Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

MOLEKULJARNO-GENETICHESKII_UROVEN

.pdf
Скачиваний:
409
Добавлен:
25.03.2015
Размер:
939.53 Кб
Скачать

дочерние молекулы ДНК. Каждая дочерняя молекула содержит одну материнскую и одну вновь синтезированную цепь

(полуконсервативный способ удвоения). Репликация в клетке происходит перед каждым еѐ делением в синтетический период интерфазы (S-период).

Единицей репликации является репликон – участок ДНК,

способный к самостоятельной репликации. У бактерий и вирусов имеется обычно один репликон на клетку, тогда как у эукариот их содержится много. Репликация начинается в сайте инициации.

Двойная спираль ДНК расплетается в точках инициации репликации и образуются репликационные глазки, состоящие из двух репликационных вилок, ведущих синтез в противоположных направлениях (двунаправленная репликация), как показано схематически на рис. 2.

Рис. 2. Схема репликационных единиц в ДНК эукариот.

О – точка начала репликации

10

В синтезе полинуклеотидных цепей ДНК участвует фермент ДНК-полимераза, которая наращивает новую цепь в направлении

5' → 3'. Однако синтез дочерних цепей ДНК осуществляется неодинаково. Одна из них создается непрерывно и называется лидирующей. Другая называется отстающей, так как она собирается из отдельных коротких участков (фрагментов Оказаки), которые потом соединяются вместе ДНК-лигазами. Такой феномен наблюдается из-за антипараллельности материнских цепей ДНК.

ФЕРМЕНТЫ и другие БЕЛКИ, обеспечивающие репликацию ДНК:

Геликаза – расплетает двойную спираль ДНК, разрушая водородные связи между комплементарными азотистыми

основаниями.

РНК-полимераза (или ДНК-праймаза) – инициирует синтез ДНК, образуя РНК-затравки (праймеры).

ДНК-полимераза – синтезирует полинуклеотидную цепь ДНК в направлении 5' → 3'.

ДНК-лигаза – сшивает вместе фрагменты Оказаки после удаления РНК-праймера и его замещения на нуклеотиды ДНК.

ДНК-топоизомераза – помогает раскручиванию ДНК и работе геликазы, снимая напряжение на спирали материнской молекулы.

Дестабилизирующие белки – негистоновые ядерные белки,

связываются с разъединенными цепями ДНК, поддерживают

репликационную вилку открытой.

11

Задание 6. Полуконсервативная репликация ДНК в

репликационной вилке

Изучите (рис. 3) особенности синтеза дочерних полинуклеотидных цепей ДНК в репликационной вилке.

Рис. 3. Схема репликационой вилки ДНК

Р е ш и т е з а д а ч и :

Задача 1. В одной из цепей фрагмента ДНК нуклеотиды

расположены в следующей последовательности: 5'

...ЦЦЦГЦЦАЦЦТГЦГГА... 3'. Напишите последовательность нуклеотидов в комплементарной цепи ДНК. Укажите направление синтеза новой цепи.

Задача 2. Участок ДНК имеет следующий состав нуклеотидов:

12

Напишите нуклеотидный состав дочерних ДНК, отметьте старую и новую полинуклеотидные цепи, их 5'- и 3'-концы. Какие химические группы стоят на 5'- и 3'-концах ДНК?

Задание 7. Генетический код

Генетический код – это система кодирования информации о последовательности аминокислот в белке с помощью последовательности нуклеотидов ДНК (РНК) (таблица 4). Единицей генетического кода является кодон (триплет) – последовательность из трех нуклеотидов. В составе генетического кода 64 кодона, из них кодирующих аминокислоты – 61, а некодирующих (стоп-кодоны) – 3.

Кодон АУГ, кодирующий аминокислоту метионин, выполняет функцию кодона-инициатора (старт-кодона) – с него начинается считывание генетической информации с иРНК. Первой к месту синтеза белка – рибосоме подходит тРНК с аминокислотой метионин.

У эукариот только один старт-кодон, тогда как у прокариот их может быть несколько.

Свойства генетического кода: триплетность – каждая аминокислота кодируется сочетанием из трех нуклеотидов;

специфичность – каждый кодон кодирует одну определенную аминокислоту; вырожденность (избыточность) – почти каждая аминокислота (кроме метионина и триптофана) может быть закодирована двумя или более разными кодонами; универсальность – принцип кодирования аминокислот у всех видов одинаков.

