- •Челябинск
- •Нингидриновая рекция
- •Хроматографическое разделение аминокислот на бумаге
- •Занятие 2 Физико-химические свойства белков
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть занятия Высаливание белков сыворотки
- •Тепловая денатурация белков
- •Осаждение белков органическими растворителями
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Домашнее задание
- •6. Выберите правильный ответ.
- •7.Выберите правильный ответ.
- •8.Выберите правильный ответ.
- •Занятие 3 Белки крови. Методы разделения белков.
- •Вопросы к занятию
- •Практическая работа
- •Домашнее задание
- •Занятие 4 Ферменты. Свойства. Механизм действия.
- •Цель занятия
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Специфичность действия ферментов
- •Влияние температуры на активность фермента
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Домашнее задание
- •Занятие 5 Коллоквиум по теме: «Белки. Ферменты»
- •Вопросы для самоподготовки
- •Занятие 6 Введение в обмен веществ. Биохимия питания
- •Лабораторная работа n1 Обнаружение аскорбиновой кислоты (проба Фелинга)
- •Количественное определение содержания витамина с – в твердых продуктах
- •Домашнее задание
- •Занятие 7 Минеральные вещества пищи. Региональные патологии, связанные с недостатком микроэлементов в пище и воде
- •Вопросы для самоподготовки
- •Практическая работа Определение кальция в моче трилонометрическим методом
- •Приложение для лечебного и медико-профилактического факультетов
- •Домашнее задание
- •Занятие 8 Сложные белки - хромопротеиды
- •Вопросы для подготовки студентов к занятию
- •Практическая часть
- •Домашнее задание
- •Занятие 9 Обмен хромопротеидов
- •Домашнее задание
- •Занятие 10 Биологическое окисление
- •Вопросы для подготовки к занятию:
- •Домашнее задание
- •Домашнее задание
- •Занятие 11 Свободно-радикальное и микросомальное окисление
- •Вопросы для самоподготовки
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Домашнее задание
- •Занятие 12 Сложные белки - нуклеопротеиды
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая работа Определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче по методу Мюллера-Зейферта
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Занятие 13 Обмен нуклеопротеидов Виды передачи генетической информации
- •Занятие 14 Обмен белков
- •Практическая часть занятия
- •Занятие 15 внутриклеточный обмен аминокислот
- •Вопросы для подготовки к занятию
- •Практическая часть Определение активности алт и аст
- •Домашнее задание
- •Источники и пути обезвреживания аммиака в разных тканях
- •Занятие 16 Индивидуальные пути обмена аминокислот
- •Домашнее задание
- •Приложение для педиатрического факультета
- •Ретенция азота у детей различного возраста
- •Занятие 17 Коллоквиум по теме: «Нуклеопротеиды. Обмен нуклеопротеидов Белки. Обмен белков»
Занятие 15 внутриклеточный обмен аминокислот
-
Цель занятия. Изучить общие пути катаболизма аминокислот (превращения по аминогруппе, превращения по карбоксильной группе, превращения по углеродному скелету); узнать основные механизмы образования аммиака в организме, причины его токсичности и пути обезвреживания
Вопросы для подготовки к занятию
-
Основные пути поступления и использования аминокислот в организме человека.
-
Общие пути превращения аминокислот. Катаболические превращения аминокислот по NH2 группе, по СООН группе и по углеродному “скелету”.
-
Трансаминирование (переаминирование). Химизм процесса, характеристика трансаминаз, роль витамина В6 в трансаминировании.
-
Аланиновая (АлАТ) и аспарагиновая (АсАТ) аминотрансферазы. Клиническое значение определения содержания трансаминаз в крови и тканях.
-
Биологическое значение реакций трансаминирования. Коллекторная функция a-кетоглутарата в процессе трансаминирования.
-
Дезаминирование аминокислот. Виды дезаминирования. Окислительное (прямое) дезаминирование глутамата. Химизм и значение процесса, характеристика фермента.
-
Трансдезаминирование аминокислот (непрямое дезаминирование). Схема процесса. Роль кетоглутарата, глутамата в этом процессе. Биологическое значение трансдезаминирования.
-
Судьба безазотистого остатка аминокислот (кетокислот). Гликогенные и кетогенные аминокислоты. Связь обмена аминокислот с ЦТК.
-
Источники и основные пути образования аммиака.
-
Токсичность и пути обезвреживания NH3:
а) восстановительное аминирование кетоглутарата;
б) образование амидов (глутамина, аспарагина) и аланина - транспортных форм аммиака;
в) образование солей аммония (аммонигенез в почках); роль глутамина (аспарагина) в образовании солей аммония в почках и поддержании кислотно-основного состояния в организме.
г) биосинтез мочевины. Цикл Кребса-Хензелайта (орнитиновый цикл). Химизм процесса, роль аспартата в этом процессе.
12.Нарушение биосинтеза мочевины. Гипераммониемия. Врожденные ферментные нарушения цикла мочевинообразования (цитрулинемия и аргининемия).
Практическая часть Определение активности алт и аст
Образующаяся в результате переаминирования щавелевоуксусная кислота декарбоксилируется при помощи анилинцитрата и превращается в ПВК. Последнюю определяют в виде 2,4-динитрофенилгидразина. Поскольку реакционная смесь содержит a-кетоглутаровыую кислоту, которая в этих же условиях образует соответствующий гидразон с 2,4-динитрофенилгидразином, пробу экстрагируют толуолом. В толуол переходит только гидразон ПВК, а гидразон a-кг остается в водном растворе. При добавлении к толуоловому экстракту спиртовой щелочи развивается стабильное красно-орнажевое окрашивание. Интенсивность которого пропорциональна концентрации ПВК,. Определяют колориметрически на ФЭКе.
Ход работы. В центрифужную пробирку внести 0,1 мл прединкубированной сыворотки крови, в другую – контрольную 01, мл дистиллированной воды. В обе пробирки вносят по 0,5 мл 2,4-динитрофенилгидразина. Инкубируют 20 минут при комнатной температуре. Затем добавляют по 0,5 мл 0,4 N NаОН. Окраску проб колориметрировать на ФЭКе с зеленым светофильтром в кюветах 10 мм против контрольной пробы.
Активность АСТ и АЛТ вычисляют при помощи калибровочных кривых.
Норма активности АСТ- 0,1-0,45 ммоль / ч.л
АЛТ – 0,1-0,68 ммоль / ч.л
Результат:
Вывод: