- •Методические рекомендации для студентов
- •9.Учебно-материальное обеспечение:
- •Возбудители респираторных вирусных инфекций
- •Правила сбора материала для вирусологических, иммунологических исследований
- •Дифференциация клещевого весенне-летнего и комариного летне-осеннего энцефалитов.
- •Общая схема лабораторной диагностики клещевого и комариного энцефалитов.
- •Методы исследования:
- •Методы окраски мазков из разного материала.
- •Вирусологическое исследование:
- •Иммунологические методы диагностики:
- •Основные данные изученных прионозов.
Дифференциация клещевого весенне-летнего и комариного летне-осеннего энцефалитов.
|
Отличительные признаки |
Клещевой (дальневосточный) энцефалит |
Комариный (японский) энцефалит |
|
Сезон |
Весенне-летний |
Летне-осенний |
|
Географическое название |
Дальневосточный |
Японский |
|
Источник и естественный хозяин |
Дикие животные, грызуны, птицы |
Крупные домашние животные, человек |
|
Переносчик |
Клещ-Yxodes persulcatus |
Комар - |
|
Возбудитель |
Вирус клещевого энцефалита |
Вирус комариного энцефалита. |
|
Клиника |
Острое начало, t0, гол. боль, гиперестезия, параличи шейно-плечевого пояса. |
Менингит, судороги, нарушение глотания , психические нарушения ,потеря сознания |
|
Инкубация |
10-15 дней |
15-20 дней |
|
Остр. период |
5-12 дней |
5-10 дней |
|
Исходы |
Реконвалесценция, смерть, инвалидизация, прогредиент.
|
Реконвалесценция |
|
Иммунитет |
кратковременный |
Пожизненный |
|
Летальность |
до 30% |
60-70% |
|
Инвалидизация |
часто |
|
|
Специфическая профилактика |
Вакцинаца , иммунной сывороткой. |
Форм. вакц. |
Приложение 4.
Общая схема лабораторной диагностики клещевого и комариного энцефалитов.
Материал:кровь, спинномозговая жидкость, секционный материал (мозг).
Овокультура – заражение куриных эмбрионов:
8-9-дневных - в желудочный мешок;
10-12-дневных - на хорионаллантоисную оболочку;
инкубация 72 часа при +370С.
Биопроба на мышах – сочетанное заражение белых мышей 0,03 мл в мозг и 0,25 мл внутрибрюшинно:
визуальный контроль за состоянием животных;
смерть животных;
вскрытие, вирусоскопия.
Заражение культуры клеток:
почек эмбриона (ПЭ);
фибробластов куриных эмбрионов (КЭ);
почек свиньи СПЭВ;
почек сирийского хомяка (ВНК);
контроль ЦПЭ, цветной пробы, их нейтрализации.
внутриклеточные включения.
Идентификация выделенного вируса: ПЦР, ИФА, РИФ, РНИФ, а также
4.1 Положительная реакция гемагглютинации (РГА) с алантоисной жидкостью – индикатор наличия вируса.
4.2 Ежедневное наблюдение за животными в положительных случаях отмечает:
повышение чувствительности к внешним раздражителям;
параличи, конвульсии;
часто уже в первые сутки животные гибнут.
4.3 Активно размножающиеся вирусы стимулируют продукцию интерферона, препятствующего развитию ЦПД. При его отсутствии:
иногда на 4-6 день появляется круглоклеточная дегенерация (ЦПД)
положительная РГА с культуральной жидкостью
положительная РИФ (через 24 – 48 часов).
4.4 Используя типоспецифические эталонные иммунные сыворотки, можно поставить РТГА.
4.5 Можно поставить с вирусным антигеном-взвесью из мозга зараженных мышей и известной иммунной сывороткой;
РТГА;
РСК, РТСК;
Реакция нейтрализации (на мышах, в культуре клеток).
4.6 С культуральной жидкостью и иммунными сыворотками выполняют:
РТГА;
РСК, РТСК;
Реакция нейтрализации (на мышах, в культуре клеток).
Для ретроспективной диагностики используют эталонные антигены, которые готовят из мозга мышей (лучше новорожденных), зараженных вирусом энцефалита интрацеребрально. Музейные штаммы вирусов сохраняют в замороженном виде, а перед изготовлением антигена проводят в 1-2 пассажа на мышах. С указанным препаратом и сыворотками больных, реконвалесцентов выполняют РСК, РНГА, РТГА.
диагностика клещевого энцефалита (переносчик):
- вначале изучают клеща на наличие в нем вируса- используется ПЦР или ИФА в модификации поиска антигена вируса,
- в конце первой недели инфицирования в организме появляются иммуноглобулины класса М, позже – иммуноглобулины класса G. Методом ИФА определяют наличие антител, что говорит о развитии заболевания у инфицированного.
Приложение 5
Схема лабораторной диагностики бешенства.
Прижизненных методов диагностики бешенства у человека и животных, кроме клинического и опосредованного эпидемиологического, пока нет.
Материал для посмертного исследования:
Головной мозг (срезы, эмульсия ) погибших больных и животных, покусавших или ослюнивших человека;
подчелюстные, слюнные железы, слюна;
спинно–мозговая жидкость.