Volume1
.pdf
448 Часть 2. Основные генетические механизмы
вопрос о том, как «решения», принимаемые родительской клеткой, «помнят» клетки ее потомства много поколений спустя.
5.3.12. Концы хромосом реплицируются теломеразой
Мы с вами уже знаем, что синтез отстающей нити в репликационной вилке происходит прерывисто по механизму «обратных стежков» с образованием коротких фрагментов ДНК. Этот механизм сталкивается с особой проблемой, когда репликационная вилка достигает конца линейной хромосомы: на самом конце линейной молекулы ДНК нет места для размещения РНК-затравки, необходимой для начала последнего фрагмента Оказаки.
Бактерии решили эту проблему концевой репликации, обзаведшись кольцевыми молекулами ДНК вместо хромосом (см. рис. 5.27). Эукариоты решают ее гениальным способом: на концах хромосом у них есть специализированные нуклеотидные последовательности, которые включены в структуры, названные теломерами (см. главу 4). Теломеры содержат много тандемных повторов короткой последовательности, которая похожа у таких разных организмов, как простейшие, грибы, растения и млекопитающие. У человека последовательность повторяющейся единицы имеет вид GGGTTA и повторяется примерно тысячу раз в каждой теломере.
Последовательности теломерной ДНК узнают специфичные к такой последовательности ДНК-связывающие белки, рекрутирующие фермент, названный теломеразой, который и пополняет запас этих последовательностей при каждом делении клетки. Теломераза распознает конец существующей повторяющейся последовательности теломерной ДНК и продолжает его в направлении 5′ → 3′, используя для синтеза новых копий повтора матрицу РНК, которая является компонентом самого фермента (рис. 5.40). Ферментативная часть теломеразы напоминает другие обратные транскриптазы — ферменты, которые синтезируют ДНК, используя матрицу РНК (см. рис. 5.72). После продления родительской цепи ДНК теломеразой репликация отстающей нити на конце хромосомы может быть завершена обычными ДНК-полимеразами, использующими эти продолжения в качестве матриц для синтеза комплементарной нити (рис. 5.41).
Только что описанный механизм с использованием нуклеазы, которая съедает 5′-конец, гарантирует, что 3′-конец ДНК в каждой теломере всегда будет более длинным, чем 5′-конец, с которым он спарен — так что однонитевой конец выдается наружу (см. рис. 5.41). Этот выступающий конец, как было показано, загибается петлей назад, просовывает свой конец в спираль ДНК теломерной повторяющейся последовательности и образует t-петлю (рис. 5.42). В самых общих чертах эта реакция напоминает встраивание цепи (strand invasion) во время гомологичной рекомбинации, обсуждаемой ниже, и она, возможно, эволюционировала из этих древних рекомбинационных систем. T-петли дают нормальные концы хромосом с уникальной структурой, которая защищает их от ферментативной деградации и позволяет четко отличить их от концов разорванных молекул ДНК, которые клетка быстро репарирует (см. рис. 5.51).
5.3.13. Длина теломеры регулируется и на уровне клеток, и на уровне организма
Поскольку процессы, которые удлиняют и укорачивают каждую теломерную последовательность, уравновешены лишь приблизительно, конец хромосомы со-
Глава 5. Репликация, репарация и рекомбинация ДНК 449
Рис.5.40.Структурачастителомеразы.Теломеразапредставляетсобойкрупныйкомплексбелок–РНК. РНК(показанасиним)содержитматричнуюпоследовательностьдлясинтезановыхтеломерныхповторов ДНК. Сама реакция синтеза выполняется доменом обратной транскриптазы, входящим в состав белка (показанзеленым).Обратнаятранскриптаза—этоспециальнаяформаферментаполимеразы,которая использует матрицу РНК для синтеза нити ДНК; теломераза уникальна тем, что все время несет свою собственную матрицу РНК. Теломераза имеет также несколько вспомогательных белковых доменов (не показаны), которые необходимы для правильной сборки фермента на концах хромосом. (Пере-
рисовано из J. Lingner and T. R. Cech, Curr. Opin. Genet. Dev. 8: 226–232, 1998. С любезного разрешения издательстваElsevier.)
держит переменное число теломерных повторов. Неудивительно, что эксперименты показывают, что клетки, которые неограниченно делятся (например, клетки дрожжей), имеют гомеостатические механизмы, поддерживающие число таких повторов
вограниченных пределах (рис. 5.43).
