14. Методы микробиологических исследований. Бактериоскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.

Методы лабораторной диагностики инфекционных агентов многочисленны, к основным можно отнести следующие.

1. Микроскопический - с использованием приборов для микроскопии. Определяют форму, размеры, взаиморасположение микроорганизмов, их структуру, способность окрашиваться определенными красителями.

2. Микробиологический или культуральный (бактериологический и вирусологический) - выделение чистой культуры и ее идентификация.

3. Биологический - заражение лабораторных животных с воспроизведением инфекционного процесса на чувствительных моделях (биопроба).

4. Иммунологический (варианты - серологический, аллергологический) - используется для выявления антигенов возбудителя или антител к ним.

5. Молекулярно-генетический - ДНК- и РНК- зонды, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и многие другие.

Характеристика бактериоскопического метода исследования. Микроскопический (бактериоскопический) метод исследования - совокупность способов изучения морфологических и тинкториальных (способность окрашиваться) свойств микробов в исследуемом материале (лабораторная культура, патологический материал, пробы из внешней среды) с помощью микроскопии. Основная цель - установление этиологии болезни, морфологическая идентификация, а также определив чистоты выделенной чистой культуры. В лабораторной практике используют следующие типы микроскопических препаратов: а) бактериологический мазок (препарат-мазок); б) "висячая капля"; в) "придавленная капля"; г) тонкий мазок; д) "толстая капля"; ж) препарат-отпечаток. Этапы метода: 1. Забор материала (гной, мокрота, кровь, моча, испражнения, промывные воды бронхов и желудка, ликвор, содержимое полостей носа, вагины, трупный материал и др.). 2. Транспортировка материала. 3. Приготовление микропрепаратов, фиксация и окраска (при необходимости). 4. Микроскопия с оценкой формы, размеров, взаимного расположения микробов и т.д. 5. Заключение.

Приготовление фиксированного мазка:

1. Собственно приготовление мазка.

2. Высушивание.

3. Фиксирование.

4. Микроскопия. Оценка метода: Метод прост, широко доступен, быстр, экономичен, но мало чувствителен и мало специфичен (из-за схожести морфологии микроорганизмов разных видов), небезопасен (работа с живыми микробами). 15. Структуры прокариотной клетки и их функции.

Отличия прокариот от эукариот 1. У прокариот отсутствуют мембраны, ограничивающие органеллы бактериальной клетки (ядро. митохондрии, рибосомы) от цитоплазмы. Из мембран имеется только цитоплазматическая мембрана. 2. Ядро прокариот (нуклеоид) фибриальной структуры, ядерная оболочка отсутствует. 3. У прокариот отсутствуют митохондрии, хлоропласты, комплекс Гольджи. ЭПС. 4. Окислительно-восстановительные фрагменты локализованы в мезосомах (производных цитоплазматической мембраны) 5. У прокариот отсутствует митоз, размножаются путем бинарного деления. 6. Прокариоты имеют гаплоидный геном. 7. Отсутствует клеточный центр 8. Внутриклеточные перемещения цитоплазмы и амебоидное движение для прокариот нетипичны.

Структура прокариотной клетки

Обязательные (облигатные)		Необязательные (факультативные)
Название	Характеристика	Название	Характеристика
Нуклеоид	Циркулярно замкнутая суперспирализованная двухцепочечная молекула ДНК = бактериальная хромосома	Плазмиды	ДНК аналогичного нуклеоиду строения, но: Меньшего молекул. веса Может быть неск. копий
Цитоплазма	Аналогичная цитоплазме эукариотической клетки	Цитоплазматические включения	Как правило, запасы питательных веществ
Рибосомы	Аналогичны рибосомам эукариотической клетки, но меньшей молекулярной массы	Защитные приспособления	Спора и капсула
Цитоплазматическая мембрана	Аналогичная ЦПМ эукариотической клетки, но без стеринов (стерины содержатся в ЦПМ лишь у микоплазм)	Жгутики	Органы движения
Мезосомы	Впячивания ЦПМ: центр энергетического метаболизма участие в клеточном делении	Реснички (пили, фимбрии)	Полые белковые (белок пилин) трубочки на поверхности клетки: общего типа – для адгезии на питательном субстрате половые (конъюгативные) – для передачи ДНК от одной клетки к другой
Клеточная стенка	играет формообразующую роль предохраняет клетку от осмотического лизиса имеет два типа строения (грамположительная и грамотрицательная КС) отсутствует у микоплазм