41

МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ, МОЛОДІ ТА СПОРТУ УКРАЇНИ

ОДЕСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

ІМЕНІ І.І. МЕЧНИКОВА

Біологічний факультет

Кафедра мікробіології і вірусології

Напрям підготовки/спеціальність 0704. Біологія/ 8.070402. Мікробіологія та вірусологія

Освітньо-кваліфікаційний рівень Магістр

Кваліфікаційна робота

Ентомопатогенні властивості штаму

Bacillus thuringiensis ОНУ 15

Студента V курсу денної форми навчання жукова Бориса Сергійовича Науковий керівник к.т.н., доцент Страшнова Ірина Валентинівна Рецензент к.б.н., доцент кафедри фізіології людини та тварин СЬОМІК Лідія Іванівна

Рекомендовано до захисту Протокол засідання кафедри №______ від «___»_______р. Завідуючий кафедрою ______________Іваниця В.О. (підпис) (прізвище, ініціали)

Захищено на засіданні ДЕК №______ протокол №____ від «____»______р. Оцінка__________________________ (за 4-х та за 100 бальною шкалою) Голова ДЕК________ ______________ (підпис) (прізвище, ініціали)

Одеса 2011

Реферат

Кваліфікаційна робота «Ентомопатогенні властивості штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15», на здобуття освітнього-кваліфікаційного рівня магістра, викладена на 40 сторінках машинописного тексту, включає 5 таблиць, 3 рисунка. В роботі є посилання на 35 авторів кирилицею та 12 латиницею.

Метою дослідження було вивчити біологічні властивості, у тому числі ентомопатогенну активність, штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15.

Експериментальну частину роботи виконано на базі кафедри мікробіології і вірусології Одеського національного університету імені І. І. Мечникова та Одеського біотехнологічного науково-навчального центру

Кожен з досліджених методів зберігання Bacillus thuringiensis ОНУ 15 дозволяв ефективно зберегти його життєздатність.

Вивчення основних біологічних властивостей дозволило ідентифікувати досліджений штам до виду Bacillus thuringiensis.

У дослідженні ентомопатогенної активності, п’ятидобова культура Bacillus thuringiensis ОНУ 15 проявила найбільшу ентомопатогенну активність щодо грибного комарика Bradisia pilistrata, що пов’язано з виснаженням поживних речовин у середовищи і збільшенням титру спор, та відповідно, кристалів токсину.

Пасаж штаму Bacillus thuringiensis ОНУ15 через чутливий організм Bradisia pilistrata призвів до підвищення ентомопатогенної активності.

ЗМІСТ

	Стор.
Вступ…………………………….……………………………………….	3
1. Огляд літератури……..…………………………………………..	6
1.1. Систематичне положення бактерій роду Bacillus…………………….	6
1.2 Біологічні властивості ентомопатогенних представників роду Bacillus………………………………………………………………………………	7
1.2.1. Морфологічні властивості…………………………………………	7
1.2.2. Культуральні властивості…………………………………………..	9
1.2.3. Фізіолого-біохімічні властивості…………………………………..	10
1.2.4. Ентомопатогенні властивості……………………………………...	11
1.3. Ентомопатогенні та ларвіцидні препарати на основі Bacillus thuringiensis...................................................................................................	13
2. Матеріали і методи дослідження……………….…………	18
2.1. Визначення життездатності штаму Bacillus sp. ОНУ 15…………...	18
2.2. Визначення біологічних властивостей та видова ідентифікація…..	19
2.3. Дослідження ентомопатогенної активності штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15………………………………………………………	21
3. Результати дослідження та їх обговорення…………..	24
3.1. Життездатність штаму Bacillus sp. ОНУ 15…………...	24
3.2. Білогічні властивості та видова ідентифікація…..	25
3.3. Ентомопатогенна активність штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15………………………………………………………	27
Узагальнення…………………………………………………………	33
Висновки……………………………………………………………….	35
Список літератури………..…………………...................................	36

Вступ

У наш час у природі все більше проявляються негативні результати широкого застосування хімічних інсектицидів. Питання охорони природи та збереження корисних комах зумовлюють обмеження їх використання у народному господарстві. Тривале використання хімічних засобів призводить до появи стійких популяцій шкідливих видів комах. Накопичуючись у природі, пестициди, які застосовуються, викликають небажані мутації у живих організмах навіть через багато років, що несе загрозу й майбутнім поколінням. У зв’язку з цим залучення мікробіологічних методів боротьби з шкідниками рослин має великі перспективи. 

На відміну від отрутохімікатів, інсектициди мікробного походження специфічно вибірково діють на комахи і відносно безпечні для людини і навколишнього середовища. 

Бактеріальні інсектициди виробляють і застосовують у багатьох розвинених країнах світу. Ці препарати ефективні в боротьбі з гусеницями і личинками величезного спектру комах. Найбільший виробник бактеріальних препаратів - Північна Америка (близько 50 % світового виробництва). 

Найбільше практичне застосування знаходять бактеріальні інсектициди створені на основі ентомопатогенної спороутворюючої бактерії Bacillus thuringiensis - природного мешканця біоценозів [9, 16, 27].

В Інституті Пастера у шестидесятих роках минулого сторіччя було охарактеризовано понад 50 підвидів B. thuringiensis і показано, що різні штами відрізняються за фізіологічними та патогенними властивостями і можуть бути використані щодо об'єктів, проти яких раніше не застосовували біологічні методи. У процесі виділення нових штамів B. thuringiensis можуть бути відкриті нові можливості біологічного контролю популяції комах [3, 4, 18].

Патогенна дія B. thuringiensis на комахи пов'язана зі специфічними метаболітами бактерій. Основою ентомопатогенної активності бактерій, є токсини - кристалічні включення білкового походження (Cry-білки). Екзотоксин відіграє особливу роль у патогенезі комах, проявляючи не тільки летальний, але і тератогенний ефект [20, 24, 43, 46]. 

Таким чином, вивчення біології B. thuringiensis та застосування цього мікроорганізму в системі захисту рослин від шкідників має дуже високу цінність.

Метою роботи було дослідити біологічні властивості, у тому числі ентомопатогенну активність, штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15.

У завдання дослідження входило:

1. Визначити життєздатність штаму Bacillus sp. ОНУ 15;

2. Вивчити біологічні властивості і провести видову ідентифікацію штаму Bacillus sp. ОНУ 15;

3. Дослідити ентомопатогенні властивості штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15;

4. Підвищити вірулентність штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15.

Об’єкт дослідження: штам Bacillus thuringiensis ОНУ 15.

Предмет дослідження: життєздатність та біологічні властивості штаму Bacillus thuringiensis ОНУ 15.