Всоматических клетках человека теломерные повторы, предположительно, обеспечивают каждую клетку счетным механизмом, который помогает предотвратить неограниченную пролиферацию клеток во взрослых тканях. В самой простой форме эта теория утверждает, что наши соматические клетки рождаются с полным комплектом теломерных повторов. Некоторые стволовые клетки, особенно
втех тканях, что должны восполняться на протяжении всей жизни, — например,
вкостном мозге или коже, — сохраняют полную теломеразную активность. Однако в клетках многих других типов уровень теломеразы снижается, и фермент не вполне поспевает за удвоением хромосом. Такие клетки при каждом делении теряют по 100–200 нуклеотидов в каждой теломере. Через множество клеточных поколений клетки потомства унаследуют дефектные хромосомы (потому что их концы не смогут полностью реплицироваться) и, следовательно, навсегда выйдут из клеточного цикла и прекратят делиться — этот процесс был назван репликаци-
450 Часть 2. Основные генетические механизмы
Рис. 5.41. Репликация теломер. Представленные здесь реакции показывают, как синтезируются повторяющиеся G-обогащенные последовательности, которые образуют концы хромосом (теломеры) ворганизмахсамыхразныхэукариот.3'-конецродительскойнитиДНКпродолжаетсяпосредствомРНК- направленногосинтезаДНК;этопозволяетдостроитьспареннуюсродительской,ноещенезавершенную цепь дочерней ДНК в направлении от ее 5'-конца. Эта неполная, отстающая нить, как предполагается, завершаетсяДНК-полимеразойα,котораянесетДНК-праймазувкачествеоднойизсвоихсубъединиц. ПриведеннаявназиданиетеломернаяпоследовательностьприсущаресничнойинфузорииTetrahymena, накоторойэтиреакцииибылиоткрыты.
онным старением клеток (обсудим его в главе 17). Теоретически, такой механизм мог бы послужить «предохранителем» от безудержной пролиферации аномальных клеток в тканях организма и таким образом
мог бы уберечь нас от рака.
Рис. 5.42. Т-петля на конце хромосомы млекопита-
ющих. Электронная микрофотография ДНК на конце интерфазной хромосомы человека. Хромосома была зафиксирована, депротеинизирована (лишена белков) иискусственноутолщенапереданализом.Наблюдаемая на данном снимке петля составляет приблизительно 15 000 пар нуклеотидов в длину. Встраивание однонитевого 3' конца в дуплексы (двухцепочечные ДНК) повторовсобразованиемt-петли,какдумают,выполня- етсяиподдерживаетсяспециализированнымибелками. (ЗаимствованоизJ. D. Griffithetal.,Cell97:503–514,1999.
СлюбезногоразрешенияиздательстваElsevier.)
Глава 5. Репликация, репарация и рекомбинация ДНК 451
Рис.5.43.Опыт,свидетельствующийотом,чтоклеткидрожжейконтролируютдлинусвоихтеломер.
В этом эксперименте теломеру на одном конце определенной хромосомы искусственно делали или длиннее (слева), или короче (справа) средней. После многих делений клеток на хромосоме восстанавливаласьсредняядлинателомерыираспределениедлин,типичноедлядругиххромосомвклетке дрожжей.Предполагаютналичиеподобногомеханизмаобратнойсвязи,управляющегодлинойтеломер, вклеткахзародышевойлинииживотных.
Гипотеза о том, что длина теломеры служит своего рода «измерительной шкалой» для отсчета делений клетки и, таким образом, регулирует время ее жизни, была проверена несколькими способами. Для некоторых типов клеток человека, выращенных в культуре тканей, результаты экспериментов подтверждают такую теорию. Фибробласты человека обычно пролиферируют приблизительно в течение 60 делений клеток в культуре, прежде чем наступит их репликационное старение. Подобно большинству других соматических клеток человека, фибробласты дают только низкие уровни теломеразы, и их теломеры постепенно укорачиваются с каждым очередным делением. Когда фибробластам обеспечивали дополнительную теломеразу путем вставки активного гена теломеразы, длина теломеры поддерживалась и многие клетки после этого продолжали нескончаемо делиться. Так что кажется очевидным, что в некоторых клетках человека укорочение теломер может вести счет числу делений клетки и запускать репликационное старение.
