- •Частная микробиология
- •Противомикробные мероприятия.
- •Стерилизация
- •Дезинфекция
- •Антисептика
- •Асептика
- •Классификация питательных сред
- •Культуральный метод исследования
- •Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •Микроорганизмов к воздействию внешних факторов.
- •Ферменты-токсины
- •Оксидо-редуктазы
- •Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •Метод серийного разведения антибиотик в бульоне
- •Ускоренные методы
- •Методы генетического анализа микроорганизмов
- •Методы изучения нормальной микрофлоры
- •Диагностика брюшного тифа, паратифов а и в сальмонеллезов.
- •Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза
- •IV этап - Учет результатов и выдача окончательного ответа.
- •Оценка результатов
- •Лабораторная диагностика газовой гангрены
- •Бактериологический метод исследования.
- •Биологический метод исследования.
- •Лабораторная диагностика ботулизма
- •Диагностика столбняка
- •Лабораторная диагностика холеры
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Лабораторная диагностика хламидиозов
- •Лабораторная диагностика
- •1. Бактериоскопический метод - выявление хламидий, их морфологических структур и антигенов в пораженных клетках (клиническом материале).
- •Микоплазмы. Микоплазмозы
- •Выделение вирусов и методы их индикации
- •Принципы диагностики вирусных инфекций
- •Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •Лабораторная диагностика спида
- •Возбудители мадуромикоза
- •Возбудитель пневмоцистоза
- •Возбудитель донованоза
- •Возбудитель язвы бурули
- •Возбудитель мелиоидоза
Оценка результатов
Выделение из материалов сальмонелл, шигелл, энтеропатогенных кишечных палочек, иерсиний или других облигатно-патогенных микробов, независимо от количества, подтверждают соответствующее заболевание или носительство.
Для оценки этиологической роли УПМ главным критерием является количественный. Этиологически значимым является присутствие в материалах от больных и пищевых продуктах микробов в большом количестве (10 -10 и более КОЕ в 1 г). При пищевых отравлениях диагноз становится более достоверным при одновременном обнаружении тех же микробов в больших количествах в пищевых продуктах, явившихся причиной заболевания. Этиологическую роль микроба подтверждает его повторное выделение из материала больного, идентичность штаммов возбудителя (по фаго- и сероварам) у большого числа больных при групповом пищевом отравлении, а также нарастание титра антител в динамике болезни.
Для диагностики пищевых токсикозов используют методы обнаружения в материалах от больных (рвотных массах, промывных водах), в пищевых продуктах экзотоксинов микробов. При ботулизме с этой целью применяют биологическую пробу нейтрализации на белых мышах с антисыворотками к ботулотоксинам различных типов (А,В,Е), чаще встречающихся в умеренных широтах. При стафилококковом токсикозе используют РПГА с эритроцитами, обработанными содержащими экзотоксин материалами и типовыми стафилококковыми антисыворотками. Применяется также реакция иммунопреципитации экстрагированного из материала токсина (солевой экстракт, очищенный и концентрированный диализом) со стандартными типовыми антисыворотками.
К Л Е Б С И Е Л Л Ы.
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА СКЛЕРОМЫ И ОЗЕНЫ.
Бактерии рода Klebsiella (капсульные бактерии) включают в семейство Enterobacteriaceae. K. scleromatis является возбудителем склеромы, K. ozaenae - возбудитель озены, K. pneumoniae способен при определенных условиях вызывать у человека сепсис, воспаление легких, острые кишечные заболевания, пиелонефрит, цистит, перитонит, менингит и др.
Клебсиеллы - это палочки длиной 1-5 мкм, эллипсоидные, неподвижные, без спор, капсула является у них постоянной структурой. Они растут на плотных средах в виде блестящих, влажных, серовато-белых колоний с перламутровым оттенком, слизистой консистенции. В бульоне - диффузное помутнение, иногда слизистое кольцо на поверхности. У клебсиелл слабо выражены протеолитические свойства и относительно хорошо гликолитические.
ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ КЛЕБСИЕЛЛ.
|
КЛЕБСИЕЛЛА |
|
|
|
|
|
|
К.СКЛЕРОМЫ |
К. ОЗЕНЫ |
К.ПНЕВМОНИИ |
|
|
ПРИЗНАКИ |
|
|
|
|
|
1 |
2 |
3 |
4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
ГЛЮКОЗА С ГАЗОМ |
- |
+/- |
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ЛАКТОЗА |
- |
+/- |
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
САХАРОЗА (4 СУТОК) |
+ |
+/- |
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ЦИТРАТ АММОНИЯ |
- |
+/- |
+ |
|
|
(СРЕДА СИММОНСА) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
МОЧЕВИНА |
- |
-/+ |
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
МАЛОНАТ НАТРИЯ |
+ |
- |
+ |
|
|
|
|
|
|
|
Клебсиеллы содержат К - капсульный, О - соматический, СА - общий для энтеробактерий антиген. Род разделяется на 80 серологических вариантов. У клебсиелл склеромы обнаружен только один К3-антиген, идентичный с К-антигеном клебсиеллы пневмонии 3-го типа. У К.озены - К4, К5, либо К6-антигены. Клебсиеллы пневмонии - К-антигены 1-3 и 7-80. Известно 5 О-антигенов. К. склеромы имеют антиген О2А, К. озены - О2В, К. пневмонии -
О-антигены 1, 3, 4, 5.
Питательные среды:
1) Дифференциально-диагностическая среда - ЛБТА (лактозо-бромтимоловый агар). Содержит МПА+лактоза+бромтимоловый синий. К. склеромы, не разлагающая лактозу, дает колонии цвета среды, К. пневмонии - желтые, К. озены - либо желтые, либо цвета среды.
-
Модифицированная среда Ресселя кроме глюкозы (в столбике) и лактозы (в скосе) содержит индикатор бромтимоловый синий, Соль Мора и гипосульфит (на H 42 0S). К. склеромы дают пожелтение только столбика, К. пневмонии - пожелтение и разрыв всей среды, К. озены - различные варианты.
-
Среда Симмонса для утилизации цитрата натрия (индикатор бромтимоловый синий). В положительных случаях появляется рост и среда синеет, в отрицательных случаях роста нет и среда не изменяется.
4) Среда с малонатом натрия (индикатор бромтимоловый синий). При утилизации малоната - среда интенсивно синего цвета, отрицательная реакция - среда желтая.
Лабораторная диагностика проводится 2 методами: бактериологический и серологический.
Бактериологическая диагностика: материалом для исследования служит содержимое носа, глотки, носоглотки.
I этап. Посев материала петлей или тампоном на ЛБТА либо на пенициллиновый агар.
II этап. а) Учет роста колонии клебсиелл - крупные, выпуклые, влажные, блестящие. На ЛБТА цвет колоний зависит от вида клебсиелл.
б) Посев колоний на модифицированную среду Ресселя или косой агар.
III этап. Идентификация выделенной культуры. а) мазок по Граму; б) препарат по Гинса-Бурри; в) определение биохимических свойств (см. таблицу); г) определение антигенной формулы с помощью клебсиеллезных сывороток О и К (р. агглютинации на стекле, р. агглютинации в пробирках, РИФ)
Серологическая диагностика. Используют РСК и РПГА со склеромным и озенозным диагностикумами.