5Этап.Идентификация (серотипирование) вируса в рн.
Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток: вирусосодержащий материал обрабатывают смесью диагностических сывороток, содержащих антитела к различным вирусам. По отсутствию ЦПД- нейтрализации определяют семейство, а затем и серотип вируса.
1. Рн с поливалентной сывороткой.
Исследуемый материал: вирусосодержащий материал Диагностический препарат: поливалентная диагностическая сыворотка, содержащая антитела к вирусу полиомиелита I, II и III серотипов
Дополнительные ингредиенты реакции: физиологический раствор, индикатор нейтральный красный
Реакция инкубируется в термостате в течение нескольких дней. Учет результатов проводится после появления ЦПД в «Контроле дозы вируса»
|
Результат |
Опыт (100 доз вируса +сыворотка + культура клеток) |
Контроль дозы вируса (100 доз вируса + культура клеток) |
Контроль культуры клеток |
|
ЦПД +/- |
|
|
|
Вывод: исследуемый материал содержит вирус полиомиелита.
2. Рн с моновалентными сыворотками.
|
Результат |
100 доз + моновалентные сыворотки (S) |
Контроль дозы вируса |
Контроль культуры клеток | ||
|
SI типа |
SII типа |
SIII типа | |||
|
ЦПД +/- |
|
|
|
|
|
Вывод: исследуемый материал содержит вирус полиомиелита I серотипа.
II. Серодиагностика исследование парных сывороток в рн бляшкообразования по Дюльбекко
Исследуемый материал: кровь (сыворотка) обследуемого Диагностический препарат: диагностикум из вирусов полиомиелита I, II и III серотипов Дополнительные ингредиенты реакции: физиологический раствор, индикатор нейтральный красный
1-я сыворотка
|
Серотип вируса |
Разведения сыворотки |
Контроли | ||||||
|
1/10 |
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
клеток |
вирусов |
сыворотки | |
|
Полиовирус I |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Полиовирус II |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Полиовирус III |
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат: титр антител к полиовирусу I типа = 1/20
2-я сыворотка
|
Серотип вируса |
Разведения сыворотки |
Контроли | ||||||
|
1/10 |
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
клеток |
вирусов |
сыворотки | |
|
ПолиовирусI |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ПолиовирусII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ПолиовирусIII |
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат: титр антител к полиовирусу I типа = 1/80
Вывод: Увеличение титра в четыре раза свидетельствует о заболевании полиомиелитом I типа .
Специфическая профилактика полиомиелита
Вакцина Солка инактивированная формалином трехвалентная вакцина (ИМОВАкс ПОЛИО Авентис Пастер про-во Франция) вводится внутримышечно, трехкратно
Вакцина Сэбина живая трехвалентная вакцина ( ПОЛИО СЕБИН ВЕРО Авентис Пастер про-во Франция) вводится через рот (капли), может давать осложнения – полиомиелит 1 случай на 106 ). Прививки с 3 месяцев.
РЕОВИРУСЫ
Состав семейства: 1) род: Reovirus - ОРВИ 2) род: Coltivirus включает большое количество вирусов патогенных для животных, у человека вызывают клещевую лихорадку колорадо. 3) Род Rotavirus – вирусные гастроэнтериты у детей 6-24 месяцев
Вирион ротавирусов имеет сферическую форму, нуклеокапсид состоит из двух слоев. Имеют вид колёс. Тип симметрии – кубический. Суперкапсид отсутствует. Геном вириона, представлен двунитевой фрагментированной РНК (11 фрагментов). Каждый фрагмент уникален и кодирует индивидуальный белок. В составе вириона имеется 8 белков (VP1-VP8). - VP7 является типоспецифическим протективным антигеном- VРЗ обладает гемагглютинирующим свойством, отвечает за проникновение вируса в клетку и его вирулентность . По белкам VP3 и VP7 ротавирусы делят на 4 серотипа.
Методы культивирования: Вирусы выделяют в культурах клеток, а также организме новорожденных мышей.
Наличие ЦПД (особенности):ЦПД в виде полной дегенерации клеток выявляется через 2-3 недели после заражения
Локализация в организме человека: Первичная репродукция ротавирусов происходит в цитоплазме энтероцитов двенадцатиперстной кишки. При этом микроворсинки щеточной каймы клеток укорачиваются, становятся неровными или полностью исчезают, в тяжелых случаях развиваются некротические изменения стенки кишечника. Нарушается процесс всасывания простых сахаров. Воспалительные явления усиливают перистальтику кишечника, что способствует развитию диарейного синдрома и появлению рвоты.
Источник инфекции: человек Пути передачи:фекально-оральный
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА АДЕНОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Простые вирусы, форма – икосаэдра (252 капсомера), диаметр 70 – 90 нм; от 12 вершин икосаэдра отходят фибры (нити). Двухцепочечная линейная ДНК, Источник инфекции - больной человек, в том числе со скрытой ее формой. Заражение происходит воздушно-капельным, контактно-бытовым путем, через воду в плавательных бассейнах. Возможен и фекально-оральный механизм передачи. Болеют в основном дети младшего возраста. Тропизм к лимфоидной ткани -- свойство аденовирусов. Инкубационный период 6-9 дней. Для заболеваний характерно преобладание респираторного (пневмонии, бронхиолиты, другие ОРВИ – серовары 1-7), кишечного (гастроэнтериты – серовары 40,41) или конъюнктивального синдрома (фагингоконъюнктивиты). Также геморрагические циститы (11,21), менингоэнцефалиты (2,6), генерализованные инфекции (34,35,39). Для аденовирусной инфекции характерно сочетанное поражение слизистой оболочки и лимфоидных тканей миндалин, аденоидов и конъюнктивы глаза (фарингоконъюнктивальная лихорадка).