Было высказано предположение о том, что такого типа контроль за клеточной пролиферацией важен для поддержания архитектуры ткани и отвечает, так или иначе, также за старение животных, в том числе и нас с вами. Эти идеи проверены на трансгенных мышах, у которых полностью отсутствует теломераза. Теломеры в хромосомах мыши приблизительно в пять раз длиннее, чем теломеры человека, и поэтому мыши должны давать потомство на протяжении трех и более поколений, прежде чем их теломеры сократятся до нормальной для человека длины. Возмож-
452 Часть 2. Основные генетические механизмы
но, именно поэтому первые поколения мышей развиваются нормально. Однако в следующих поколениях мыши последовательно накапливают все большее число дефектов в некоторых интенсивно пролиферирующих тканях. Вдобавок к этому такие мыши показывают признаки преждевременного старения и имеют выраженную предрасположенность к образованию опухолей. В этих и других отношениях эти мыши напоминают людей с генетическом заболеванием, которое называется врожденным дискератозом. Люди, пораженные этой болезнью, несут одну функционально активную и одну неактивную копии гена теломеразной РНК; они имеют преждевременно укорачивающиеся теломеры и обычно умирают от прогрессирующей атрофии костного мозга. Кроме того, у них развивается рубцевание легких и цирроз печени, а также заболевания различных эпидермальных структур, в том числе кожи, волосяных фолликулов и ногтей.
Вышеупомянутые наблюдения демонстрируют, что управление пролиферацией клеток путем укорачивания теломер представляет определенный риск для организма, потому что не все клетки, которые начинают терять концы своих хромосом, прекратят делиться. Некоторые, несомненно, становятся генетически неустойчивыми, но продолжают делиться, давая начало видоизмененным клеткам, которые могут привести к раку. Таким образом, можно усомниться в том, что наблюдаемая в большинстве соматических клеток человека супрессия (down-regulation) теломеразы дает эволюционное преимущество, как полагают те, кто постулирует, что укорочение теломер защищает нас от рака и других болезней, обусловленных безудержным делением клеток.
Заключение
Белки, которые запускают репликацию ДНК, связываются с последо- вательностями ДНК в точке начала репликации (origin) и катализируют образование репликационного глазка (replication bubble) с двумя движущимися
впротивоположных направлениях репликационными вилками. Процесс начинает- ся с образования комплекса инициаторный белок – ДНК, который впоследствии загружает ДНК-хеликазу на матрицу ДНК. Затем присоединяются другие белки и завершают образование мультиферментной «репликационной машины»,
которая катализирует синтез ДНК в каждой репликационной вилке.
Убактерий и некоторых простых эукариот точки начала репликации за- даются специальными последовательностями ДНК, которые имеют длину всего лишь несколько сот пар нуклеотидов. У прочих эукариот, таких как человек, последовательности, специфически определяющие точку начала репликации ДНК, по-видимому, выражены менее четко и могут охватывать несколько тысяч пар нуклеотидов.
Бактерии обычно имеют единственную точку начала репликации в коль- цевой хромосоме. При скоростях вилки до 1 000 нуклеотидов в секунду они могут реплицировать свой геном менее чем за час. Репликация ДНК эукариот происходит только в одной части клеточного цикла — в S-фазе. У эукариот репликационная вилка движется в 10 раз медленнее, чем у бактерий, и, для того чтобы успеть провести репликацию намного более длинных хромосом за время S-фазы, которая в клетках человека обычно длится в течение 8 часов, требу- ется целый сонм точек начала репликации. Различные точки начала репликации
втаких хромосомах эукариот активируются в определенной последователь-
ности, устанавливаемой отчасти структурой хроматина, при этом наиболее
Глава 5. Репликация, репарация и рекомбинация ДНК 453
уплотненные области хроматина обычно начинают репликацию в последнюю очередь. После того как репликационная вилка прошла, структура хроматина воссоздается путем добавления новых гистонов к старым, которые напрямую наследуются каждой молекулой дочерней ДНК. Механизм удвоения хромосом позволяет передавать дочерним хромосомам родительские схемы модификации гистонов, тем самым обеспечивая эпигенетическое наследование.
