- •Бактериоскопия
- •Бактериология
- •Серодиагностика
- •Бактериоскопия
- •Бактериология
- •Серодиагностика
- •Возбудитель дифтерии Культуральные свойства
- •Серодиагностика дифтерии
- •1. Рпга
- •Принципиальная схема лабораторной диагностики возбудителя дифтерии
- •Культуральные свойства возбудителей туберкулеза
- •Серодиагностика
- •Принципиальная схема бактериологического выделения возбудителя туберкулеза
Возбудитель дифтерии Культуральные свойства
Наиболее характерные колонии на среде Клауберга II с добавлением теллурита калия или натрия (элективная среда для выращивания С. diphtheriae). Они вырастают в виде почти черных колоний, выделяющихся на красном фоне среды. Цвет колоний обусловлен способностью С. diphtheriae в процессе роста восстанавливать теллуристый калий до элементарного теллура.
Микробы дифтерии не являются однородными по своим культурально-биохимическим свойствам и подразделяются на биовары gravis, mitis и intermedius. На среде Клауберга II через 48 часов бактерии биовара gravis вырастают в виде круглых (d=1,5-2 мм) колоний с неровными краями, часто имеют приподнятый центр и радиальную исчерченность. Колонии серовато-черного цвета, напоминают маргаритки. Вариант mitis дает круглые выпуклые колонии черного цвета (d=1-1,5 мм) с ровными краями. Вариант intermedius занимает промежуточное положение. Дает черные выпуклые с блестящей поверхностью колонии.
Серодиагностика дифтерии
Антитела к С. diphtheriae определяют в крови больных, начиная с первых дней болезни и повторно через 10-14 дней. Обязательным условием является определение специфических антител в динамике болезни в парных сыворотках. Диагностическое значение имеют результаты серологических исследований при нарастании титра антител не менее чем в 3-4 раза.
Для определения уровня дифтерийного антитоксина в сыворотке человека применяют несколько реакций:
1. Рпга
РПГА – двухкомпонентная реакция, предполагающая взаимодействие диагностикума эритроцитарного дифтерийного антигенного (представляет собой эритроциты с адсорбированным на них дифтерийным анатоксином) и антитоксических противодифтерийных антител, находящихся в сыворотке крови обследуемых. При наличии в исследуемой сыворотке антитоксина образуется специфический комплекс: антитоксин + сенсибилизированные анатоксином эритроциты. В результате формируется осадок в виде агглютината эритроцитов.
В нашей стране РПГА рекомендована в качестве основного метода для определения напряженности антитоксического иммунитета к С. diphtheriae, а также для оценки вакцинального иммунитета.
Оценка состояния коллективного иммунитета требует более детальной характеристики, чем только установление процента серонегативных людей. Для этого следует давать развернутые по каждому титру данные в РНГА т.е. с учетом степени напряженности. Отсутствие антител является безусловным показателем незащищенности; титры 1:10 и 1:20 можно считать индикатором пограничного иммунитета, не обеспечивающего безусловной защиты; однако заболевание при этом, как правило, протекает в легкой форме без летального исхода. Титры 1:80 и выше являются показателем защищенности группы.
Таким образом, процентное распределение показателей титров в каждом разведении дает качественную характеристику состояния иммунитета к дифтерии в обследованной группе. Например, выявление у 50% обследованных показателей пограничного иммунитета (титры 1:10, 1:20) свидетельствует о слабой защищенности группы, в которой с годами будет увеличиваться число лиц, не защищенных от дифтерии.
В настоящее время приняты следующие количественные критерии, характеризующие степень восприимчивости к дифтерии в зависимости от уровней антитоксических антител.
Содержание антитоксических антител |
Интерпретация результатов |
< 0,01 МЕ/мл |
обследуемый восприимчив к дифтерии |
0,01 МЕ/мл |
минимальный уровень циркулирующих антител, обеспечивающий некоторую степень защиты |
0,01-0,09 МЕ/мл |
уровни циркулирующих антитоксических антител, обеспечивающие некоторую степень защиты |
0,1 МЕ/мл |
защитный уровень циркулирующих антител |
> 1,0 МЕ/мл |
уровень антитоксина, обеспечивающий стойкую длительную невосприимчивость к дифтерии |