3. Лабораторные методы диагностики мастита у коров

а) Бромтимоловая проба

0,2% спиртовый раствор бромтимолового синего наносится на плотную фильтровальную бумагу в виде 4-х пятен. Бумага высушивается и сохраняется в сухом виде. Из каждого соска вымени в середине или в конце доения на участки бумаги, пропитанные индикатором, наносится капля молока. Молоко из здоровой четверти вымени окрашивает пятно в желтый цвет или желтовато-зеленый, а из больной четверти в зеленую или сине-зеленую окраску в зависимости от тяжести болезни.

б) Димастиновая проба

Для диагностики мастита на специальные молочно-контрольные пластинки из каждого соска в соответствующую лунку сдаивают молоко до нижней метки (1 мл) и в каждую лунку добавляют 1 мл 5% раствора димастина. Перемешивают реактив и молоко вращательными движениями стеклянной палочкой в течение 5-17 секунд в каждой луночке и определяют консистенцию и цвет смеси. При воспалительном процессе в вымени молоко при смешивании с димастином образует желеобразный сгусток малинового цвета.

в) Проба с мастопримом

В луночку молочно-контрольной пластинки к 1 мл сборного молока приливают 1 мл 2,5% раствора мастоприма. Смесь молока с мастопримом перемешивают стеклянной палочкой в течение 10-20 секунд. Результаты реакции оцениваются по консистенции смеси молока с мастопримом.

Оценка результатов молока с мастопримом проводится по таблице:

Консистенция	Результат оценки реакции	Наличие примеси маститного молока (%)
Однородная жидкость	-	Не более – 2-3
Слабое желе	+	4-6
Выраженный желеобразный сгусток	++	8-12
Плотный желеобразный сгусток	+++	Свыше 15

г) Каталазная проба

Каталаза гидролизующий фермент, он способен разлагать перекись водорода на воду и молекулярный кислород: 2 Н₂О₂ → 2Н₂О + О₂. По объему выделившегося кислорода можно судить о количестве каталазы. Количество миллилитров кислорода, выделившегося в течение 2-х часов называют каталазным числом. Для определения каталазного числа молока в каталазник Функе наливают 15 мл исследуемого молока и 5 мл 1% раствора перекиси водорода. Жидкость тщательно перемешивают и закрывают пробкой со вставленной в не градуированной трубкой. Трубку устанавливают так, чтобы уровень жидкости находился у нулевой ее черты. Каталазник погружают в водяную баню с температурой воды 25⁰С на 2 часа. При наличии в молоке каталазы под давлением выделившегося кислорода, уровень молока в трубке поднимается. По уровню молока в градуированной трубке определяют каталазное число молока. Свежее молоко, полученное от здоровых коров имеет каталазное число молока 2,5-3, у коров, больных маститом, в молозивый период и в конце лактации каталазное число выше.

4. Контроль качества пастеризации, гост 3623

а) лактоальбуминовая проба. Белок молока альбумин при нагревании молока выше 80⁰С свертывается и выпадает в осадок. Пастеризованное при таком режиме молоко альбуминов не содержит. Если молоко пастеризовали при более низкой температуре, то альбумин остается в молоке. В колбу наливают 5 мл молока и 20 мл воды. К смеси из бюретки приливают раствор серной кислоты (0,1 н) для осаждения казеина. Казеин отфильтровывают. Отмеривают в пробирку 5 мл фильтрата и кипятят. Если молоко нагревалось до температуры 80⁰С и выше, хлопьев альбумина после кипячения не окажется.

б) реакция на фермент фосфатазу. Фосфатазная проба используется для определения эффективности пастеризации.

В пробирку наливают 2 мл исследуемого молока и добавляют 1 мл 0,1% раствора реактива фенолфталеинфосфата натрия. Пробирку закрывают пробкой и после тщательного перемешивания содержимого, её помещают в водяную баню при температуре 40-45⁰. Реакция учитывается через 10 минут и 1час. Если молоко пастеризованное, в пробе никаких изменений не наблюдается. При нарушении режима пастеризации или добавления сырого молока наблюдается изменение окраски от светло-розового до ярко-розового.

Реакция на фосфотазу показывает добавление сырого молока к патсеризованному в количестве не менее 2%.

