Журнал неврологии и психиатрии / 2008 / NEV_2008_09_13

Фармакологическая индукция стереотипных поведен-

ную активность выражали в изменении экстинции E335 íà

ческих реакций нашла применение в моделировании пси-

1 мг белка за 60 мин.

хопатологических нарушений [11, 14]. Это относится и к

Содержание L-ДОФА определяли спектрофотометриче-

применению L-ДОФА (диоксифенилаланина), который яв-

ским методом по Shiman [22]. Оптическую плотность про-

ляется предшественником дофамина (ДА).

дукта измеряли при Е510 нм на 1 мг белка фракции. Актив-

Целью настоящей работы было выяснение особенно-

ность МАО Б определяли спектрофотометрическим мето-

стей обмена нейромедиаторов в мозге по показателям ак-

дом по Горкину и соавт. [6]. Ферментативную активность

тивности ферментов дофаминергической системы у разных

выражали в изменении экстинции Е450 на 1 мг белка за 60

генетических линий крыс — Вистар и Август под влиянием

ìèí.

экзогенного ДОФА (препарата мадопар-125).

Статистическую обработку данных проводили при по-

Известно, что линии крыс различаются по ряду физио-

мощи непараметрического критерия U Манна-Уитни. Раз-

логических и поведенческих характеристик. Крысам линии

личия между выборками считались достоверными при р<0,05.

Август в большей мере свойственны реакции страха, и их

мозг менее устойчив к стрессорным повреждениям [5, 12].

Результаты и обсуждение

На биохимическом уровне эти различия были выявлены при

сравнении изменений ряда показателей обмена нейроме-

Из данных, приведенных в таблице (в условных едини-

диаторов под влиянием амфетамина in vivo [9].

цах Е/мг белка), видно, что введение препарата мадопар-

Материал и методы

125 интактным крысам линии Вистар через 60 мин приво-

дит к изменению исследуемых показателей в структурах

мозга: в коре больших полушарий отмечена тенденция

Эксперименты проводили на 36 половозрелых крысах-

(р>0,05) к снижению активности ТирГД с 1,46 до 1,32 (90,4%

самцах линий Вистар (300—340 г) и Август (200—250 г),

от контроля) (см. рисунок); в хвостатом ядре — статистиче-

разделенных на 2 группы: 1-ю группу (контрольную) со-

ски достоверное (р<0,05) подавление активности фермента

ставили интактные крысы указанных линий (по 9 крыс),

с 1,88 до 131 (69,7% от контроля).

которым вводили изотонический NaCl; 2-ю (основную) —

Снижение активности ТирГД на основе субстратного

животные (по 9 каждой линии), которым однократно вво-

ингибирования, видимо, может быть связано с повышен-

дили препарат мадопар-125 в дозе, соответствующей 50 мг/

ным поступлением в мозг ДОФА при введении мадопара-

1 кг массы тела L-ДОФА. Во всех случаях применяли внут-

125.

рибрюшинное введение препарата; через 60 мин животных

Содержание эндогенного ДОФА в мозге крыс линии

использовали в опыте.

Вистар в коре повышается: 0,56 в контроле, 0,60 при введе-

Крыс декапитировали под легким эфирным наркозом

нии препарата, это нарастание недостоверно (р>0,05) и

(все процедуры проходили согласно требованиям, предъяв-

составляет 107% от контроля, принятого за 100%; в хвоста-

ляемым к работе с животными); мозг извлекали на холоде и

том ядре мозга этот показатель более выражен: 0,33 в кон-

промывали в 0,32 М сахарозы. Ткань мозга из области мо-

троле, 0,49 в опыте, нарастание содержания ДОФА стати-

торной коры и хвостатого ядра гомогенизировали при 4° С

стически достоверно (р<0,05) и составляет 126% от контро-

в среде выделения (0,32М сахароза; 0,001М ЭДТА; 0,01М

ля (см. рисунок).

Трис-HCl буфер рН 7,4). Из 10% гомогената методом диф-

Активность МАО Б в обоих исследованных образова-

ференциального центрифугирования по Бизольду [2] уда-

ниях мозга крыс линии Вистар статистически достоверно

ляли фракции ядер при 1000Чg (10 мин) и изолировали суб-

(р<0,05) нарастает: в коре с 0,36 до 0,41 (113,9% от контро-

клеточные фракции при 10 000Чg (20 мин) для определе-

ля); в хвостатом ядре с 0,33 до 0,49 (148,5% от контроля).

