Культурально-морфологические свойства анаэробов

Вид	Морфология	по Граму	Спора	Капсула	Подвиж ность	Культуральные свойства Анаэробов на МППБ (среде Китта-Тароцци) и сахарном кровяном МПА
C. tetani	Тонкие, стройные пало-чки до 6 мкм, спора округлая на конце микро-бной клетки	+	+	-	+	На МППБ (среде Китта-Тароцци) помутнение с незначительным газо-образованием. На сахарном кровяном МПА – нежный налет или колонии с приподнятым центром и периферическими отростками - «паучки»; вокруг колоний гемолиз
C. botulinum	Крупные палочки с закругленными концами, споры расположены терминально	+	+	-	+	Строгий анаэроб,срок культив. 48-72 ч. На МППБ – помутнение среды с газо-образованием, характерный запах прогорклого масла. На кровяном МПА – колонии крупные с корневидными отростками и зоной гемолиза или нежный вуалеобразный налёт с микроскопически изрезанными краями
C. chauvoei	Полиморфные, толстые палочки до 8 мкм	+	+	-	+	На МППБ – помутнение, осадок, незначит. газообразование. На сахарном кровяном МПА – колонии в виде “перламутровой” пуговицы, узкая зона гемолиза
C. perfrin gens	Толстые, короткие палочки, располагаются одиночно, попарно иногда палисадом /////	+	+	+	-	Очень быстрый рост! На МППБ – обильное помутнение и бурное газообразование! На сахарном кровяном МПА –мелкие колонии, кот. на свету зеленеют. Вокруг колоний гемолиз
C. septicum	Палочки с закругленными концами.В мазках-отпечатках нити	+	+	-	+	На МППБ – интенсивное помутнение На сахарном кровяном МПА – сплошная нежная пленка, зона гемолиза.
C. novyi	Крупные палочки, располагаются одиночно	+	+	-	+	На МППБ - обильное помутнение с газообразованием. На сахарном кровяном МПА – колонии в виде спутанного клубка, гемолиза нет
C.sordellii	Крупные полиморфные палочки, располагаются цепочками по 2-4 клетки	+	+	-	+	На МППБ - обильное помутнение в нижней части среды, газообразование умеренное. На сахарном кровяном МПА – корневидные, неправильной формы колонии с сероватой шероховатой поверхностью, гемолиз сильный, но может отсутствовать
C. histolyti cum	Тонкие, стройные, с закругленными концами, расположенные одиночно, попарно	+	+	-	+	На МППБ – рост в виде умеренного помутненияНа сахарном кровяном МПА – колонии в виде росинок, без гемолиза
Fusobacterium necropho rum	Полиморфный mi: кокки, палочки до 3 мкм и нити с зернистой цитоплазмой. Рекомендуемая окраска – по Романовскому-Гимза	-	-	-	-	На МППБ – интенсивное помутнение, слабое газообразованиеНа сахарном кровяном МПА – мелкие росинчатые колонии
Bacteroides nodosus	Полиморфный микроорганизм: крупные до 8 мкм прямые или слегка изогнутые палочки, мелкие палочки с утолщениями. Рекомендуемая окраска – по Романовскому-Гимза	-	-	-	-	На МППБ – осадок на дне в виде тяжейНа сахарном кровяном МПА – плоские блестящие шероховатые колонии

Биохимические свойства.Дифференцируют анаэробы друг от друга по характеру роста на молоке с кусочками печени и мозговой среде, а также на среде ПЖА с углеводами и индикатором ВР

Название возбудителя	Молоко + печень	Мозговая среда
Cl. chauvoei, Cl.perfringens, Cl.oedematiens, Cl.septicum	Свертывают	Не изменяют
Cl.botulinum Cl.tetani, Cl. Sordellii, Cl.histolyticum Cl.sporogenes	Пептонизирует	Чернеет

БИОПРОБА

Ботулизм:Экстракты из исследуемого материала фильтруют и делят на две части, одну из них прогревают 20-30 мин на водяной бане при 100^oС. Заражают фильтратом внутривенно или внутрибрюшинно двух белых мышей, морским свинкам вводят экстракт фильтрата подкожно. При наличии токсина ботулизма животные, зараженные некипяченым экстрактом фильтрата, погибают на 2-5 день с характерными клиническими признаками – западение брюшных мышц«осиная талия». Животные, которым введён прогретый фильтрат. Остаются живы и здоровы.

Столбняк:Биопробу ставят с целью обнаружения токсина в патматериале ( Исследуемый материал растирают в ступке с кварцевым песком + двойной объем физ. р-ра. Смесь выдерживают при 20^оС в течение 1 часа, фильтруют и вводят белым мышам в/м). Если исследуют выделенную ЧК, то для накопления токсина ее выдерживают в термостате 6-10 суток, фильтруют и вводят белым мышам или морским свинкам подкожно в подушечку задней лапки. Наблюдение до 5 сут. При наличии токсина через 2-4 сут у животных наблюдают ригидность хвоста (хвост вытянут «трубой» вверх)спастический паралич задней лапки, тетанические судороги и гибель.

Эмфизематозный карбункул:Центрифугатом суспензии патматериала и выделенной ЧК заражают морских свинок в/м, предварительно травмировав бедренную мышцу с внутренней стороны Наблюдают появление крепитирующих, пропитанных газами отёков в месте введения. интоксикацию и гибель.

Злокачественный отек: Морские свинки, которых заражают суспензией пат.материала или выделенной чистой культурой в мышцу бедра. Анаэробы – возбудители злокачественного отёка обладают выраженной протеолитической активностью. Например, при введении морским свинкам культурыCl.hystoliticumнаблюдается расплавление мышечной ткани, мягкие ткани мышц бедра отделяются от костей. Интоксикация приводит к гибели лаб. животных..

Брадзот: Морские свинки, кролики, белые мыши – внутримышечно-гибель

Инфекционная анаэробная энтеротоксемия:Кролики, белые мыши – в/венно или в/брюшинно экстрактом из патологического материала - гибель

Некробактериоз:Кролики – подкожно в заднюю треть наружной поверхности уха (возникает некроз ); белые мыши – п/кожно, в области корня хвоста (припухлость и нагноение, абсцесс. На 8-10-е сутки – отпадение хвоста)

Копытная гнильЯгнята – аппликация материала в межкопытную щель

СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА:

При росте на средах анаэробы выделяют токсины, которые дифференцируют в РН (реакции нейтрализации токсина). Сыворотки на каждый тип токсина получают на биофабриках. При постановке РН токсина животные (мыши) опытной группы остаются живы и не заболевают.

Ботулизм.Чтобы узнать тип токсина, ставят РН токсина на белых мышах. Для этого экстракт пат.материала соединяют с равным объемом антитоксических сывороток (АТС) (контакт 2 часа) и заражают по 2 белые мыши. Если тип токсина совпадает с типом антитоксической сыворотки (АТС) мыши выживают, если нет – гибнут.

Также ставят РН с выделенной чистой культурой. При установлении типа токсина в РН диагноз считается установленным, дальнейшую работу по выделению культуры возбудителя не проводят.

Столбняк.РН токсина на белых мышах.. В диагностич. лаборатории при обнаружении и идентификации столбнячного токсина диагноз считается установленным.

Эмфизематозный карбункул РН не применяется

злокачественный отекРН токсина для идентификации выделенных культур

БрадзотРН токсина не применяется

Инфекционная анаэробная энтеротоксемия. РН токсина со специфическими сыворотками ставят при обнаружении в исследуемом материале токсина

Некробактериоз РН токсина не применяется

копытная гнильРСК, МФА (РИФ)