1.9 Определение кетоновых тел

В результате нарушения обмена веществ (жирового и углеводного) в крови, а затем в молоке коров могут появляться кетоновые (ацетоновые) тела. Увеличение кетоновых тел в основном идет за счет бета - оксимасляной кислоты, которая, по данным A.M. Силаева, является токсичной для животных. Имеются сообщения о токсичности молока с кетоновыми телами и для людей.

В производственных условиях обычно рекомендуют два варианта реакций на кетоновые тела в молоке у коров.

Первый вариант (по Россу): готовят реактив - смешивают 1 г нитропруссидного натрия и 100 г сульфата аммония (смешивают тщательно). В пробирку насыпают 1 г готового реактива, к нему добавляют 5 мл исследуемого молока и еще несколько маленьких крупинок едкого натра. Пробирку с содержимым встряхивают и оставляют на 5 мин в штативе при комнатной температуре.

Второй вариант (по К.В. Марковой и др.): к 10 мл исследуемого молока добавляют 5 г сернокислого аммония, 0,1 мл 5%-ного водного раствора нитропруссидного натрия и 2 мл концентрированного аммиака. Пробирку с содержимым нужно встряхнуть, через 5 мин следует читать реакцию. Оценку реакции производят по следующим показателям (таблица 1)

Таблица 1 Оценка молока по реакции на кетоновые тела

Показатели реакции с молоком по Марковой и др.	Оценка реакции
Слабо-розовая окраска	+ слабо положительная реакция
Ярко-розовая окраска	++ положительная реакция
Пурпурная окраска	+++ резко положительная реакция

Санитарная оценка. При положительной реакции на кетоновые тела молоко бракуют.

1.10 Определение количества соматических клеток (гост 23453 – 90)

Молоко, полученное в течение первых 7-и дней после отела (молозиво) и в течение 5-ти дней до дня запуска животных (стародойное молоко) считают анормальным, поскольку в нем увеличивается количество соматических клеток. Такое молоко не допускается для использования в пищевых целях.

Также увлечение количества соматических клеток отмечают в молоке, полученном от животных с субклинической формой мастита или с другими нарушениями состояния организма.

Количество соматических клеток в молоке устанавливают визуальным способом и с применением прибора ИСКМ-1, который применяют при возникновении разногласий. Методы определения основаны на взаимодействии препарата «Мастоприм» с соматическими клетками, в результате которого изменяется консистенция молока.

а) визуальный способ определения

Приготовление водного раствора препарата «Мастоприм». Препарат «Мастоприм » в количестве 2,5 г вносят в мерную колбу на 100 мл и доливают до метки дистиллированной водой (или питьевой свежекипяченой водой), нагретой до температуры 30-35°С. Раствор перед применением взбалтывают до равномерного распределения осадка. Срок годности раствора 1 сутки при температуре хранения 10-30°С.

В луночку пластинки ПМК-1 вносят 1 мл тщательно перемешанного молока и добавляют 1 мл водного раствора препарата «Мастоприм». Молоко с препаратом интенсивно перемешивают деревянной, пластмассовой или стеклянной палочкой в течение 10 с. Полученную смесь из луночки при непрерывном интенсивном перемешивании поднимают палочкой вверх на 50-70 мм, после чего в течение не более 60 сек. оценивают результаты анализа.

Количество соматических клеток в исследуемом молоке устанавливают по консистенции молока, как указано в таблице 2.

Таблица 2 Оценка молока по пробе с препаратом «Мастоприм»

Характеристика консистенции молока	Количество соматических клеток в 1 мл мол.
Однородная жидкость или слабый сгусток, который слегка тянется за палочкой в виде нити	До 500 тыс.
Выраженный сгусток, при перемешивании которого хорошо видна выемка на дне луночки пластинки. Сгусток не выбрасывается из луночки пластинки.	От 500 тыс. до 1 млн.
Плотный сгусток, который выбрасывается палочкой из луночки пластинки.	Свыше 1 млн.

Оценка результатов.

Молоко от здоровых коров содержит в 1 мл до 1 млн. соматических клеток, а молоко с примесью анормального – свыше 1 млн. клеток.

Примечание. При установлении сортности молока необходимо провести определение количества соматических клеток с помощью вискозиметра (например, прибор ИСКМ-1).

б) метод определения с применением прибора ИСКМ-1

Приготовление водного раствора «Мастоприм».

3,5 г препарата вносят в мерную колбу или мерный цилиндр вместимостью 100 мл и доливают до метки дистиллированной водой, подогретой до 30-35°С. Полученный раствор перед применением взбалтывают до равномерного распределения осадка. Срок годности раствора - 1 сутки при температуре хранения 10-30°С. Во время исследования температура помещения, в котором проводятся исследования, должна быть 10-30 °С. Кислотность исследуемого молока должна быть в пределах 16-21°Т.