13

Таблица 4

Генетический код (в кодонах ДНК и иРНК)

Первый

 

Второй нуклеотид

 

Третий

нуклеотид

 

 

 

 

нуклеотид

ДНК

 

А

Г

Т

Ц

 

ДНК

 

РНК

У

Ц

А

Г

РНК

 

 

 

Фен

Сер

Тир

Цис

У

А

А

У

Фен

Сер

Тир

Цис

Ц

Г

Лей

Сер

стоп-кодон

стоп-кодон

А

Т

 

 

 

 

Лей

Сер

стоп-кодон

Три

Г

Ц

 

 

Лей

Про

Гис

Apг

У

А

Г

Ц

Лей

Про

Гис

Apг

Ц

Г

Лей

Про

Глн

Apг

А

Т

 

 

 

 

Лей

Про

Глн

Apг

Г

Ц

 

 

Иле

Тре

Асн

Сер

У

А

Т

А

Иле

Тре

Асн

Сер

Ц

Г

Иле

Тре

Лиз

Apг

А

Т

 

 

 

 

Мет

Тре

Лиз

Apг

Г

Ц

 

 

Вал

Ала

Асп

Гли

У

А

Ц

Г

Вал

Ала

Асп

Гли

Ц

Г

Вал

Ала

Глу

Гли

А

Т

 

 

 

 

Вал

Ала

Глу

Гли

Г

Ц

Правила пользования таблицей Первый нуклеотид в кодоне берется из левого вертикального

ряда, второй – из верхнего горизонтального ряда и третий – из правого вертикального. Там, где пересекутся линии, идущие от всех трех нуклеотидов, и находится сокращенное название искомой аминокислоты.

О т в е т ь т е н а в о п р о с ы :

Сколько в генетическом коде кодонов? Сколько из них кодируют аминокислоты? Сколько кодонов не кодируют аминокислоты, как они называются?

14

Напишите аминокислоты, закодированные: а) одним; б) двумя;

в) тремя; г) четырьмя; д) шестью кодонами.

Какие из кодонов не кодируют аминокислоты, а выполняют функцию стоп-сигнала (терминации) трансляции? Напишите их нуклеотидный состав в кодонах ДНК и РНК.

Какой кодон у эукариот не только кодирует аминокислоту, но и является стартовым кодоном (инициатором) трансляции?

Р е ш и т е з а д а ч у :

Одна из цепей фрагмента ДНК имеет следующий состав нуклеотидов:

3' ...ААААГААТАГГГГТТАТААТГАЦА... 5'.

Сколько аминокислот закодировано в данном фрагменте ДНК?

Напишите их последовательность в молекуле полипептида. Как изменится аминокислотный состав полипептида, если в трех последних кодонах третий нуклеотид заменить на тимидиловый?

Задание 8. Геном

Раздел генетики, изучающий геномы организмов, называется

геномика. Геном – это генетическая система клетки, включающая ДНК ядра и митохондрий (у растений – пластид). В ядерном геноме человека (данные 2011 г.) более 3,2 млрд. нyклeoтидoв на гаплоидный набор. Определение порядка расположения последовательности нуклеотидов в ДНК проводится путем секвенирования генома.

Ознакомьтесь по таблице 5 с областями применения знаний о геноме человека.

15

Таблица 5

Применение знаний о геноме человека

Секвенирование генома человека

 

Идентификация всех генов

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Генетическое

 

 

«Социоэкономическая

 

«Функциональная

«разнообразие

 

 

геномика»

 

 

геномика»

человека»

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Молекулярная медицина

 

 

Геномная

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Генная терапия

 

 

 

 

 

дактилоскопия

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Молекулярная

 

диагностика

Превентивная медицина

 

ДосимтоматиФармакогенетика ческая

диагостика

 

Генетическое тестирование

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Гены

 

 

 

 

 

 

Гены

 

 

 

Гены-триггеры

 

 

 

 

«внешней

 

 

 

 

 

мембранных

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

среды»

 

 

 

 

 

 

рецепторов

 

 

 

 

Базы ДНК-данных

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Популяционные

 

 

Семейные

 

 

Индивидуальные

 

Этнические

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Генетический

 

 

 

 

 

 

 

 

«паспорт»

 

 

16

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Задание 9. Организация генома прокариот

Наследственный материал прокариотической клетки содержится в единственной молекуле ДНК, которая располагается в цитоплазме и не ограничена мембраной (цитологическая структура – нуклеоид).

