют группу атипичных штаммов. Близки по своим свойствам группы актиномицетов, имеющих статус промежуточных между видами A. naeslundii и A. viscosus.

В эксперименте патогенен для мышей и хомяков.

A. hordeovutaeris

Обнаруживают при висцеральных абсцессах, пе­ритонитах, артритах у собак.

Морфология бактериальной клетки типична для родовой характе­ристики.

Факультативный анаэроб, растет на плотных средах в аэробных и анаэробных условиях при избытке СО₂ в атмосфере. Температурный оптимум 35-37°С. Рост стимулирует добавление в питательные сре­ды 10—20% фетальной сыворотки крови.

Микроколонии нитевидные, макроколонии (14 дн. культивиро­вания) размером около 2 мм, приподнятые, с волнистым краем, с нитевидными отростками, непрозрачные, белые, серо-белые, кремово-белые, шероховатые, сухие или мягкие.

Обладает слабой каталазной активностью, гидролизует эскулин, образует кислоту из мелибиозы, раффинозы (слабо), трегалозы, кси­лозы, не утилизирует рамнозу и рибозу.

A. pyogenes.

Ранее вид описывали под названием Corynebacterium pyogenes. Обусловливает гнойные процессы у животных, в том числе маститы коров, перитониты свиней. Среда обитания — слизистые оболочки.

Морфология клеток типична для родовой характеристики.

Факультативный анаэроб. Температурный оптимум 35-37°С. На поверхности плотных питательных сред в анаэробных условиях рас­тет при избытке СО₂ в атмосфере.

Нитевидные микроколонии не образует, макроколонии имеют диаметр около 2 мм и более, выпуклые, с ровными краями, непрозрач­ные, белые или серо-белые, гладкие, мягкие; вокруг колоний на кро­вяном агаре просматривается зона -гемолиза.

Каталазу не образует, нитриты и нитраты не редуцирует, сероводород не образует, гидролизует казеин и желатин, не гидролизует аденин, эскулин, гуанин, гипоксантин, лецитин, твин-20, 60, 80, тирозин, ксантин. Часть штаммов гидролизует крахмал и твин-40. Молоко закисляет, свертывает, пептонизирует. Липазу, гиалуронидазу не образует, синтезирует ДНК-азу. Не деаминирует аланин, аргинин. Образует кис­лоту из рибозы и крахмала, часть штаммов расщепляет с образовани­ем кислоты мелецитазу, сорбит, трегалозу, ксилозу. Микроорганизм инертен по отношению к мелибиозе, раффинозе, рамнозе, салицину, сахарозе.

Фильтраты культур токсичны при внутреннем введении для лабо­раторных животных.

A. naeslundii, A. odontolyticus и A. meyeri изолируют при различ­ных патологических состояниях человека. О патогенности A. howellii. A. denticolens данных не имеется.

A. suis

Вид с неопределенным положением. Изолируют при актиномикозе молочной железы свиней.

Бактериальные клетки представляют грамположительные палоч­ки дифтероидной формы, иногда кокковидной, V-, Y- или Т-формы, короткие или длинные нити.

Факультативный анаэроб. Температурный оптимум 35-37°С. На плотных питательных средах в аэробных условиях при избытке СО₂ растет хорошо. В анаэробных условиях удовлетворительно растет без СО₂ и при его избытке.

Колонии гладкие, непрозрачные, размером до 2 мм, выпуклые, центр может иметь углубление, края волнистые с отростками, цвет белый, серо-белый. Могут быть шероховатыми или гладкими, сухи­ми или мягкими.

Каталазу не продуцирует, нитраты редуцирует, тест Фогес-Проскауэра отрицательный, с метиленовым красным — положительный, желатин не гидролизует. Образует кислоту из раффинозы, салицина, крахмала, сахарозы, трегалозы, часть штаммов не образует кислоту из рамнозы, сорбита, ксилозы.

A. humiferis

Обитатель почвы, имеет статус вида «incertae sedis». Патогенными свойствами не обладает.