Эукариоты решают проблему репликации концов своих линейных хромосом при помощи специализированной концевой структуры — теломеры, — поддер- живаемой специальным полимеризующим нуклеотиды ферментом, названным теломеразой. Теломераза продолжает одну из нитей ДНК на конце хромосо-
мы, используя матрицу РНК, которая является неотъемлемой частью самого фермента, и синтезирует многократно повторяющуюся последовательность ДНК, которая обычно простирается на тысячи пар нуклеотидов на каждом конце хромосомы.
5.4. Репарация ДНК
Поддержание генетической стабильности, необходимой организму для выживания, требует не только чрезвычайно точного механизма репликации ДНК, но также и механизмов исправления многих случайных повреждений, которые непрестанно происходят в ДНК. В большинстве своем такие самопроизвольные изменения в ДНК кратковременны, потому что они незамедлительно исправляются набором процессов, которые в совокупности называют репарацией ДНК. Из тысяч случайных изменений, возникающих каждый день в ДНК клетки человека — в силу воздействия высокой температуры, нарушений обмена веществ, излучений различной природы и действия веществ из окружающей среды, — лишь немногие накапливаются в виде мутаций в последовательности ДНК. Так, теперь мы знаем, что менее одного из 1 000 случайных изменений нуклеотидов в ДНК заканчивается постоянной мутацией; все остальные с необыкновенной эффективностью устраняются службой репарации ДНК.
Значение механизма репарации ДНК огромно, судя по одному только объему вложений, которые клетки пускают на ферменты «ремонта» ДНК. Например, анализ геномов бактерий и дрожжей показал, что несколько процентов кодирующего объема этих организмов отведены исключительно функциям репарации ДНК. О важности этих механизмов свидетельствует также повышающаяся частота мутаций, которая следует за инактивацией генов репарации ДНК. Многие белки репарации ДНК и гены, что их кодируют, — которые, как мы теперь знаем, работают в самых разных организмах, включая и человека, — были первоначально идентифицированы у бактерий при выделении и исследовании мутантов, которые показывали повышенную частоту мутаций или возросшую чувствительность к ДНК-повреждающим агентам.
Недавно проведенные исследования по выяснению последствий сниженной способности к репарации ДНК у людей позволили связать многие болезни человека именно с этой проблемой (таблица 5.2).
Так, до этого мы уже говорили, что дефекты в гене, который обычно работает на устранение ошибок спаривания, возникающих при репликации ДНК, у человека могут привести к наследственной предрасположенности к некоторым видам рака, причина чему — повышенная частота мутаций. В случае другой болезни человека,
454 Часть 2. Основные генетические механизмы
Таблица5.2.Некоторыенаследственныезаболевания,связанныесдефектамивсистемерепарацииДНК
НАЗВАНИЕ |
ФЕНОТИП |
ЗАТРОНУТЫЙ ФЕРМЕНТ |
|
|
ИЛИ ПРОЦЕСС |
мутации генов MSH2, |
колоректальный рак |
исправление ошибок спари- |
3, 6; MLH1; PMS2 |
|
вания |
пигментная ксеро- |
рак кожи, повышенная чувствительность к |
эксцизионная репарация |
дерма (XP), типы A-G |
УФ-лучам, неврологические расстройства |
нуклеотидов |
XP-вариант |
повышенная чувствительность к УФ- |
синтез «через повреждения» |
|
лучам, рак кожи |
ДНК-полимеразой η |
атаксия- |
лейкоз, лимфома, повышенная чувстви- |
белок ATM, протеинкиназа, |
телеангиэктазия (АТ) |
тельность к γ-лучам, нестабильность |
активируемая двухцепочеч- |
|
генома |
ными разрывами ДНК |
мутации гена BRCA2 |
рак молочной железы, яичников и пред- |
репарация с помощью гомо- |
|
стательной железы |
логичной рекомбинации |
синдром Вернера |
преждевременное старение, склонность |
акцессорные 3'-экзонуклеаза |
|
к злокачественным новообразованиям, |
и ДНК-хеликаза |
|
нестабильность генома |
|
синдром Блума |
склонность к злокачественным новооб- |
акцессорная ДНК-хеликаза |
|
разованиям, задержка роста, нестабиль- |
для репликации |
|
ность генома |
|
анемия Фанкони, |
врожденные пороки развития, лейкоз, |
репарация межцепочечных |
типы A-G |
нестабильность генома |
поперечных сшивок ДНК |
46 BR пациент |
гиперчувствительность к повреждающим |
ДНК-лигаза I |
|
ДНК агентам, нестабильность генома |
|
пигментной ксеродермы (xeroderma pigmentosum; XP), пораженные индивиды чрезвычайно чувствительны к ультрафиолетовому излучению из-за неспособности репарировать некоторые продукты ДНК, образующиеся в результате фотореакции. Этот дефект обусловливает рост частоты мутаций, что ведет к серьезным повреждениям кожи и повышенной подверженности некоторым видам рака.
