Биохимическая активность:

- H₂S + Глюкоза - Среда Симонса ± Орнитин

+ мочевина ± п/ж агар ± Ацетат + Среда Кларка

- лактоза ± Индол - Лизин - Сорбит

_______________________________ Скошенный агар

а) _____ _______________________

Ра ра с о-анти Бактерио

сыворотками скопия

Чувствительность Синтез Определение

к антибиотикам бактериоцинов фаговара

Дополнительные тесты: (биохимические)

__________________________________________________________________

+ Маннит ± Адонит + Эскулин + Мальтоза

± Инозит ± Целлобиоза + Трегалоза - Дульцит

- Твин-80 ± Рамноза ± Цитрат Na с глюк. - Биовары

- Фенилаланин - Аргинин + β-галактозидаза

- Малонат ± Сахароза - Арабиноза

Примечание: скорость роста иерсиний замедлена, учет проводят ежесуточно в течение 2 – 4 дней.

Несмотря на то, что возбудитель псевдотуберкулеза неприхотлив к питательным средам, его далеко не всегда можно высеять. Это объясняется не только замедленным ростом этого микроба на питательной среде, а тем, что в исследуемом материале он находится в весьма незначительном количестве при огромном числе микробов из нормальной микрофлоры кишечника, которые его подавляют.

В 1963 году Peterson и Coon предложили использовать для накопления псевдотуберкулезного микроба фосфатно-буферный раствор с инкубацией посевов не при + 37^оС, а при температуре холодильника (+ 4^оС).

В 1969 году Г.Д. Серов создал специальную ДДС № 67 с ингредиентами 3 групп:

1. индикаторная (конго красный, мочевина);

2. ингибиторная (генциановый фиолетовый и желчь);

3. стимуляторы роста (питательный агар, глюкоза и молибденово-кислый аммоний).

На этой среде через 28 – 36 часов инкубации при + 37оС вырастают колонии псевдотуберкулезного микроба двух типов.

Гладкие – S – это мелкие круглые колонии со слегка выпуклым центром. В проходящем свете виден темно-красный центр с радиальной и конусовидной исчерченностью.

Колонии R – формы шероховатые, крупные (4,5 – 5 мм), более плоские, неправильной формы, с неровными краями, центр их пигментирован и слегка выпуклые, поверхность зернистая, края фестончатые. Колонии обоих типов имеют суховатую, матовую поверхность с перламутровым блеском, сдвигающиеся по поверхности агара при снятии петлей. При обильном росте колоний появляется аммиачный запах.

Преимущество этой среды- невозможность спутать колонии псевдотуберкулезного микроба с другими видами микробов.

Псевдотуберкулезный микроб можно выделить и на других средах:

обычном МПА, МПА с генциановым фиолетовым и кровью, Эндо, Левина и др. Но лучшей является ДДС № 67 Серова.

Приложение 4

Питательные среды для иерсиний

1. Среда Клиглера содержит три сахара: глюкозу, сахарозу, лактозу, МПА, индикатор-феноловый красный.

2. Среда Эндо – МПА, глюкоза, лактоза, индикатор – фуксин.

3. Среда Левина – МПА, лактоза, индикатор – эозин с метиленовым синим.

4. Среда Серова Г.Д. – глюкоза, мочевина, желчь, конго красный, генциановый фиолетовый, МПА, молибденовокислый аммоний.

5. Среда обогащения – фосфатно-буферный раствор.

6. Реакция Фогес-Проскауэра – В среду Кларка засевают культуру, затем добавляют креатинин / альфа-нафтол с КОН/ В положительном случае бульон окрашивается в розовый цвет.

7. Среда Кларка – МПБ, 1% глюкозы, К₂НРО₄.

8. Среда Бессоновой жидкая голодная с рамнозой.

9. Среда Бессоновой плотная – 3% голоднокислый агар.

10. Среда Туманского-Коробковой с рамнозой.