В стаканчик из комплекта прибора наливают 5 мл водного раствора препарата «Мастоприм» и 10 мл исследуемого молока, тщательно профильтрованного через четыре слоя марли и перемешанного. Смесь молока с раствором препарата «Мастоприм» перемешивают в течение 30 с десятикратным отклонением рабочего сосуда от вертикальной оси на 145°. Полученную смесь заливают в воронку капиллярного устройства и нажимают кнопку «Пуск». На цифровом индикаторе прибора отмечают результат в единицах времени или количестве соматических клеток. После каждой исследуемой пробы капиллярное устройство следует два-три раза промыть дистиллированной водой и четыре-пять раз продуть с помощью резиновой груши. Количество соматических клеток в исследуемом молоке устанавливают по времени вытекания смеси в соответствии с требованиями таблицы 3.

Таблица 3 Количество соматических клеток в исследуемом молоке

Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3	Показания вискозиметра,с	Количество клеток,тыс/см3
12,0 12,2 12,4 12,6 12,8 13,0 13,2 13,4 13,6 13,8 14,0 14,2 14,4 14,6 14,8, 15,0 15,2 15,4 15,6 15,8 16,0 16,2 16,4 16,6 16,8 17,0 17,2 17,4 17,6 17,8 18,0 18,2 18,4	90 97 104 111 118 125 132 139 146 153 160 167 174 181 188 195 202 209 216 223 230 237 244 251 258 265 272 279 286 293 300 306 311	18,6 18,8 19,0 19,2 19,4 19,6 19,8 20,0 20,2 20,4 20,6 20,8 21,0 21,2 21,4 21,6 21,8 22,0 22,2 22,4 22,6 22,8 23,0 23,2 23,4 23,6 23,8 24,0 24,2 24,4 24,6 24,8 25,0	317 323 329 334 340 346 351 357 363 368 374 380 383 391 396 403 408 414 420 425 431 437 443 448 454 460 465 471 477 482 488 494 500	25,2 25,4 25,6 25,8 26,0 26,2 26,4 26,6 26,8 27,0 27,2 27,4 27,6 27,8 28,0 28,2 28,4 28,6 28,8 29,0 29,2 29,4 29,6 29,8 30,0 30,2 30,4 30,6 30,8 31,0 31,2 31,4 31,6	508 517 525 533 542 550 558 567 575 583 592 600 608 617 625 633 642 650 658 667 675 683 692 700 708 717 725 733 742 750 758 767 775	31,8 32,0 32,2 32,4 32,6 32,8 33,0 33,2 33,4 33,6 33,8 34,0 34,2 34,4 34,6 34,8 35,0 35,2 35,4 35,6 35,8 36,0 36,2 36,4 36,6 36,8 37,0 37,2 37,4 37,6 37,8 38,0 38,2	783 792 800 808 817 825 833 842 850 858 867 875 883 892 900 909 917 925 933 942 950 958 967 975 983 992 1000 1006 1011 1017 1022 1028 1033	38,4 38,6 38,8 39,0 39,2 39,4 39,6 39,8 40,0 40,2 40,4 40,6 40,8 41,0 41,2 41,4 41,6 41,8 42,0 42,2 42,4 42,6 42,8 43,0 43,2 43,4 43,6 43,8 44,0 44,2 44,4 44,6 44,8	1039 1044 1050 1056 1061 1067 1072 1078 1083 1089 1094 1100 1105 1111 1117 1122 1128 1138 1139 1144 1150 1155 1161 1167 1172 1178 1183 1189 1194 1200 1205 1211 1216	45,0 45,2 45,4 45,6 45,8 46,0 46,2 46,4 46,6 46,8 47,0 47,2 47,4 47,6 47,8 48,0 48,2 48,4 48,6 48,8 49,0 49,2 49,4 49,6 49,8 50,0 50,2 50,4 50,6 50,8 51,0 51,2 51,4	1222 1228 1233 1239 1244 1250 1254 1258 1263 1267 1271 1275 1279 1283 1288 1292 1296 1300 1304 1308 1313 1317 1321 1325 1329 1333 1338 1342 1346 1350 1354 1358 1363	51,6 51,8 52,0 52,2 52,4 52,6 52,8 53,0 53,2 53,4 53,6 53,8 54,0 54,2 54,4 54,6 54,8 55,0 55,2 55,4 55,6 55,8 56,0 56,2 56,4 56,6 56,8 57,0 57,2 57,4 57,6 57,8 58,0	1367 1371 1375 1379 1383 1388 1392 1396 1400 1404 1409 1413 1417 1421 1425 1429 1434 1438 1442 1446 1450 1454 1459 1463 1467 1471 1475 1479 1484 1488 1492 1496 1500

Оценка результатов. В молоке высшего сорта должно быть соматических клеток до 200 тыс./мл, 1 и 2 сорта – до 1 млн./мл.