Завдання на виконання:

1. Самостійно виділити лімфоцити з периферійної крові в градієнті густин фікол-верографіну (центрифугування, 1500 об/хв, 15 – 20 хв) (див. Лаб. робота №3):

1.1. В чисту пробірку №1 наливають 1 мл гепаринізованої крові і додають 3 мл фізіологічного розчину.

1.2. В пробірку №2 наливають 5 мл розчину фікол-верографіну (ρ = 1,077 г/мл). Обережно, по внутрішній стороні пробірки пастеркою з грушею додають 2,5 – 3 мл розведеної крові з пробірки №1.

1.3. Кров центрифугують упродовж 20 хв за кімнатної температури при 1500 об/хв.

1.4. Після центрифугування в пробірці спостерігають чотири фракції (Рис.3.1): І – уламки клітин і еритроцити; ІІ – градієнт густини фікол-верографіну; ІІІ – лімфоцити; ІV – плазма крові.

2. Обережно підвести кінчик пастерки до шару лімфоїдних клітин і за допомогою гумової груші відібрати ці клітини і перенести їх в стерильну пробірку.

3. Клітини відмити в середовищі 199 за допомогою центрифугування (центрифугування 1500 об/хв, 5 – 7 хв).

4. Після центрифугування надосадову рідину злити, до осаду додати 0,5 – 1 мл середовища 199, осад ресуспендувати.

5. У пробірці №2 змішати 4,5 мл (мг) імуномодулятора (Імунал, настойка ехінацеї тощо) та 5 мл середовища 199 – Ім.-система.

6. До 0,1 мл виділених лімфоцитів додати 0,1 мл Ім.-системи. Добре струсити та поставити на 1 год в термостат за 37°С.

7. Проби дістати з термостату та відмити 2 рази фіз. розчином (центрифугуванням 1500 об/хв, 5 – 7 хв).

8. Надосадову рідину злити, до осаду додати 0,1 мл Т-системи, струсити і поставити на 1 год в холодильник за температури 6 – 8°С.

9. Дістати проби з холодильника та за допомогою камери Горяєва нативно під мікроскопом (40) підрахувати кількість лімфоцитів, що зв’язали 2 і більше еритроцитів.

10. Оформити протокол заняття, зробити висновки.

Контрольні запитання:

1. Дайте визначення поняттю "імунотропні засоби".

2. Наведіть класифікцію імунотропних засобів.

3. Перерахуйте основні принципи призначення імунотропних засобів.

4. Наведіть приклади імунотропних препаратів природного походження.

5. Наведіть приклади імунотропних препаратів синтетичного походження.

6. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на рівні факторів природженої резистентності.

7. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на клітинну ланку імунітету.

8. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на гуморальну ланку імунітету.

9. В чому полягають особливості застосування вакцинних препаратів?

10. Перерахуйте основні переваги та недоліки застосування вакцин.

Лабораторна робота № 8 підсумкове заняття

Мета роботи: підвести підсумки лабораторних занять.

Матеріали та обладнання: протоколи занять, оформлені належним чином.

Завдання на виконання:

1. Підвести підсумки лабораторних занять.

2. Перевірити протоколи.

3. Провести модульний контроль.

Рекомендована література

1. Імунологія: підручник / Вершигора А.Ю., Пастер Є.У., Колибо Д.В. та ін. – К.: Вища шк., 2005. – 599 с.

2. Основы микробиологии и иммунологии: учеб. для студ. учреждений сред. проф. мед. образования / А.А. Воробьев, А.С. Быков, Е.П. Пашков и др. – М.: Издательский центр «Академия», 2013. – 288 с.

3. Скок, М.В. Основи імунології. Курс лекцій / М.В. Скок – К.: Фітосоціоцентр, 2002. – 152 с.

4. Соколова, І. Є. Основи імунології / І. Є. Соколова, А. І. Вінніков, Т. М. Полішко – Дніпропетровськ: ДНУ, 2007. – 559 с.

5. Фролов, О.К., Копійка В.В., Федотов Є.Р. Навчально-методичний посібник з курсу «Основи імунології» для студ. біол. факульт. / О.К. Фролов, В.В. Копійка, Є.Р. Федотов – Запоріжжя: ЗНУ, 2007. – 84 с.

6. Хаитов, Р.М. Иммунология: учебник для студ. учреждений высш. проф. образования / Р.М. Хаитов – М.: Издательская группа «ГЭОТАР-медиа», 2011. – 521 с.

7. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

8. Медична мікробіологія, вірусологія, імунологія: підручник для студентів вищ.мед.навч.закл. / За редакцією В.П. Широбокова. – Вінниця: Нова Книга, 2010. – 969 с.

9. Якобисяк, М. Імунологія: підручник / Під редакцією Чоп’як В.В. (переклад) – Вінниця: Нова Книга, 2004. – 672 с.

10. Маянский, А.Н. Лекции по иммунологии / А.Н. Маянский – Н. Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2003. – 272 с.

11. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология: пер. с англ. / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл – М.: Мир, 2000. – 581 с.

12. Фролов О.К., Копійка В.В., Федотов Є.Р. Методологія імунної системи ссавців: навчально-методичний посібник / О.К. Фролов, В.В. Копійка, Є.Р. Федотов – Запоріжжя: ЗНУ, 2011. – 384 с.

13. Данилейченко В. В., Федечко Й.М., Корнійчук О.П. Мікробіологія з основами імунології: підручник / В. В. Данилейченко, Й.М. Федечко, О.П. Корнійчук – К: Медицина, 2009. – 392 с.

14. Колісник Н.В., Омельянчик Л.О. Методи лабораторної імунології: навчальний посібник для спец. і магістрів біол. факульт. / Н.В. Колісник, Л.О. Омельянчик – Запоріжжя: ЗНУ, 2010. – 116 с.

15. Фролов О.К. Загальна цитологія: конспект лекцій для студ. біол. факульт. ОКР «бакалавр» / О.К. Фролов – Запоріжжя: ЗНУ, 2011. – 56 с.

16. Плейфэр Дж., Чейн Б.М. Наглядная иммунология / Дж. Плейфэр, Б.М. Чейн – М.: Издательская группа «ГЭОТАР-медиа», 2002. – 96 с.

17. Творко, М. С. Основи імунології (теорія і практика): посібник для студ. вищ. мед. та фарм. навч. закл. / М.С. Творко – Тернопіль: ТДМУ, 2009. – 298 с.

18. Холодна, Л.С. Імунологія: підручник /Л.С. Холодна – К.: Вища шк., 2007. – 271 с.

19. Навчальний посібник з клінічної імунології та алергології для аудиторної роботи студентів / В.Є. Казмірчук, Г.М. Драннік, Д.В. Мальцев та ін. – К.: ТОВ «Поліграф плюс», 2008. – 190 с.

Додатки