7. Выделение

Работа 7.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА В МОЧЕ

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику определения белка в моче.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: 20 % раствор сульфосалициловой кислоты, моча, содержащая белок и нормальная моча.

Х о д р а б о т ы

К 1 мл мочи в пробирке прилить 3 капли 20 % сульфосалициловой кислоты (свежеприготовленной). При наличии белка в моче образуется белый осадок или муть, количество которого зависит от концентрации белка в моче.

По результатам работы определить мочу, содержащую белок.

Работа 7.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРА В МОЧЕ

Принцип метода. В результате взаимодействия сахаров, содержащихся в моче с реактивом Гайнеса, изменяется валентность меди, что способствует изменению окраски среды.

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику определения сахара в моче.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: реактив Гайнеса, пробирки, пипетки, водяная баня, моча, содержащая сахар и нормальная моча. Объект исследования - человек.

Х о д р а б о т ы

Вначале приготовить реактив Гайнеса.Он представляет собой смесь трех растворов: 1) 13,3 г химически чистой сернокислой меди растворяют в 400 мл дистиллированной воды; 2) 50 г едкого калия растворяют в 400 мл дистиллированной воды; 3) 15 г чистого глицерина растворяют в 200 мл дистиллированной воды. Для приготовления реактива Гайнеса вначале смешивают первый и второй растворы и к ним прибавляют третий.

В пробирку внести 2 мл реактива Гайнеса и прибавить туда же 4 капли мочи. Пробирку с содержимым выдержать в кипящей водяной бане 5 минут. При наличии сахаров содержимое пробирки окрасится в розовый цвет. При значительной концентрации сахара могут образоваться кристаллики красного цвета.

Интенсивность розовой окраски зависит от концентрации сахара в моче. При отсутствии сахара в моче сохраняется синий цвет реактива.

По результатам работы определить мочу, содержащую сахар.

Работа 7.3. ПОЛЯРИМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА

САХАРА В МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА

Поляриметрический метод определения количества сахара в моче основан на свойстве глюкозы вращать плоскость поляризации света вправо. Определение производят с помощью специального поляриметра (сахариметра), который прямо указывает процентное содержание глюкозы в моче. Наблюдение ведут через окуляр, причем поле зрения имеет вид круга, разделенного на три части. В зависимости от содержания сахара в моче плоскость поляризации луча поворачивается на определенный угол, что изменяет интенсивность освещения одной трети поля зрения в окуляре. Поворачивая анализатор, содержащий вторую призму, можно повернуть луч и восстановить одинаковую интенсивность освещения полей зрения.

Благодаря шкале и нониусу по углу вращения анализатора можно установить процентное содержание сахара в исследуемой моче.

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику определения сахара (глюкозы) в моче и определить его содержание в исследуемой пробе мочи.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: моча, поляриметр П-161 (сахариметр), химические колбы, пробирки, воронки,пипетки. Объект исследования - человек.

Х о д р а б о т ы

Мочу профильтровать и прозрачный фильтрат налить в трубку поляриметра следя за тем, чтобы в трубке не оказалось пузырьков воздуха. Для этого необходимо налить в трубку столько мочи, чтобы поверхность жидкости несколько выступала над отверстием. Затем на отверстие трубки надвинуть сбоку стеклышко, находящееся в горизонтальном положении, и осторожно снять им избыток жидкости.

После помещения трубки в поляриметр следует подождать 1-2 мин, а затем определить угол вращения.

Если моча не содержит глюкозы, то поля зрения освещены совершенно одинаково, и нуль шкалы (верхней измерительной линейки) точно совпадает с нулем нониуса (верхней линейки).

Если в моче есть глюкоза, то середина круга оказывается темнее боковых частей и разница между их освещением оказывается тем больше, чем выше концентрация глюкозы. В этом случае необходимо повернуть винт до тех пор, пока поля зрения опять не окажутся освещенными одинаково. После этого определить, насколько нуль нониуса отошел вправо от нуля шкалы. Деления шкалы обозначают целые числа процентов содержания глюкозы. Установить какое из делений нониуса совпадает с каким-либо из делений шкалы -это деление укажет число десятых долей процента сверх того целого числа, которое установлено по делениям верхней шкалы.