Реакция на фермент пероксидазу В пробирку к 3 мл молока добавляют 3-4 капли йодокалиевого крахмала и 1-2 капли раствора перекиси водорода. Если молоко непастеризовано, появляется интенсивно синее окрашивание, при недостаточной пастеризации (65-70⁰), появляется бледно-синее окрашивание. Отсутствие окрашивания в течение 1 минуты после прибавления реактивов показывает, что молоко пастеризовано при температуре выше 80⁰С.

Выполнить самостоятельно

1. Определить степень чистоты молока.

2. Определить бактериальную обсемененность молока тремя методами.

3. Провести исследование молока на мастит, сравнить полученные

результаты.

4.Определит качество пастеризации молока, сравнить полученные

результаты.

Результаты занести в таблицу. Сделать заключение о качестве проб молока.

Определяемые показатели	Пробы молока
1	1	2
Чистота молока по эталону. Бактериальная обсемененность молока: а) редуктазная проба б) ускоренная редуктазная проба в) резазуриновая проба Диагностика мастита а) проба с димастином б) бромтимоловая проба в) каталазная проба г) проба с мастопримом Контроль качества пастеризации а) фосфатазная проба б) пероксидазная проба в) лактоальбуминовая проба

Проблемные задания

1.Определить сортность молока, если в результате анализа установлено:

а) молоко бело-желтого цвета, без посторонних не свойственных свежему молоку привкусов и запахов. Плотность – 1,028, кислотность 21⁰Т, степень чистоты по эталону III группы.

б) молоко чистое, без посторонних не свойственных свежему молоку привкусов и запахов, белого цвета. Плотность – 1028, кислотность 16⁰Т. Степень чистоты по эталону II класса. Бактериальная обсемененность II класса.

2.Определить качество пастеризации молока:

а) при контроле пастеризации молока по реакции на пероксидазу с йодокалиевым крахмалом содержимое пробирки окрасилось в ярко синий цвет;

б) при контроле пастеризации молока по реакции на пероксидазу с йодокалиевым крахмалом после добавления реактивов цвет содержимого в пробирке не изменился

3.Можно ли разрешить продажу молока на продовольственном рынке, если на молочно-контрольной пластинке после прибавления к молоку раствора мастоприма образуется плотный желеобразный сгусток?

Контрольные вопросы:

1. Как проводится сортовая оценка молока в зависимости от результатов определения группы чистоты?

2. Рассказать о значении микробного фермента редуктазы для определения количества микробов в молоке. Какие вещества применяются для определения активности фермента редуктазы? Как проводится сортовая оценка молока по ГОСТ Р 52054-2003 в зависимости от результатов определения бактериальной обсемененности молока?

3. Рассказать об изменениях в молоке при заболевании коров маститом. Какие методы применяются для диагностики маститов?

4. Какие изменения вызывает в молоке пастеризации? Рассказать о методах выявления эффективности пастеризации молока.

5. Рассказать о ферментах молока. Какое значение имеет определение этих ферментов в оценке санитарного качества молока?

Т е м а 11

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПИЩЕВОЙ ЦЕННОСТИ И САНИТАРНЫХ

ПОКАЗАТЕЛЕЙ МОЛОКА

( контрольное занятие)

План занятия

1. Провести органолептическую оценку проб молока (цвет, вкус, запах, консистенция).

2. Определить плотность, содержание жира, белка, количества сухих и сухих обезжиренных веществ в пробах исследуемого молока.

2. Определить кислотность, механическую загрязненность, бактериальную обсемененность по редуктазной пробе, эффективность пастеризации исследуемого молока.

Методические советы

В процессе самостоятельной подготовки к занятию студент должен повторить пройденный материал по теме: «Определение качества молока».При этом следует обратить внимание на вопросы:

1. Органолептическая оценка молока.

2. Определение физико-химических показателей молока (плотность, жирность, количество белка, сухих веществ, сухих обезжиренных веществ).

3. Санитарно-гигиенические показатели молока: (кислотность, механическая и бактериальная обсемененность по редуктазной пробе, эффективность пастеризации).

Студент должен подготовиться к решению проблемных ситуаций:

а) Определение пищевой ценности молока по показателям содержания жира, белка, сухих и сухих обезжиренных веществ.

б) Определение фальсификации молока по физическим показателям.

в) Определение свежести молока по показателям кислотности.

г) Определение санитарного состояния молока по показателям степени чистоты и бактериальной обсемененности.

Литература.

Макаров В.А. и др. Ветеринарно-санитарная экспертиза с основами технологии и стандартизации продуктов животноводства. М., 1991, стр. 344.