ния активности моноаминоксидаз (МАО Б) при 20 000Чg

Эти данные свидетельствуют о повышенной утилизации

(15 мин), определения тирозингидроксилазы (ТирГД) и

медиатора под влиянием экзогенного ДОФА.

содержания ДОФА. Белок фракций определяли по методу

У крыс линии Август в тех же условиях эксперимента

Лоури и выражали в мг/г ткани.

все показатели активности исследуемых ферментов в мозге

Активность ТирГД определяли спектрофотометрическим

менее выражены. Как видно из таблицы, активность ТирГД

методом по Минеевой-Вялых [13]. В качестве субстрата ис-

практически не меняется в коре: 1,06 — контроль, 1,14 —

пользовали раствор L-тирозина. Об активности судили по

опыт и хвостатом ядре: 1,93 — контроль, 2,01 — опыт, что

приросту оптической плотности при 335 нм. Ферментатив-

составляет 107,5 и 104,0% соответственно (см. рисунок).

Содержание эндогенного ДОФА при введении мадопа-

ра-125 также сохраняется нормальным: в коре: 0,62 — кон-

троль, 0,60 — опыт; в хвостатом ядре: 0,48 — контроль,

© Е.Л. Доведова, 2008

0,51— îïûò.

В отношении МАО Б в мозге крыс линии Август на-

Zh Nevrol Psikhiatr Im SS Korsakova 2008;108:9:73—75

блюдается тенденция (р>0,05) нарастания активности фер-

ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 9, 2008

73

Содержание и активность (в

E335/мг белка/60 мин) изученных

ферментов в коре

головного мозга и хвостатом ядре

у крыс линий Вистар и Август

Структура

ТирГД

ÄÎÔÀ

ÌÀÎ Á

Линия Вистар

Kîðà

1-ÿ

1,46±0,23

0,56±0,18

0,36±0,05

2-ÿ

1,32±0,19

0,60±0,16

0,41±0,10

Хвостатое ядро

1-ÿ

1,88±0,25

0,47±0,10

0,33±0,07

2-ÿ

1,31±0,16

0,60±0,15

0,49±0,04

Линия Август

Kîðà

1-ÿ

1,06±0,14

0,62±0,13

0,42±0,07

2-ÿ

1,14±0,13

0,60±0,05

0,45±0,11

Хвостатое ядро

1-ÿ

1,93±0,30

0,48±0,10

0,34±0,06

2-ÿ

2,01±0,26

0,51±0,27

0,39±0,05

74

ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 9, 2008

ВЛИЯНИЕ ДОФА НА МОЗГ

казано, что краткосрочная нагрузка мадопаром приводит к

дофаминергической системы индивидуальны и неодинако-

нарушению поведения интактных животных, выражающе-

вы в исследуемых образованиях мозга; в хвостатом ядре эти

муся в угнетении исследовательской и эмоционально-пове-

изменения более выражены.

денческой активности [4].

В работе показаны различия реакции крыс линий Вис-

Обнаруженные нами отличия в реакции показателей

тар и Август на воздействие экзогенным ДОФА. Незначи-

метаболизма ДА на введение экзогенного ДОФА у крыс раз-

тельные изменения ферментативных систем в мозге крыс

ных линий согласуются с имеющимися в литературе сведе-

линии Август свидетельствуют об их метаболической слабо-

ниями об индивидуальных особенностях ответа моноами-

ñòè.

нергических систем на стресс, выявленных как у живот-

Таким образом, выявлена определенная корреляция

ных, так и у людей [8].

между интенсивностью метаболизма ДА по активности фер-

По клиническим данным, гиперактивность дофамино-

ментов синтеза и утилизации этого медиатора при нагрузке

вой передачи при введении L-ДОФА в свою очередь спо-

экзогенным ДОФА и уровнем поведенческих реакций у раз-

собствует развитию поздней дискинезии, которую можно

личных линий крыс, что, по-видимому, является отраже-

устранить веществами (резерпин), истощающими запас пре-

нием пластических перестроек мозга в ответ на внешние

синаптического медиатора или приводящими к блокаде син-

воздействия и обусловлено структурно-функциональными

теза ДА [1]. Наблюдаемые сдвиги в активности показателей

особенностями ЦНС.

ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 9, 2008

75