Кроме хромосомной ДНК, в геноме прокариот присутствуют генетические элементы (плазмиды), определяющие разные функции и процессы, происходящие в бактериальной клетке.

Ознакомьтесь по таблице 6 с организацией генома прокариот.

Таблица 6

Генетический материал бактериальной клетки

Компоненты

 

Особенности и функции

 

 

 

Хромосомная

Одна (n) кольцевая двухцепочечная молекула ДНК. В

ДНК

нескольких местах контактирует с плазматической

 

мембраной, что обеспечивает расхождение дочерних

 

ДНК после репликации. Хранит генетическую

 

информацию

и

регулирует

процессы

 

жизнедеятельности клетки.

 

 

 

 

Плазмиды

Внехромосомные кольцевые двухцепочечные короткие

 

молекулы ДНК. Ряд плазмид являются факторами

 

устойчивости к условиям среды. Примеры: F-фактор,

 

Соlфактор, R-фактор. Обладают способностью

 

встраиваться в чужеродную ДНК и используются в

 

генной инженерии в качестве переносчиков ДНК.

 

 

Мигрирующие

Сегменты ДНК, способные к перемещению в пределах

генетические

одного генома или из одного генома в другой.

 

элементы

 

 

 

 

 

 

 

 

 

17

Задание 10. Ядерный и митохондриальный геномы человека

Изучите по таблице 7 особенности организации и

функционирования ядерного и митохондриального геномов человека.

 

 

Таблица 7

Генетический материал клетки человека

 

 

 

 

Ядерный

Митохондриальный

 

 

 

Структура ДНК

Двухцепочечная

Двухцепочечная

 

линейная

кольцевая

 

 

 

Количество молекул

46

4-6 в одной

ДНК

(2n2с)

митохондрии

 

 

 

Количество пар

~ 3,2 млрд. в

16569 в одной молекуле

нуклеотидов

гаплоидном наборе

 

 

 

 

Связь с белками

40% ДНК+60% белков

Только ДНК

 

(гистоны и

 

 

негистоновые) → ДНП

 

 

 

 

Гены, их продукты

>20 тыс. генов.

2 гена рРНК, 22 гена

 

Кодируют все белки

тРНК, 13 генов

 

цитоплазмы, 90%

ферментов тканевого

 

белков митохондрий и

дыхания, 10%

 

все виды РНК

строительных белков

 

 

митохондрии

 

 

 

Структура генов

Экзон-интронная

Интронов мало или их

 

 

нет

 

 

 

Репликация

Много вилок

Две вилки репликации

 

репликации

 

 

 

 

Транскрипция

Как правило, идет с

С одной цепи, часто – с

 

одной (кодогенной)

двух (встречная

 

цепи ДНК

транскрипция)

 

 

 

 

18

 

О т в е т ь т е н а в о п р о с ы :

По материнской или отцовской линии передается митохондриальная ДНК?

Как называют всю совокупность генетического материала,

заключенного в гаплоидном наборе хромосом клеток данного вида организма (генотип, геном, кариотип)?

Задание 11. Проверка усвоения материала

Проверьте усвоение материала занятия по тестовым заданиям с выбором одного или нескольких правильных ответов (стр. 78).

А у д и т о р н а я р а б о т а

Задание 12. Генетическое кодирование

Р е ш и т е з а д а ч и :

Задача 1. Одна из цепей фрагмента ДНК имеет следующую последовательность нуклеотидов:

ЦАЦГТАААТТГАГГЦТТЦЦТЦАТТ.

Сколько аминокислот может быть закодировано в данной цепи ДНК? Какие аминокислоты кодируют 1-й, 5-й, 6-й кодоны?

Напишите кодоны синонимы иРНК, кодирующие аминокислоту валин (Вал).

Задача 2. Фрагмент белка Д имеет следующий состав аминокислот:

...мет-фен-тир-асп-гис-цис...

Напишите нуклеотидный состав иРНК и ДНК (используя один из кодонов-синонимов), в которых закодирован данный белковый

19