1.4.3. Джерела навчальної інформації.

Основна література:

К.Д.Пяткін, Ю.С.Кривошеїн. Мікробіологія, 1982, с.145-157, 172-177

К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, 1980, с.169-181, 195-197

В.Д.Тимаков. Микробиология, 1983, с.180-184, 188-192, 218-222

А.И.Коротяев, С.А.Бабич. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, Санкт-Петергбург, 2002, с.151-161, 163-171, 176-181, 229-232

О.І.Клименюк, І.О.Ситник, М.С.Творко, В.П.Широбоків. Практична мікробіологія, 2004, с.126-136

И.Л.Дикий, И.Ю.Халупяк, Н.Е.Шевелева, М.Ю.Стогний. Микробиология, Харьков, 1999, с.85-86, 89-93, 94-96, 112-114

Л.Б.Борисов. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, М., 1984, с.107-112

М.Н.Лебедева. Руководство к практическим занятиям по медицин ской микробиологии, М., 1973, с.136-143

Додаткова література:

Словник по мікробіології, вірусології, імунології та інфекційним захворюванням. Заг. ред. проф. Палій, К., 2004.

1.5. Орієнтовна основа дії (ООД)

Використання РА в діагностиці інфекційних хвороб:

Досліджуваний матеріал

Чиста культура збудника

Сироватка крові хворого

РА на склі з специфічними видовими, типовими, аглютинуючими сироватками

Розгорнута РА з розведеннями сироватки хворого та специфічними діагностикумами

Кінцевий результат Кінцевий результат

через 10-15 хв. через 18-20 год.

1.6. Система навчальних завдань.

1.6.1. Вкажіть компоненти, які необхідні для постановки розгорнутої реакції аглютинації:

A – сироватки крові хворого

B – фізіологічний розчин

C – чиста культура бактерій

D – відома імунна неадсорбована сироватка

E – завись еритроцитів

F – діагностикум

G – комплемент

Правильна відповідь А, В, F

1.7. Методичні вказівки для роботи студентів на лабораторному занятті.

1.7.1. Методика проведення заняття.

Реакція аглютинації (РА) широко використовується в лабораторній діагностиці інфекційних захворювань. Її використовують як для ідентифікації збудника з допомогою діагностичних аглютинуючих сироваток, так і для визначення антитіл в сироватці крові хворого по відомим антигенам (діагностикумам).

З метою ідентифікації бактерій ставлять орієнтовну РА на склі. Для цього в краплю діагностичної аглютинуючої сироватки петлею вносять виділену культуру і перемішуємо. Супроводжується РА контролем – в краплю фізрозчину додають виділену бактеріальну культуру. Спостерігають за появою зерен аглютинату в досліді, в контролі – помутніння.

Для виявлення антитіл в сироватці хворого до її розведень (1:50-1:1600) додають відомий діагностикум і вміщують в термостат (37^оС) на 18-24 години. Потім визначають титр антитіл по появі зерен або пластівців аглютинату в розведеннях сироватки, в контролі діагностикуму – рівномірне помутніння, в контролі сироватки – рідина прозора.

Найбільш специфічна і чутлива реакція пасивної гемаглютинації (РПГА) широко використовується для виявлення специфічних антитіл в сироватці крові хворого при вірусних та інших інфекційних захворюваннях. Для цього використовують стандартний еритроцитарний діагностикум, який додають до розведень сироватки хворого в лунки планшету. Інкубують в термостаті (37^оС) проводять первинний облік через 2 години, кінцевий – через 18-20 годин. Позитивна РПГА виражається в появі на дні лунок крихкого осаду у вигляді парасольки, негативна – осад в вигляді компактного диску з рівними краями.

Порядок проведення лабораторної роботи:

1. Поставити та врахувати орієнтовну реакцію аглютинації на склі з метою ідентифікації виділеної культури бактерій.

2. Врахувати розгорнуту реакцію аглютинації з метою серологічної діагностики інфекційного захворювання.

3. Врахувати РПГА в демонстраційному досліді.

4. Ознайомитися з біопрепаратами для РА та РПГА.

1.7.2. Організаційна структура проведення лабораторного заняття.

№ етапу	Етапи роботи	Час, хвилини	Засоби навчання	Обладнання	Місце проведення
1	Перевірка присутніх	2	Діагностичні аглютинуючі сироватки Сироватка хворого Фізіологічний розчин Таблиці	Прикметні скельця Піпетки 1 мл Пробірки Штатив	Навчальна лабораторія
2	Перевірка первинного рівня знань	10
3	Опитування студентів по темі заняття	20
4	Тестовий контроль	20
5	Лабораторна робота	30
6	Підведення підсумків. Оцінка діяльності кожного студента	5
7	Завдання по наступній темі	3

Автор: доцент, кандидат біологічних наук А.О.Чеснокова