2.Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива¬ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Адсорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома.

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микро¬организмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор-мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфичностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси¬нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти¬тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи¬ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на¬груженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри¬цательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак¬терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров-ными краями.

3.Менингококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение. Менингококковая инфекция – инфекционная болезнь, вызываемая Neisseria meningitidis, проявления которой варьируют от бессимптомного носительства до тяжелейших менингеальных форм. Возбудитель впервые подробно изучен в 1887 г. А.Ваксельбаумом. Таксономия. Возбудитель относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria. Морфология и тинкториальные свойства. Менингококки – мелкие диплококки (0,6-0,8 мкм). Характерно расположение их в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Менингококки неподвижны, спор не образуют, грамотрицательны, капсула непостоянна, имеют пили.

Культивирование. Аэробы культивируют на средах, содержащих нормальную сыворотку либо Дефибринированную кровь барана или лошади, а также на селективной среде с ристомицином. Повышенная концентрация СО2 стимулирует рост менингококков.

Антигенная структура. По капсульным антигенам менингококки делятся на основные серогруппы А, В, С, D и дополнительные X, Y, Z, W-135, 29Е. По антигенам клеточной стенки позволяют разделить менингококки на серовары (1, 2, 3 и т.д.). Во время эпидемических вспышек обычно циркулируют менингококки группы А. Токсин менингококков представляет собой ли-пополисахарид клеточной стенки. Его количество определяет тяжесть течения заболевания. Резистентность. Менингококки малоустойчивы в окружающей среде, чувствительны к высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибают при температуре выше 50ºС и ниже 22ºС; чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам; чувствительны к 1 % раствору фенола, 0,2 % раствору хлорной извести, 1% раствору хлорамина.

Патогенез и клиническая картина. Человек – единственный естественный хозяин менингококков. Носоглотка является входными воротами инфекции. Здесь бактерии могут длительно существовать, не вызывая воспаления (носительство), но иногда становятся причиной назофарингита. Из носоглотки они могут попасть в кровяное русло (менингококкемия) с развитием лихорадки и геморрагической сыпью. Наиболее частым осложнением менингококкемии является менингит или менингоэнцефа-лит (воспаление мозговых оболочек).

Иммунитет. Достинфекционный иммунитет при генерализованных формах болезни стойкий, напряженный. Микробиологическая диагностика. Для лабораторной диагностики исследуют кровь, спинномозговую жидкость, слизь с носоглоточных тампонов. При микроскопическом исследовании осадка центрифугированной спинномозговой жидкости и мазков из зева видны типичные нейссерии внутри нейтрофилов или вне-клеточно. Посев материала производят сразу после взятия на кровяной агар (шоколадный агар), агар с ристомицином (или линкомицином), среду Мартена – агар с антибиотиками (ВКН – ванкомицин, колистин, нистатин). Инкубацию проводят в атмосфере, содержащей 5 % углекислого газа. Лечение. В качестве этиотропной терапии используются антибиотики: пенициллин, левомицетин, рифампицин. Профилактика. Разработана менингококковая химическая по-лисахаридная вакцина, которая проходит апробацию.

№14

1.Структура и химический состав бактериофага. Бактериофаги - группа вирусов, паразитирующих в бактериальных клетках. Внешне большинство бактериофагов напоминают сперматозоиды или головастиков, но среди них встречают и другие формы.Структура бактериофага:1)нуклеиновая кислота 2)головка бактериофага 3)полипептидные субъединицы(кубический тип) 4)полый стержень 5)отросток 6)полипептидные еденицы 7)чехол(сокращается) 8)шестиугольная базальная пластинка 9)зубцы, нити.Головка Т-фагов образована из однотипных субъединиц, организованных по принципу кубической симметрии, и может достигать размеров 100 нм. Капсомеры головки состоят из белковых молекул, построенных преимущественно из аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также лизина. Содержание белка и ДНК в головке примерно одинаково. Геном большинства фагов образует спирально упакованная двойная нить ДНК. Число фагов, содержащих одноцепочечную молекулу ДНК или РНК, незначительно. У некоторых фагов (например, Т2) в головке находится внутренний белок, содержащий полиамины (спермин и путресцин) и обеспечивающий суперспирализацию большой молекулы ДНК. В таком виде она может упаковываться сравнительно небольшом объёме. В составе фаговой ДНК обнаружены необычные азотистые основания (например, оксиметилцитозин). Хвост Т-фагов Он включает поль - стержень (сконструирован по принципу спиральной симметрии) и сократительный чехол, присоединяющийся к воротничку, окружающему стержень около головки. Чехол образован 120-140 белковыми молекулами, каждая из которых связывает одну молекулу АТФ и ионы Са2+. В дистальном отделе стержня расположена шестиугольная базальная пластина с шестью шипами шестью нитями (фибриллами). У чётных фагов (например, у Т2) окончания фибрилл опущен вниз, а у нечётных — загнуты вверх. У некоторых Т-фагов в дистальной части хвоста находит лизоцим (эндолизин).

