Фаготипирование
Испытуемую суточную бульонную культуру засевают на поверхность питательного агара в чашках Петри, слегка подсушивают в термостате, затем делят на квадранты, на которые пастеровской пипеткой наносят по одной капле различных типоспецифических фагов. После суточной инкубации просматривают чашку, отмечая те квадранты, в которых имеется лизис бактерий. Фаготип бактериальной культуры определяется тем типом фага, который вызвал лизис.
Этот метод широко используется для эпидемиологи-ческого анализа и позволяет установить источник инфицирования.
Схема постановки опыта фаготипирования
Культуры стафилококка
Напрмер, изучаемая
стафилококковая культура
лизировалась фагами 29, 77 и 80 –
фаговар 29/77/80.
Занятие №2. Мбд раневой анаэробной инфекции клостридиальной и неклостридиальной этиологии. План занятия.
1. Изучение биологических свойств возбудителей раневой анаэробной инфекции клостридиальной и неклостридиальной этиологии:
а) морфологических (микроскопия готовых мазков из чистых культур клостридий и бактероидов).
б) культуральных (изучение демонстраций роста клостридий и бактероидов на питательных средах).
в) биохимической активности (изучение демонстраций).
Бактериологическое исследование при диагностике заболеваний, вызванных неспорообразующими облигатными анаэробами:
- разбор этапов исследования.
МБД газовой гангрены:
- бактериологическое исследование;
- ускоренные методы диагностики.
Схема лабораторной диагностики столбняка.
Биопрепараты, применяющиеся для диагностики, специфической профилактики и терапии раневой анаэробной инфекции и столбняка.
Содержание занятия.
Этиологическая структура инфекций, вызванных облигатными анаэробами (спорообразующими и неспорообразующими). Особенности морфологических, культуральных, биохимических свойств клостридий и бактероидов. Факторы патогенности возбудителей анаэробной инфекции и их значение в патогенезе инфекционного процесса (токсины, ферменты патогенности, капсулообразование).
Принципы лабораторной диагностики раневых инфекций, вызванных спорообразующими и неспорообразующими облигатными анаэробами: применяемые методы, особенности забора материала, его транспортировки, способы создания бескислородных условий, особенности культивирования облигатных анаэробов.
Специфическая профилактика и терапия раневой анаэробной инфекции и столбняка.
Методические рекомендации для преподавателей.
Преподаватель обсуждает со студентами теоретический материал по теме занятия, сопровождая его решением ситуационных задач по разделу «Раневые, гнойно-воспалительные, гнойно-септические инфекции» (см. методическое пособие, с. 106) – 60 мин.
Следует остановиться на биологических свойствах облигатных анаэробов (спорообразующих и неспорообразующих) - возбудителей раневых инфекций, разобрать схему выделения чистой культуры облигатных неспорообразующих анаэробов, особенностях микробиологической диагностики раневой анаэробной инфекции и столбняка.
Обратить внимание студентов на особенности специфической профилактики и лечения столбняка и газовой гангрены.
Перерыв -15 мин.
После перерыва студенты приступают к самостоятельной работе – 65 мин.
В конце занятия студенты приводят в порядок рабочие места и проводят влажную уборку помещения – 10 мин.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ.
1. Промикроскопировать готовые мазки из чистых культур клостридий и бактероидов (окраска по Граму).
Микроскопические картины зарисовать и описать в альбоме.
2. Изучить демонстрации роста клостридий и бактероидов на питательных средах:
- среда Вильсон-Блер (выделение сульфитредуцирующих клостридий)
- КАБ (кровяной агар для бактероидов).
3. Изучение дифференциальных признаков по системе API 20-A.
Выделить главные отличительные признаки клостридий и бактероидов.
Описать биохимические тесты, используемые в системе API 20 - А для идентификации клостридий и бактероидов до видов.
4. Составить схему микробиологической диагностики раневых инфекций, вызванных неспорообразующими облигатными анаэробами:
материал для исследования...
бактериологический метод...
а) транспортировка материала, транспортные среды...
б) этапы исследования…
в) схема идентификации ...
5. Заполнить таблицу:
Биопрепараты, применяемые для диагностики, профилактики и терапии
раневой анаэробной инфекции и столбняка. _____________
Название препарата Состав Способ получения Применение
ОСНАЩЕНИЕ ЗАНЯТИЯ.
Таблицы «МБД газовой гангрены».
Готовые мазки из чистых культур:
CI. perfringens -10 шт.
Bacteroides - 10 шт.
Демонстрации питательных сред:
транспортная среда - 1 пробирка
среда Вильсон - Блер - 1 пробирка
среда КАБ - 1 чашка
4. Анаэростат.
Дифференциальная система API 20-A:
идентификация CI. perfringens
идентификация CI. tetani
идентификация Bacteroides fragilis
Таблицы «Дифференциальные признаки облигатных спорообразующих и неспорообразующих анаэробов».
Биопрепараты – 1 набор.