Дифференциация видов стафилококков, выделенных от человека

Тест Вид стафилококка	Коагуляция плазмы	Продукция ДНК-азы	Продукция фосфатазы	гемолитическая активность	Расщепление маннитав анаэробных условиях	Расщепление маннитав аэробных условиях	Устойчивость к новобиоцину
St.aureus	+	+	+	+	+	+	–
St.epidermidis	–	–	+	–	–	–	–
St.saprophyticus	–	–	–	–	–	+	+
St.intermedius	+	+	?	+	–	+	–

Примечание: (+) – наличие ферментации, устойчивости, (–) –отсутствие ферментации, устойчивости

Следующим этапом исследования является видовая идентификация стафилококков, позволяющая дифференцировать St.aureus от коагулазоотрицательных видов (табл.9). Ориентировочные данные об отношении культуры к St.aureus получают при изучении характера роста на ЖСА (наличие пигмента и лецитиназная активность) (табл.10), но для окончательной идентификации изучают и другие признаки. Основным признаком, определяющим патогенность стафилококка, является способность микроба коагулировать плазму кролика или человека. Коагулазоположительные стафилококки должны рассматриваться как потенциально патогенные, независимо от наличия или отсутствия у них гемолитических свойств и характера пигмента, их проверяют на чувствительность к антибиотикам.

Если выделенную культуру идентифицировать не удается или из патологического очага выделены коагулазоотрицательные стафилококки в монокультуре, у них изучают дополнительные признаки патогенности: дезоксирибонуклеазную, гиалуронидазную активность, продукцию фибринолизина, гемолизина, а также способность ферментировать маннит в анаэробных условиях. После оценки всех тестов и совокупности положительных признаков делают вывод о принадлежности культуры к виду St.aureus.

Если же установлено, что выделенная культура не относится к St.aureus, проводят ее идентификацию, определяют принадлежность к видам St.epidermidis и St.saprophyticus. Для этого изучают устойчивость к новобиоцину, наличие фосфатазы и способность окислять маннит.

При эпидемиологическом обследовании в случае “госпитальных” или пищевых инфекций проводят фаготипирование выявленных культур патогенных стафилококков для подтверждения идентичности штаммов, выделенных от разных больных, предполагаемых источников инфекции и из объектов внешней среды. Для фаготипирования используют международный набор стафилофагов.

Исследование крови.

Исследование крови проводят при подозрении на сепсис. У больного асептично из локтевой вены берут кровь в объеме 10–12 мл и засевают в колбу со 100 мл сахарного бульона или в среду Китта-Тароцци. Посевы инкубируют в термостате 10 суток, производя через 2–3 дня высевы на кровяной и желточно-солевой агары для выделения чистой культуры, которую изучают и идентифицируют также, как культуры, выделенные из гноя.

7. Оценить результаты бактериологического исследования на резидентное носительство стафилококков у обследуемых по таблице 11 (оформить протокол, сделать заключение)

Таблица 11

Обследуемые	Свойство стафилококков
	Коагулаза	Лецитиназа	Антилизоцимная активность
А	+	+	3 мкг/мл
В	-	+	-

8. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения стафилококковых инфекций (записать в тетрадь)

Стафилококковый анатоксин. Нативный стафилококковый анатоксин является стерильным фильтратом бульонной культуры стафилококка, содержащим стафилококковый токсин, обезвреженный формалином и теплом. Используется для создания антитоксического иммунитета. Очищенный адсорбированный стафилококковый анатоксин получают из нативного путем осаждения его трихлоруксусной кислотой с дополнительной очисткой этиловым спиртом. Препарат обладает высокими иммуногенными свойствами, он стимулирует образование антитоксина, способного нейтрализовать стафилококковый токсин. Стафилококковый анатоксин применяют с целью активной иммунизации против стафилококковых инфекций: стафилодермии, послеродовых маститов, рецидивирующего фурункулеза. Для снижения заболеваемости детей первых месяцев жизни стафилококковыми инфекциями проводят иммунизацию беременных женщин. При этом у женщины возникает активный, а у ребенка – пассивный иммунитет.

Стафилококковая вакцина. Стафилококковая вакцина представляет собой взвесь стафилококков в физиологическом растворе, инактивированных нагреванием. Вакцину готовят из 10–12 коагулазоположительных культур стафилококков, выделенных от больных со стафилококковыми поражениями кожи.

Активность вакцины связана с антигенами, входящими в состав микробных клеток. Вакцинация повышает защитные силы организма, активируя фагоцитарные свойства лейкоцитов и макрофагов, стимулирует накопление комплементфиксирующих веществ, агглютининов. Вакцину применяют для специфического лечения взрослых больных при различных стафилококковых заболеваниях.

Стафилококковый антифагин. Стафилококковый антифагин представляет собой стерильный экстракт, полученный из 10–12 культур золотистых и белых стафилококков, выделенных от больных с гнойничковыми поражениями кожи. Вакцина содержит термостабильный стафилококковый антиген, способный стимулировать защитные реакции организма: увеличивается число лейкоцитов, усиливается их фагоцитарная активность, что проявляется не только в поглощении стафилококков, но и способности разрушать их, нарастает титр агглютининов. Антифагин применяют для специфического лечения взрослых и детей с гнойничковыми заболеваниями стафилококковой этиологии.

Антистафилококковая плазма. Антистафилококковая плазма представляет собой жидкую часть крови людей, содержащей стафилококковый антитоксин. Получают ее из крови доноров, иммунизированных адсорбированным стафилококковым антитоксином. Антистафилококковая плазма используется для лечения детей и взрослых, страдающих заболеваниями стафилококковой природы: сепсисом, остеомиелитом, септикопиемией, пневмонией, стафилодермией и другими локальными гнойными заболеваниями.

Иммуноглобулин противостафилококковый. Иммуноглобулин противостафилококковый представляет собой препарат гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови, содержащей повышенные концентрации стафилококкового антитоксина. Получают его из крови доноров, иммунизированных стафилококковым адсорбированным анатоксином, и плацентарной крови родильниц. Противостафилококковый иммуноглобулин используют для специфического лечения стафилококковых инфекций. Иммунотерапия тем эффективнее, чем раньше она начата.

Стафилококковый бактериофаг. Стафилококковый бактериофаг представляет собой фильтрат фаголизата стафилококков. При получении стафилококкового фага используют естественные фаги, выделенные из гнойных очагов у больных, почвы или сточных вод. Лизирующая активность стафилококкового бактериофага связана с вирулентным фагом, содержащимся в фаголизате. Стафилококковый фаг применяют для лечения стафилококковых заболеваний, как местно, в очаге инфекции, так и парентерально. Одним из условий успешного применения является введение его после определения чувствительности к нему стафилококков, выделенных от больного.

ЗАНЯТИЕ 8

ТЕМА. Стрептококки. Streptococcus. Streptococcus pyogenes. Морфология, биология, культуральные свойства, современная классификация. Стрептококковые инфекции. Роль стрептококков в этиологии скарлатины и ревматизма. Лабораторный диагноз стрептококковых инфекций. Str.pneumoniae. Морфология, биология, культуральные свойства. Роль пневмококков в патологии. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых пневмококками.

Цель занятия. Ознакомить с характеристикой стрептококков, рассмотреть схему лабораторного диагноза. Рассмотреть основные свойства пневмококков, их роль в патологии, ознакомить с методами микробиологической диагностики, рассмотреть этапы лабораторной диагностики пневмонии