Зная угол вращения плоскости поляризации в градусах, можно определить концентрацию сахара в г/л по формуле:

I

С = ————— х 1000

66

где:

С - концентрация глюкозы в г/л;

I - найденный угол вращения плоскости поляризации.

В выводе отметить содержание сахара в исследуемой моче.

Работа 7.4. КОМБИНИРОВАННЫЙ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ТЕСТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОТДЕЛЬНЫХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ

СВОЙСТВ МОЧИ

Конечным результатом деятельности почек является моча, представляющая собой сложную биологическую жидкость. В ее состав входит более 150 химических веществ органического и неорганического происхождения.Реакция мочи (рН) обусловлена концентрацией в ней свободных ионов водорода. В физиологических условиях колебания рН зависят как от питания, так и от многих других факторов. Сахар (глюкоза) в моче здорового человека отсутствует, за исключением случаев незначительной глюкозурии при избыточном употреблении углеводов с пищей, или если моча для исследования берется не натощак. Кетоновые тела появляются в моче при ряде заболеваний ( сахарный диабет, заболевания печени и др.). Уробилиногенурия характерна для ряда заболеваний печени. В норме уробилиновые тела содержатся в количествах, не улавливаемых качественными пробами. Моча при патологии может содержать кровь в виде неразрушенных эритроцитов (гематурия) или растворенный кровяной пигмент (гемоглобинурия). Гемоглобинурия встречается редко, например при переливании несовместимой крови. Гематурия возникает при поражении почек или мочевых путей. Белок в моче здорового человека в обычных условиях содержится в минимальном количестве, не определяемом обыкновенными качественными реакциями на белок.

Комбинированный экспресс-тест позволяет определить величины наиболее важных физико-химических свойств мочи.

Ц е л ь р а б о т ы: ознакомиться с методикой экспресс-диагностического теста физико-химических свойств образца мочи.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: тест-полоски, шкала для сравнения показателей с нормой, штатив с пробирками, фильтровальная бумага, пинцет, секундомер.

Х о д р а б о т ы

Внести в пробирку 10 мл исследуемой мочи и поместить туда тест-полоску на 120 секунд. Затем пинцетом перенести тест-полоску на фильтровальную бумагу, просушить. Результат сравнить со шкалой, нанесенной на упаковку.

Полученные данные занести в таблицу.

Белок	Лейко- циты	Нитриты	рН	Глюкоза	Уроби-линоген	Эритро- циты	Билирубин

В выводе указать, соответсвуют ли результаты анализа исследуемой мочи физико-химическим показателям в норме.

КОНСТАНТЫ ВЫДЕЛИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ

Эффективное фильтрационное давление 20 мм Hg

Общая фильтрационная поверхность клубочков 1,5 - 2,0 м²

Почечный кровоток 1200 мл/мин

Почечный плазматок 650 мл/мин

Количество первичной мочи в сутки 150 - 170 л

Количество конечной мочи в сутки 1,5 л

Относительная плотность 1,012

Цвет от янтарно-желтого до соломенно-желтого

Прозрачность прозрачная

рН 5,0 - 7,0

Химический состав:

мочевина 166,5 - 581,8 ммоль/л

креатинин 9,24 - 18,5 ммоль/л

креатин 0 - 1,06 ммоль/л

индикан 0,014 - 0,056 ммоль/л

мочевая кислота 0,33 - 1,24 ммоль/л

Мочевой осадок: лейкоциты 0 - 3 в поле зрения

( < 4.10⁶/л)

эритроциты 0 - 2 в поле зрения

( < 2.10⁶/л)

эпителиальные клетки: плоский эпителий 0 - 3 в поле зрения

эпителий мочевых канальцев (почечный) отсутствует

цилиндры гиалиновые 0 - 1 в поле зрения

кристаллы (присутствуют) ураты в кислой моче

фосфаты в щелочной моче

Выделение с суточной мочой (г):

Натрий 4 - 6

Хлориды 6 - 9

фосфаты 0,8 - 1,2

Сульфаты 0,8 - 1,2

Калий 2 - 3

Кальций 0,1 - 0,3

Медь 0,05 - 0,4

Аммоний 0 - 0,8

Мочевина 20 - 35

Креатинин 1,0 - 1,5

Мочевая кислота 0,5 - 1,0

Гиппуровая кислота 0,7

Аминокислоты 1,0