ЗАНЯТИЕ № 2.2.2.
КРОВЯНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТОВ В, С, D И ВИЧ-ИНФЕКЦИИ. ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
Изучить биологические свойства возбудителей гепатитов В, С, D и
ВИЧ-инфекции.
Изучить принципы вирусологической диагностики гепатитов В, С, D и СПИДа.
Научиться подбирать антимикробные препараты для идентификации,
лечения и профилактики гепатитов В, С, D И ВИЧ-инфекции.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Характеристику биологических свойств возбудителей.
Основные симптомы заболеваний, вызываемых вирусами гепатитов В, С, Д и ВИЧ.
Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость, иммунитет, механизм
передачи инфекций.
Принципы лабораторной диагностики гепатитов В, С, Д, и ВИЧ.
Основы профилактики гепатитов и ВИЧ. Препараты для диагностики,
лечения и профилактики.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
составлять алгоритм лабораторного обследования больного гепатитом;
проводить учет и интерпретировать результаты вирусологических исследований с целью диагностики гепатитов и ВИЧ;
классифицировать препараты в соответствии с их назначением.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:
алгоритмом лабораторной диагностики инфекционных болезней; методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителей гепатитов В, С, D, ВИЧ-инфекции.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Работа № 1. Строение вируса гепатита В, С, D, ВИЧ
Цель: изучить морфологию вирусов гепатитов В, С, Д, ВИЧ.
Самостоятельная работа: зарисовать строение возбудителей. Сделать вывод.
В С D ВИЧ
Вывод:
1._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
2._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
3._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
4._________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Cерологические маркеры при вирусных гепатитах
См. теоретическую справку
Работа № 2. Серологическая диагностика гепатитов
Цель: изучить методы диагностики гепатитов В, С, D.
Самостоятельная работа: учесть результат постановки реакции непрямой гемагглютинации с парными сыворотками больного с подозрением на вирусный гепатит В. В качестве диагностикума использовали эритроцитарный HBs-Ag. Определить клиническую стадию болезни.
Направление:__________________________________________________________________
Ингредиенты:
1._____________________________________________________________________________ 2._____________________________________________________________________________3._____________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Титры 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 КС КД
1-ая неделя
2-ая неделя
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:________________________________________________________________________
Б) Самостоятельная работа: определить форму течения гепатита В. Решить ситуационные задачи.
Задача 1
В клинику поступил больной с циррозом печени. У больного взята кровь на выявление НВе-Ag и HBs-Ag. Поставлена реакция ИФА. Учесть готовый результат. Сделать вывод: при какой форме заболевания выявляются НВе-Ag и HBs-Ag.
Направление:__________________________________________________________________
Ингредиенты:
1._____________________________________________________________________________2._____________________________________________________________________________3._____________________________________________________________________________
4._____________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Опыт Негативный контроль Позитивный контроль
|
HBs-Ag
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
НВе-Ag
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат:____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:_______________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Задача 2
В клинику поступил больной с подозрением на гепатит В. У больного взята кровь для выявления НВs Аg, Ig М и IgG к НВс Аg вируса гепатита В. Поставлена реакция ИФА. Учесть готовый результат. Сделать вывод о стадии заболевания.
Направление:__________________________________________________________________
Ингредиенты:
1._____________________________________________________________________________2._____________________________________________________________________________3._____________________________________________________________________________
4._____________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Опыт Негативный контроль Позитивный контроль
|
IgM к HBс-Ag |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IgG к НВс-Ag
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:_______________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Принципиальная схема лабораторной диагностики ВИЧ инфекции
Цель: Составить алгоритм диагностики гриппа (направления и этапы диагностики).
См. теоретическую справку
Исследуемый
материал:
____________________
Работа № 4. Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции
Цель: изучить методы диагностики ВИЧ инфекции.
А) Самостоятельная работа: учесть готовый результат реакции ИФА, поставленной с целью выявления специфических антител к gр 120 и gр 41 для выявления антител в крови обследуемого, с подозрением на инфицирование ВИЧ. Сделать вывод о наличии инфицирования.
Направление:__________________________________________________________________
Ингредиенты:
1._____________________________________________________________________________2._____________________________________________________________________________3._____________________________________________________________________________
4._____________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Опыт Негативный контроль Позитивный контроль
gр 120
gр 41
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б) Самостоятельная работа: составить план дальнейших лабораторных исследований. Начертить принципиальную схему выявления антигенов ВИЧ с помощью иммуноблоттинга.
Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции. Антиген возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антигена. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от не связавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс (Аг+Ат больного + Ат против Ig человека) выявляют добавлением субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.
промыли промыли
*
+ + +субстрат
Ат АГС
Инфицирован Носитель СПИД
Работа № 5. Иммунологическая лабораторная диагностика СПИДа
1. Цель: определить процент выживаемости больных СПИДом если количество Т-хелперов в 1 мл крови составляет 150.
Вывод:________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
2. Цель: определить тяжесть течения заболевания СПИДом у двух больных, если соотношение Th/Ts у одного больного равно 0,7, а у другого 0,3.
Вывод:________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
3. Цель: Определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. При обследовании группы риска выявлен здоровый пациент, у которого в крови
определились антитела к ВИЧ, а вирус выявить не удалось. Соотношение Th/Ts равно 2,0,
содержание Т-хелперов в одном мл крови составляет 800.
Вывод:________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
4. Цель: Определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. Больной обратился с жалобами на длительную субфебрильную температуру, упорный кашель, потерю в весе тела, понос. При вирусологическом обследовании из крови больного выделен ВИЧ и антитела к ВИЧ. Соотношение Th/Ts равно 0,8,
количество Th в 1мл крови составило 400.
Вывод:________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
5. Цель: Определить стадию инфекционного заболевания и характер инфекционного процесса. Больной с заболеванием саркомой Капоши обследовали на наличие СПИДа. В крови выявлен и вирус и антитела к ВИЧ. Количество Т-хелперов составило 80 на 1 мл крови, а соотношение Th/Ts равно 0.15.
Вывод:________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
Подпись преподавателя___________________________________________________
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТА ВО ВНЕУРОЧНОЕ ВРЕМЯ
Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).