5.4.1. Без репарации спонтнанные повреждения ДНК быстро изменили бы ее последовательность
Хотя ДНК и является устойчивым материалом, как того требует задача сбережения генетической информации, она представляет собой сложную органическую молекулу, которая подвержена, даже при нормальных условиях в клетке, самопроизвольным изменениям, которые приводили бы к мутациям, не будь устраняемы (рис. 5.44). Например, ДНК каждой клетки человека теряет приблизительно 5 000 пуриновых оснований (аденин и гуанин) каждый день, потому что их N-гликозильные связи с дезоксирибозой гидролизуются, — самопроизвольная реакция, названная апуринизацией, или депуринизацией. Точно так же самопроизвольное дезаминирование цитозина до урацила происходит в ДНК с частотой приблизительно 100 оснований водной клетке за день (рис. 5.45). Вдобавок к этому, основания ДНК время от времени повреждаются в ходе столкновений с реакционноспособными продуктами обмена веществ, производимыми в клетке (в том числе активные формы кислорода) или под воздействием химических соединений из окружающей среды. Кроме того, ультрафиолетовое излучение от Солнца может спровоцировать образование ковалентной связи между двумя смежными пирими-
Глава 5. Репликация, репарация и рекомбинация ДНК 455
Рис. 5.44. Спонтанно происходящие модификации нуклеотидов, после которых, по всей вероят-
ности, требуется репарация ДНК. На каждом нуклеотиде показаны участки, которые, как известно, подвержены модификации при спонтанном окислительном повреждении (красные стрелки), гидролитическом воздействии (синие стрелки) и неконтролируемом метилировании донором метильной группыS-аденозилметионином(зеленыестрелки),приэтомтолщинастрелокотражаетотносительную частотукаждоготакогослучая.(НаосновеT. Lindahl,Nature362:709–715,1993.Слюбезногоразрешения издательстваMacmillanPublishersLtd.)
Рис. 5.45. Апуринизация и дезаминирование. Это две наиболее часто встречающиеся спонтанные химические реакции, которые, как известно, создают серьезные повреждения ДНК в клетках. Депуринизацияможетвысвободитьгуанин(показанздесь),атакжеаденинизДНК.Реакциядезаминирования преобразует цитозин в видоизмененное основание ДНК — урацил (показан здесь), дезаминирование происходит также и по другим основаниям. Эти реакции обычно имеют место в двухцепочечной ДНК; дляудобстванасхемепоказанатолькооднацепь.
диновыми основаниями в ДНК с образованием, например, тиминовых димеров (рис. 5.46). Если такие изменения останутся неисправленными, то, как можно ожидать, в большинстве своем при репликации ДНК они приведут или к удалению одной либо нескольких пар оснований, или к замене пары оснований в дочерней цепи ДНК (рис. 5.47). В таком случае эти мутации будут распространяться
456 Часть 2. Основные генетические механизмы
Рис. 5.46. Наиболее распространенный случай тиминового димера. Повреждения данного типа происходят в ДНК клеток, подвергшихся ультрафиолетовому облучению (например, от солнечногосвета).Подобныйдимеробразуетсямеждулюбыми двумя соседними пиримидиновыми основаниями (остатки C илиТ)вДНК.
по следующим поколениям клеток. Такая высокая частота случайных изменений в последовательности ДНК имела бы катастрофические последствия для организма.
5.4.2. Двойная спираль ДНК легко
реставрируется
Устроенная в виде двойной спирали структу-
ра ДНК идеально подходит для восстановления
в первоначальном виде, потому что несет в себе две отдельные копии всей генетической информации — по одной в каждой из двух цепей. Таким образом,
когда одна цепь повреждается, комплементарная сохраняет неповрежденную копию той же самой информации, и эта копия обычно используется для восстановления правильных последовательностей нуклеотидов в поврежденной нити.
