- •СПбГавм
- •Методы диагностики
- •Дифференциация патогенных стафилококков от непатогенных
- •Методы диагностики:
- •Синегнойная палочка
- •Методы диагностики:
- •Методы диагностики:
- •Дифференциация b.Anthracis и непатогенных почвенных бацилл-антракоидов b.Cereus, b.Subtilis, b.Mycoides и др.)
- •Дифференциация возбудителя сибирской язвы Bacillus anthracis и возбудителя эмфизематозного карбункула (эмкара) Clostridium chauvoei
- •Пастереллёз
- •Методы диагностики:
- •Возбудитель рожи свиней
- •Методы диагностики:
- •Возбудитель листериоза
- •Дифференциация возбудителей листериоза и рожи свиней
- •Сальмонеллёз
- •Методы диагностики:
- •Колибактериоз
- •Туберкулез
- •Паратуберкулез
- •Методы диагностики
- •Возбудители анаэробных инфекций
- •Методы диагностики
- •Материал для исследования:
- •Культивирование:
- •Культурально-морфологические свойства анаэробов
- •Биопрепараты при анаэробных инфекциях
- •Лептоспироз
- •Методы диагностики
- •Кампилобактериоз (вибриоз)
- •Методы диагностики.
Туберкулез
Туберкулез- инфекционная, хронически протекающая болезнь человека и животных Патологоанатомически характеризуется образованием туберкул (бугорков) в органах и тканях и творожисто-перерожденных туберкулезных очагов. Болеют практически все виды животных и птиц, в т.ч. пресмыкающиеся. (к.р.с., м.р.с., свиньи, лошади, кошки, собаки, олени, маралы, куры, индейки, цесарки, фазаны, павлины, голуби, утки и др. При аэрогенном заражении первичный инфекц. очаг развивается в легких, а при алиментарном - в мезентериальных лимф. узлах, из первичных фокусов микобактерии могут попасть в кровь, что приводит к генерализации процесса;факторы вирулентности-эндотоксины-туберкулины. Жирные кислоты способствуют распаду тканей. Корд-фактор нарушает дыхание и фосфорилирование клеток. L-формы(без клеточной стенки)обладают способностью к реверсии в типичные микобактерии. Истощение, слабость, кашель (или понос), субфебрильнаяt, гибель.
Микобактерии туберкулеза обладают значительной устойчивостью к хим.и физ.воздействиям. В высушенной мокроте, кусочках пораженной ткани, пыли микобактерии жизнестойки от 2 до 7 мес и более. В воде - 5 мес, в почве - 7 мес, при гниении материала – 76-167 дней и дольше.
КЛАССИФИКАЦИЯ:СемействоMycobacteriaceae,род Mycobacterium
М.tuberculosis (человеческий тип) (палочка Коха)
M. bovis (бычий тип),
M. avium (птичий тип),
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД: Материал для исследования:
молоко, моча, слизь, пораженные органы и ткани (бронхиальные и средостенные лимфоузлы, плевра, отрезки кишечника и т.п.). Доставляют свежим, замороженным или после консервации 30-40% водным р-ром глицерина.
Микроскопия. прямые или слегка изогнутые палочки 1,5 до 4 мкм. Гр+ , Сп-, К-, неподвижны;кислото-спирто-щелочеустойчивые, часто располаг. скоплениями.
При окраске по Цилю-Нильсону - красные на синем фоне.
Культивирование. Подготовка пат.мат. перед посевом химическим способом – обработка 6-10% раствором серной кислоты (метод Гона, метод Аликаевой и т.д.). Для жидкого материала – метод флотации сNaОН и ксилолом. Посев на специальныеглицериновые яично-картофельныепитательные среды с бриллиантовым зелёным:Петраньяни, Гельберга, Левенштейна-Йенсена, пересев на МПглицериновый бульон, глицериновый картофель. Микобактерии - строгиеаэробы; Первые признаки ро-ста возбудителя птичьего типа появляются на средах через 15-25 дней, человеческого типа – через 25-35 дней, бычьего типа – через 40-70 дней.