Кугенев П.В., Барабанщиков Н.В. Практикум по молочному делу. М., 1988, стр. 14-100.

Порядок выполнения работы

1. Провести исследование 2-х проб молока. Результаты исследований занести в экспериментальный лист (форма 1) и акт (форма 26).

Форма 26

А К Т

От «_________» _____________________ 2004 г.

Приемщик (лаборант) __________________________________________

фамилия, имя, отчество

завода ______________________________ и представитель поставщика

____________________________________________________________

фамилия, имя, отчество представителя и наименование поставщика

составили настоящий акт в том, что при приемке-сдаче, поставленного поставщиком ________________ молока, сливок по накладной №__________

оказались расхождения по следующим показателям:

ДАННЫЕ ПОСТАВЩИКА ДАННЫЕ ПРИЕМКИ

1. Органолептические показатели ___________ _________________

2. Содержание жира,% ___________ _________________

3. Плотность, ⁰А ___________ _________________

4. Кислотность, ⁰Т ___________ _________________

5. Чистота ____________ __________________

6. Редуктазная проба ____________ __________________

7. Температура, ⁰С ____________ __________________

8. Сорт ____________ __________________

9.Состояние тары,упаковки, ____________ _ ________________

пломбировки

10.Количество мест ____________ __________________

11.Вес нетто, кг ____________ __________________

Заключение____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Приемщик – мастер ______________________

Лаборант ______________________

Сдатчик ______________________

Представитель

незаинтересованной

организации ______________________

2.Решить проблемные ситуации:

а) В лабораторию ВСЭ рынка поступило молоко с целью продажи его на продовольственном рынке.

При проведении исследований было установлено, что молоко белого цвета со специфическим запахом, слегка сладковатого вкуса, однородной консистенции. Плотность молока – 1031 кг/м³, содержание жира – 2,9%, кислотность 16⁰Т, количество сухих веществ – 11,85%.

Следует определить качество исследуемого молока и возможность разрешения продажи его на рынке

б) На молочный завод поступило молоко из колхоза «Восход» Пестречинского района. При исследовании средней пробы молока установлено, что молоко белого цвета, без посторонних не свойственных свежему молоку запахов. Плотность – 1027 кг/м³, кислотность – 21⁰Т. Степень чистоты по эталону III группы, бактериальная обсемененность –

III класса.

Следует определить возможность приема молока на молочный завод и обосновать заключение о возможности приема согласно существующих правил ветсанэкспертизы молока.

в) В молочную лабораторию колхоза «Урал» Арского района поступили пробы молока от 2-х групп коров, закрепленных за доярками.

При проведении исследований молока 1 группы было установлено, что оно бело-желтого цвета, без посторонних привкусов и запахов, слегка сладковатого вкуса. Плотность – 1028 кг/м^з, содержание жира – 3,7%. Степень чистоты по эталону не ниже I группы.

При исследовании молока коров второй группы было установлено, что оно белого цвета, со слабо специфическим запахом и слегка сладковатым вкусом. Плотность – 1026 кг/м³, содержание жира – 3,1%, степень чистоты по эталону не ниже I группы.

Следует определить качество исследуемого молока от каждой группы коров.

г) В лабораторию ВСЭ на рынке для экспертизы поступило молоко с целью его продажи его на колхозном рынке. При проведении исследований было установлено, что молоко бело-желтого цвета, со специфическим запахом, однородной консистенции. Плотность – 1027 кг/м³, содержание жира – 3,4%, кислотность – 21⁰Т, степень чистоты по эталону не ниже I группы. При кипячении молоко свертывается.

Следует определить степень свежести молока и какие действия должен предпринять врач-ветсанэксперт.

Форма 1

Э К С П Е Р Т Н Ы Й Л И С Т

№№ п/п	Проводимые исследования	Пробы молока
		1	2
1.	Органолептическая оценка (цвет, вкус, запах)
2.	Физико-химические показатели: а) плотность
	б) жирность
	в) количество белка
	г) количество сухих обезжиренных веществ в молоке
	д) количество сухих веществ
3.	Санитарно-гигиенические показатели молока: а) кислотность
	б) механическая загрязненность
	в) редуктазная проба
	г) пастеризационная проба

Заключение о питательной ценности и санитарном состоянии молока:

1 проба:

2 проба:

Т е м а 12