Рис.5.47.Какхимическиемодификациинуклеотидоввызываютмутации.а)Дезаминированиецито-
зина,еслинебудетисправлено,приводиткзаменеодногооснованиядругимприрепликацииДНК.Как показанонарис.5.45,придезаминированиицитозинаполучаетсяурацил.Урацилотличаетсяотцитозина особенностями образования комплементарных пар и предпочтительно спаривается с аденином. МашинырепликацииДНКпоэтомувставляютвновуюнитьаденин,когдавстречаютурацилнаматричной нити. б) Апуринизация может привести к потере пары нуклеотидов. Когда репликационные машины встречаютнаматричнойнитиотсутствующийпурин,онимогутперескочитькследующемуполноценному нуклеотиду,какпоказанонаэтомрисунке,ивновосинтезированнойнити,такимобразом,появляется делеция.ПрирепликацииДНКмутациивозникаютивследствиемногихдругихвидовДНК-повреждений (см.рис.5.44),еслитеосталисьнеисправленными.
Глава 5. Репликация, репарация и рекомбинация ДНК 457
Признаком значимости двухцепочечной спирали для безопасного хранения генетической информации служит ее повсеместное использование всеми клетками; только отдельные маленькие вирусы используют в качестве своего генетического материала одноцепочечную ДНК или РНК. Процессы репарации, описанные в этом разделе, не могут работать с такими нуклеиновыми кислотами, и, будучи повреждены, одноцепочечные геномы, таким образом, имеют очень высокий шанс на появление измененного нуклеотида. Кажется, что только организмы с крошечными геномами (и поэтому крошечными мишенями для повреждения ДНК) могут позволить себе хранить свою генетическую информацию в молекуле, отличной от двойной спирали ДНК.
5.4.3. Различные повреждения ДНК устраняются разными способами
Клетки имеют многочисленные способы репарации своей ДНК, предполагающие использование разных ферментов, которые действуют на повреждения различных видов. На рис. 5.48 показано два из наиболее распространенных способа. В обоих случаях повреждение вырезается, первоначальная последовательность ДНК восстанавливается ДНК-полимеразой, которая использует неповрежденную нить в качестве матрицы, и остающийся разрыв в двойной спирали «заделывается» ДНК-лигазой (см. рис. 5.13).
Эти два способа отличаются механизмами, используемыми для удаления, повреждения из ДНК. Первый способ, названный репарацией вырезанием осно-
ваний, или эксцизионной репарацией оснований (base excision repair), вовлекает батарею ферментов, называемых ДНК-гликозилазами, каждый из которых может распознавать в ДНК определенный тип видоизмененного основания и катализировать его гидролитическое удаление. Существует по крайней мере шесть типов таких ферментов, в том числе те, что удаляют дезаминированные C, дезаминированные А, различные типы алкилированных или окисленных оснований, основания с открытыми кольцами и основания, в которых двойная углерод–углеродная связь была случайно преобразована в одинарную углерод–углеродную связь. Как видоизмененное основание обнаруживается в двойной спирали? Ключевой шаг — опосредствованное ферментом «выпячивание наружу» («flipping out») видоизмененного нуклеотида из спирали, что позволяет ДНК-гликозилазе исследовать основание «со всех строн» на предмет повреждений (рис. 5.49). Предполагается, что эти ферменты путешествуют по ДНК, выставляя основания из спирали, — чтобы оценить их статус. Как только фермент находит и распознает поврежденное основание, он отщепляет его от сахара.
«Недостающий зуб» (или «дырка»), созданный действием ДНК-гликозилазы, опознается ферментом, названный AP-эндонуклеазой (аббревиатура AP означает апуриновая или апиримидиновая, приставка эндо показывает, что данная нуклеаза расщепляет внутренние, а не концевые звенья полинуклеотидной цепи). Этот фермент расщепляет фосфодиэфирную связь в сахарофосфатном остове, после чего повреждение удаляется и получившаяся прореха заделывается (см. рис. 5.48, а). Депуринизация, наиболее частый тип повреждений ДНК, также лишает основания сахар дезоксирибозу. Депуринизация начинается прямо с действия с AP-эндонуклеазы, за чем следуют процессы, представленные в нижней части схемы на рис. 5.48, а.
Второй основной путь называют репарацией вырезанием нуклеотидов, или эксцизионной репарацией нуклеотидов (nucleotide excision repair), а иногда