12. Количественное определение мочевой кислоты в крови.

_{Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови по методу Мюллера-Зейферта.}

_{Определение мочевой кислоты в сыворотке крови производится с диагностической целью. При подагре, пневмонии, анемии, почечной недостаточности, лечение опухолей рентгенотерапией наблюдается повышение содержания мочевой кислоты. Снижение уровня мочевой кислоты возможно при акромегалии, применении дикумарола, кортизона, салицилатов и инъекций инсулина.}

_{В норме содержание мочевой кислоты в сыворотке крови взрослых составляет у мужчин - 0,24 – 0,50 млмоль/л (4,0-8,5мг/дл), у женщин – 0,16 – 0,40 млмоль/л (2,8-7,5 мг/дл).}

_{Принцип метода. Мочевая кислота определяется в безбелковых фильтратах сыворотки крови по интенсивности синей окраски, развивающейся при восстановлении фосфорновольфрамого реактива.}

_{Техника выполнения работы.}

_{В центрифужные пробирки вносят 1 мл сыворотки крови, добавляют 8 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 0,35М серной кислоты, перемешивают. Затем добавляют 0,5 мл 10% раствора вольфрамата натрия, опять переемешивают и через 10 мин. Центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин. После осаждения белков сыворотки крови центрифугированием ставят опытную, стандартную и контрольную пробы.}

_{Опытная проба: 3 мл надосадочной жидкости переносят в чистую прбирку.}

_{Стандартная проба: 3 мл 0,03М стандартного раствора мочевой кислоты (1 мл содержит 0,006 ммоль мочевой кислоты) налить в чистую пробирку.}

_{Контрольная проба: В чистую пробирку прилить 3 мл дистиллированной воды.}

_{Во все три пробирки добавляют 1,5 мл 10,3% раствора карбоната натрия, 1 мл фосфорновольфрамового реактива, тщательно перемешивают и через 30 мин опытную и стандартную пробы фотометрируют при длине волны 590-700 нм (красный светофильтр) в кювете длиной оптического пути 1 см против контрольной пробы.}

_{Расчет: концентрацию мочевой кислоты рассчитывают по формуле:}

_{С= Еопыт./Естанд.×Естанд.×10, где}

_{С – концентрация мочевой кислоты, ммоль/л;}

_{Еопыт. – экстинкция опытной пробы;}

_{Естанд.- экстинкция стандартной пробы;}

_{Сстанд. – концентрация стандартного раствора мочевой кислоты,}

_{0,03 ммоль/л;}

_{10 – коэффициент пересчета на объём сыворотки крови.}

13. Общий анализ мочи: физико-химические свойства, химический состав мочи, определение патологических компонентов мочи.

_{Определение химических компонентов нормальной мочи.}

_{Качественное определение хлоридов}

_{Налить в пробирку 1 мл мочи, добавить 2 - 3 капли 30% раствора азотной кислоты и 3 - 4 капли 1% раствора азотнокислого серебра. Образуется творожистый осадок хлорида серебра. Написать реакцию.}

_{Качественное обнаружение сульфатов}

_{К 1 мл мочи добавить 2 - 3 капли 1% раствора уксусной кислоты и 2 - 3 мл раствора хлористого бария. Выпадает нерастворимый осадок сульфата бария. Написать реакцию.}

_{Обнаружение фосфатов}

_{В пробирку налить 1 мл молибденового реактива и нагреть его до кипения. После этого прибавить 5 - 6 капель мочи. Выпадает желтый кристаллический осадок фосфорно-молибденовокислого аммония, нерастворимый в азотной кислоте, но растворимый в аммиаке.}

_{Обнаружение ионов кальция}

_{К 1 мл мочи добавить 1 - 2 капли 3% раствора уксусной кислоты и 1 - 2 капли раствора щавелевокислого аммония. Выпадает осадок щавелевокислого кальция (кристаллы под микроскопом имеют вид конвертиков). Написать реакцию.}

_{Обнаружение аммиака}

_{В пробирку налить 2 мл мочи, добавить равный объем раствора гидроксида кальция и над пробиркой держать смоченную водой красную лакмусовую бумажку. Через некоторое время бумажка синеет от выделяющегося аммиака.}

_{Обнаружение креатинина (реакция Вейля)}

_{К 1 мл мочи добавить 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 2 капли 10% раствора нитропруссида натрия, появляется красное окрашивание, которое впоследствии переходит в желтое.}

_{Патологические компоненты мочи.}