Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
praki_kaki.docx
Скачиваний:
299
Добавлен:
16.05.2015
Размер:
288.61 Кб
Скачать

2. Качественное определение сахара в моче с помощью реактива Фелинга.

В норме в моче содержится 0,2-0,4 г/л глюкозы и она не обнаруживается обычными реакциями. При диабете и некоторых других заболеваниях, а также после обильного приема с пищей углеводов, эмоционального стресса, при отравлениях эфиром, оксидом, хлороформом, поражения почек он в значительных количествах появляется в моче.

В пробирку налить 1 - 2 мл мочи, добавить равный объем реактива Фелинга и осторожно нагреть верхний слой жидкости. При наличии сахара отметить выпадение кирпично-красного осадка.

3. Качественное обнаружение сахара в моче при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест».

«Глюкотест» приготавливается путем пропитки полосок фильтровальной бумаги размером 0,5×5см смесью, содержащей глюкозооксидазу, пероксидазу и краситель. При смачивании бумаги раствором, содержащим глюкозу, происходит окисление глюкозы под действием фермента глюкозооксидазы. Образующаяся при этом перекись водорода разлагается ферментом пероксидазой с окислением содержащего в тесте красителя. Интенсивность изменения окраски в определенной степени пропорциональна содержанию глюкозы в растворе, поэтому «Глюкотест» используется и для полуколичественного определения содержания глюкозы в моче (от 1,0 до 2,0 г/л и выше).

Бумажку «Глюкотеста» погрузить в исследуемую мочу так, чтобы нанесенная на бумажку желтая полоса была смочена. Немедленно извлечь бумажку, положить смоченным концом на пластмассовую пластинку и через 2 мин сравнить изменившуюся окраску цветной полосы со шкалой, имеющейся в комплекте. Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее совпадающему со шкалой цвету полоски.

4. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова.

При наличии в моче белка, открытого качественными реакциями, его количество определяют методом Робертса-Стольникова. В основе метода лежит проба Геллера – денатурация белка азотной кислотой. Экспериментально установлено, что при наслаивании на азотную кислоту, растворы, содержащие 0,0033% белка, дают белое колечко в промежутке между второй и третьей минутами после наслаивания. Если колечко появляется непосредственно после наслаивания раствора белка на азотную кислоту, то путем последовательного разведения исследуемого материала достигают такого максимального разведения, при котором появляется кольцо между второй и третьей минутами. Умножая разведение на 0,0033%, получаем процентное содержание белка в моче.

Ход работы. В пробирку налить 1 мл концентрированной азотной кислоты с хлористым натрием (реактив Ларионовой) и наслаивать на нее осторожно из пипетки равный объем мочи. Моча, благодаря меньшему удельному весу, наслаивается на кислоту. На границе двух жидкостей при наличии белка появляется белое кольцо, толщина и быстрота появления которого зависят от количества белка. Если колечко появилось сразу после наслаивания мочи, то нужно вновь повторить эту реакцию с мочой, сделав разведение в 10, 20 раз, при необходимости - в 30 раз и т.д., добиваясь, чтобы белое колечко денатурированного белка, появилось между второй и третьей минутами после наслаивания.

Расчет. Колечко появилось через 2 минуты после наслаивания, когда моча была разведена в 40 раз. Следовательно, содержание белка в моче составляет 0,0033 × 40 = 0,132%.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]