Технические характеристики некоторых анализаторов - отражательных фотометров

№	Прибор	Фирма	Страна
1	Reflotron II, IV	Roche Diagnostics	Швейцария
2	Seralyzer III	Miles	США
3	DT60 II Kodak Ektachem	Johnson & Johnson	США

Характеристики	Reflotron II, IV	Seralyzer III	DT60 II Kodak Ektachem
Оптические характеристики	Светодиоды (LED 567, 642, 951 нм)	Ксеноновая импульсная лампа, 9 светофильтров (340, 530, 535, 560, 580, 600, 620, 640, 740 нм)	Светодиоды: зеленый, красный, желтый
Термостатирование измерительного блока	25°С; 30°С; 37°С	–	Встроенный термостат
Измерения по конечной точке	+	+	+
Автоматический расчет	+	+
Способ выдачи результатов	дисплей, встроенный принтер, обычная бумага	дисплей, внешний принтер, обычная бумага	дисплей, термопринтер
Аналиты	16 тестов, ферменты, субстраты, калий	15 тестов, ферменты, субстраты, калий, лекарства	В зависимости от модуля: электролиты, ферменты, кальций, теофиллин, субстраты, лактат, анионный интервал
Примечания	Тест-полоски с магнитным кодом, 32 мкл цельной крови или сыворотки или плазмы (калий, холестерин липопротеидов высокой плотности), автоматич. контроль по контрольной полоске	Тест-полоски, 10 мкл сыворотки или плазмы на 1 определение, автокалибровка, хранение в памяти 25 результатов	«Сухая химия» на слайдах, используется 10 мкл сыворотки или плазмы, анализатор предназначен для экспресс- лаборатории

Kodak Ektachem DT60	Reflotron IV

3.3.4. Эмиссионная фотометрия

Спектры испускания, или эмиссионные, получают при возбуждении атомов различными способами (тепловыми столкновениями, фотонами, электронным ударом и т.д.). Время жизни возбужденного состояния невелико и составляет 10^-7-10^-8 с. В течение этого времени атом теряет избыточную энергию путем испускания кванта электромагнитного излучения.

Люминометрия и флуориметрия

Излучение света молекулами – люминесценция - может происходить при передаче энергии им в различных процессах:

- воздействие потоком электронов (катодными лучами) – катодолюминесценция;

- тепловой нагрев – термолюминесценция;

- химические реакции – хемилюминесценция;

- воздействие электрическим током – электролюминесценция;

- ультразвуковое воздействие – сонолюминесценция;

- воздействие механическим трением – триболюминесценция;

- облучение ионизирующей радиацией – радиолюминесценция;

- облучение ультрафиолетовым и видимым светом – фотолюминесценция или флуоресценция.

Таким образом, флуоресценция является частным случаем люминесценции, когда вторичное свечение объекта вызвано возбуждением световой волной.

Как уже отмечалось, в основе явления люминесценции лежат процессы поглощения энергии с последующим излучением фотонов. Различные виды проявления эффекта люминесценции показаны на рисунке.

Схема энергетических уровней внутримолекулярных переходов:

1 - абсорбция; 2 - флуоресценция; 3 - фосфоресценция; а - излучательные переходы; б - безызлучательные переходы.

Молекула, находившаяся в основном состоянии S₀, в результате поглощения энергии переходит в состояние возбуждения S₁ с уровнями колебаний 0', 1' и т. д. Возбужденная молекула через 10^-7 – 10^-8 с возвращается в основное состояние, испуская флуоресцентное излучение. Так как чаще всего обратный переход происходит с самого низкого уровня колебаний в возбужденном состоянии на самый высокий уровень колебаний основного состояния, длина волны флуоресцентного излучения обычно больше, чем возбуждающего излучения (правило Стокса).

За счет рассеяния энергии без излучения возможен переход из возбужденного состояния S₁ в метастабильное состояние Т, которое имеет продолжительность жизни от 10^-3 до нескольких секунд. Излучательный переход из метастабильного состояния называют фосфоресценцией. Она находится в области еще более длинных волн, чем флуоресценция.

По характеру свечения различают фосфоресценцию – свечение, продолжающееся относительно долго после прекращения воздействия, и флуоресценцию – свечение, происходящее только во время воздействия.

Явление флуоресценции получило свое название от природного минерала – флюорита CaF₂, у которого оно впервые наблюдалось. Веществами, способными к свечению – флуорофорами – являются такие биологические соединения как триптофан, тирозин, фенилаланин, нуклеотиды (НАДН, НАДФ-Н), флавины, порфирины, хлорофиллы, каротиноиды, некоторые витамины, окисленные липиды, белки и другие. В качестве меток при проведении флуофесцентного и люминисцентного анализа часто используются флуорофоры и люминофоры:

Флуоресцентные метки (флуорофоры) широко используются в биохимии, биотехнологии, клеточной биологии и биологии развития в качестве маркеров экспрессии генов и локализации белков в различных биологических системах, а также их взаимодействий с окружающей средой. Для проведения исследования флуорофор прикрепляется к изучаемому белку.