27. Профилактика вирусных заболеваний.

28. патогенез вирусных болезней на клеточном уровне Патогенез любой вирусной инфекции завершается общим поражением организма, а начинается он на клеточном уровне, что обусловлено облигатным внутриклеточным паразитизмом вирусов.

Цитопатический эффект вируса– специфическая морфологическая деструкция и функциональная патология клеток, культивируемых вне организма, вызванная заражением их цитопатогенными вирусами. Различают три типа ЦПД:

• цитолитический – характеризуется лизисом клеток. Дегенерирующие клетки отслаиваются от стекла, через 20-26 ч культура представляет собой сеть синцитиальных элементов, а через 48 ч на стекле сохраняются единичные веретенообразные и отростчатые клетки;

• трансформирующий – не вызывает гибели клеток, а дает им способность к неограниченному размножению;

• индуктивный – характеризуется способностью инфицированных клеток продуцировать интерферон.

ЦПД зависит от вида вируса и чувствительности к нему культуры клеток. Образование симпластов идет по двум основным механизмам:

• разрушение клеточных стенок и слияние близлежащих клеток (с участием ферментов внешних оболочек вирусов, например нейраминидазы);

• амитоз без деления цитоплазмы.

ЦПД преимущественно связано с повреждением клеточных оболочек энзимами вирусов. Нейтрализация ЦПД специфической сывороткой – важный диагностический метод, позволяющий идентифицировать вирус, индуцирующий ЦПД.

При ряде вирусных инфекций в клетках появляются характерные для данного заболевания клеточные включения. Их обнаружение имеет диагностическое значение (бешенство, оспа, аденовирусы и др.). Включения могут локализоваться в цитоплазме или ядре, а по своей природе быть либо скоплениями вирионов, либо продуктом реакции клетки на вирусную инфекцию.

29 Лаб. Животные и их использование

30. методы выделения и идентификации вирусов. Исследуемым материалом служат кровь, моча, смыв со слизистой носоглотки и т.д.Материал обрабатывается в течение 1,5 – 2 часов антибиотиком широкого спектра действия для уничтожения сопутствующей микрофлоры. Для того, чтобы убедиться, что сопутствующая микрофлора погибла, по окончании инкубации исследуемого материала с антибиотиком, делают из этой смеси посев в пробирку с МПА и посев помещают в термостат на 24 часа при 37 градусах.О присутствии вирусов при культивировании их в куриных эмбрионах судят по гибели эмбриона (вирус энцефалита), образованию бляшек на хорион-аллантоисной оболочке (вирусы натуральной и обезьяньей оспы), накоплению гемагглютининов в аллантоисной жидкости или тканях (вирус гриппа), накоплению инфекционного вируса (полиовирус).Идентифицируют вирус по антигенной структуре. Для этого пробирку с культурой ткани, в которой обнаружено присутствие вируса, подвергают трехкратному замораживанию и оттаиванию (жидкий азот и теплая вода) для разрушения тканевых клеток и освобождения из них вирионов. После этого пробирки помещают в центрифугу и центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 минут. Осколки тканевых клеток оседают на дно, а в надосадочной жидкости во взвешенном состоянии находятся вирионы.

31. методы культивирования вирусов в лаборатории. Для культивирования вирусов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чувствительных лабораторных животных.

32. хранение и поддержание вирусных штаммов в лаборатории. ПАССАЖ ВИРУСА, проведение микроба (resp. вируса) через организм восприимчивого животного с целью усиления вирулентности; метод впервые предложен Пастером. Животное заражается микробом; затем его убивают или оно гибнет, и из его органов выделяют чистую культуру, вновь заражая ею новое животное и повторяя эту процедуру любое число раз. Можно пассировать также органы, заражая животное культурой микроба и вводя новым животным эмульсию органов зараженного. Чистая культура выделяется только после известного числа пассажей