Культуральные свойства:На жидких пит.средах - рыхлая,матовая,морщинистая пленка. На плотн пит.средах колонии в R-форме–«бородавчатые»,сухие, цвета слоновой кости или сплошной сухой налёт.У Mycobacterium avium – колонии гладкие, слизистые.
Возбудитель может размножаться и образовывать микроколониина стекле при нанесении пат.материала на предметное стекло, обработки его Н2SO4и погружения в кровяную среду -метод Прайса. После инкубации при 37оС на 1-й-15-й и 30-й день мазки вынимают из пробирки, высушивают, фиксируют, окрашивают по Цилю-Ниль-сену, микроскопируют.Выявляют микроколонии в виде «жгутов» или «кос».Это явление«корд-фактора», его образуют только патогенные микобактерии.
Биохимические свойства:рост на среде с салицилатом натрия, устойчивость к 5 %-номуNaCl, пикриновой кислоте, сахаролитическая активность. А также:
Активность |
M.tuberculosis |
M.bovis |
M.avium |
Синтез уреазы |
+ |
+ |
- |
Редукция нитратов |
+ |
- |
- |
Синтез каталазы |
- |
- |
+/- |
Аккумуляция ниацина |
+ |
- |
- |
Гидролиз твина-80 (10 сут) |
+/- |
- |
- |
БИОПРОБА.Опред. вирулентности культуры проводят параллельно для морских свинок,кроликов и птиц. Лаб.животных используют и для идентиф. видов возбудит.
Возбудитель |
Морские свинки |
Кролики |
Куры |
M.tuberculosis |
Генерализованная ф. |
Очаговая форма |
Непатогенен |
M.bovis |
Генерализованная ф. |
Генерализованная |
Непатогенен |
M.avium |
Непатогенен |
Сепсис |
Генерализованная ф. |
СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА: Используют реакцию связывания комплемента (РСК);реакцию пассивной или непрямой, гемагглютинации (РПГА);реакцию кольцепреципитации; реакцию диффуз. преципитации в геле (РДП).
АЛЛЕРГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА: Для изготовления аллергенов-туберкулинов для млекопитающих используют штаммы вида Mycobacterium bovis. Применяютсухой очищенный туберкулин(протеин-пурифитед-дериват-ППД).Это сухой очищенный экстракт из туберкулёзных бактерий бычьего вида.Сухой очищенный туберкулин (ППД) для птицготовят по той же технологии,из культурального фильтрата микобактерий туберкулеза птичьего вида и применяют для диагностики у птиц и свиней. Туберкулин инъецируют КРС, верблюдам, оленям в толщу кожи в области средней трети шеи, свиньям на наружной пов-сти основания уха, курам в толщу кожи бородки. Учитывают р-ю через 72 ч по результатам измерения толщины кожной складки с помощьюкутиметра. Положит. реакция проявл. в виде разлитого отека, у КРС размером 35х45 мм и больше, без строго очерченных границ, тестообразного, повыш. теплоты и чувствительности. Кожная складка увеличивается на 3 мм и более.
Парааллергические реакции- результат сенсибилизации крупного рогатого скота атипичными микобактериями, живущими в торфяной подстилке,псевдоаллергические- результат воздействия возбудителей паразитарных болезней и других факторов. Для дифференциации животным одновременно с туберкулинизацией (с другой стороны шеи) внутрикожно вводят аллерген«КАМ» - комплексный аллерген на микобактерии. Если на КАМ реакция будет сильнее – это парааллергическая реакция.
БИОПРЕПАРАТЫ.При туберкулезе иммунитет нестерильный. Фагоцитоз имеет незавершенный характер и фагоцитированные микобактерии не погибают.
В 1924 г. французские ученые Кальметт и Герен предложили вакцину против туберкулеза. Этот штамм назван культурой BCG (Bacterium Calmett - Guerin), по русски - БЦЖ. Вакцинируют людей. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии у животных не разработаны.