2. Указания к занятию:

Внимательно изучите инструкцию.
Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторной работы.
Соблюдайте меры предосторожности в работе с реактивами.
При работе с пипетками используйте резиновые груши с переходником.

3. Практическая часть.

Лабораторная работа № 1. Осаждение белков методом высаливания.

Принцип: Насыщенным раствором сульфата аммония осаждается альбуминовая фракция белков, а полунасыщенным раствором сульфата аммония – глобулиновая фракция. Сущность реакции заключается в дегидратации (обезвоживании) молекул белка.

Реактивы: 1) неразведенный яичный белок;

2) насыщенный раствор сульфата аммония;

3) раствор NаОН, 10%;

4) сульфат меди, 1% раствор;

5) дистиллированная Н₂О;

6) сульфат аммония, в порошке.

Оборудование: штатив с пробирками, стеклянные палочки, фильтры.

Ход определения.

30 капель неразведенного яичного белка наливают в пробирку и добавляют 30 капель насыщенного раствора сульфата аммония. Содержимое пробирки перемешивают. Получают полунасыщенный раствор сульфата аммония, при этом глобулиновая фракция белка осаждается, а альбуминовая остается в растворе. Через 5 минут осадок отфильтровывают, на фильтре остается глобулиновая фракция, а в фильтре – альбуминовая. Осадок с фильтра снимают стеклянной палочкой и переносят в пробирку, куда добавляют 5 капель воды. Осадок растворяется. Наличие белка в растворе обнаруживают с помощью биуретовой реакции, которая будет положительной.

В пробирку с фильтратом добавляют порошок сульфата аммония до полного насыщения раствора, т.е. до тех пор, пока не прекратится растворение соли. при этом выпадает осадок – альбумины. Его отфильтровывают, растворяют и проводят биуретовую реакцию.