2.Аутоиммунные процессы - это такие состояния, при которых происходит выработка аутоАТ (или накопление клона сенсибилиз.лимфоцитов к АГ собственных тк. орг-ма). Когда аутоиммунные мех-мы вызывают нарушение стр-ры и функций органов и тк., говорят об аутоим.агрессии и аутоим.заб. Мех-мы иммунного повреждения тк. аналогичны иммунным повреждениям, индуцированным экзоаллергенами- по типу ГЗТ и ГНТ. Выделяют 3 механизма индукции аутоиммунного ответа(аутосенсибилизации):1)образование аутоАГ, 2)возникновение/депрессия клонов Т и B-лимф-в, несущих R к детерминантам собственных тк.(отмена толерантности)3)размножение в организме м/о, содержащих перекрестно реагирующие АГ. Аутоиммуный ответ может развиваться в рез. иммунизации собственными АГ и организма, к котором не выработалась толерантность(или она утрачена). В рез. Им.система при контакте с аутоАГ реагирует с ними как с чужеродными. Утрата естественной им.толерантности к опред.АГ может быть следствием:1)антигенной стимуляции модифицированными или перекрестно реагирующими антигенами.2)нарушения иммунорегуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов.Аутоиммунизация возможна под действием перекрестно реагирующих антигенов,которые обнаружены у многих бактерий и вирусов.При попадании в организм они распознаются соответствующими клонами Т-хелперов,которые активируют B-лимфоциты к иммунному ответу.Следствием этого может явиться аутоагрессия.При инфекциях и некоторых деструктивных процессах в клетках организма могут обнажаться (десквамироваться)ранее скрытые антигенные детерминанты ,против которых начинается аутоиммунный процесс.Аутоиммунные процессы могут возникать при первичных изменениях в иммунной системе –при лимфопролиферативных заболеваниях(лейкозах).При этом происходит репродукция “запрещенного “клона лимфоцитов

3.Стрептококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение. Таксомия: сем. Streptococcaceae, род Streptococcus, включающему патогенные виды: Strept-cus pyogenes,Streptococcus pneumoniae.Существуют

3 классификации стр-ков: 1.По гемолитическим свойствам на агаре с кровью барана различают: -альфа-гемолитические стрептококки («зеленящие»), вызывающие неполный гемолиз, позеленение среды;бета-гемолитические стрептококки (полный гемолиз); негемолитические стрептококки (гамма-стрептококки, не дающие видимого гемолиза, например, S.salivaris)

2. По биохимическим свойствам: S.pyogenes, S.agalactiae, S.intermedius, S.viridans, S.sangues, S.mitis и др.

3.По антигенным свойствам полисахаридов (по Лэнсфильд):серогруппы A-V (A, B, C, D, F, G и др.)группа «зеленящих» стрептококков,серогруппы состоят из сероваров, различающихся белковыми антигенами (М-белок, Т-белок, F-белок). Характеристика: грам(+) кокки неправильной округлой формы, располагающиеся в виде цепочек или попарно, размером 0,5-2,0 мкм. Неподвижны, спор не имеют, некоторые образуют капсулу. Факультативные анаэробы, отдельные представители - облигатные анаэробы.Культивирование и ферментативные свойства. Стрептококки являются факультативные анаэробами; капнофилы; некоторые –микроаэрофилы, предпочитают анаэробные условия. Растут в интервале температур 25-45⁰С; оптимум – 37⁰. Питательные потребности сложные. Растут на сложных питательных средах с добавлением крови, сыворотки, асцитической жидкости, углеводов,На кровяном агаре образуют мелкие полупрозрачные колонии. На сахарном мясо-пептонном бульоне стрептококки растут пристеночно и придонно в виде мелкокрошковатого осадка. Среда остается прозрачной. Обладают сахаролитическими свойствами, разлагают с образованием кислоты лактозу, сахарозу, глюкозу.Антигенная структура. поверхностно расположенный полисахарид , различная структура которого дала возможность Лэнсфилду разделить стрептококки на 20 серологических групп (от А до V).. М-антиген является строго специфическим, обусловливает вирулентность стрептококков и подавляет фагоцитарную активность лейкоцитов. Этот антиген устанавливается в реакции преципитации. При определении сероваров с помощью реакции агглютинации обнаруживают Т-антиген, который может быть общим у разных сероваров. .Факторы патогенности:1)Белок М- главный фактор;2) Капсула3) С5а - пептидаза - ;4)трептококки выделяют экзотоксины, обусловливающие общую, интоксикацию и специфическое действие: эритрогенин (при скарлатине) , стрептолизин,, лейкоцидин. Ферменты, продуцируемые стрептококками (гиалуронидаза, стрептокиназа, дезоксирибонуклеаза, протеиназа), являются ферментами агрессии, облегчают проникновение и распространение микробов в тканях.Резистентность. К действию физических факторов стрептококки относительно устойчивы. Нагревание при 60 °С выдерживают в течение 30 мин. Хорошо переносят высушивание и могут месяцами сохранять жизнеспособность в высохшем гное, мокроте. Под действием дезинфицирующих веществ погибают в течение 15 мин.Входными воротами инфекции являются миндалины, лимфоидная ткань верхних дыхательных путей, поврежденная кожа. Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат слизь с миндалин, гной, экссудат, моча, кровь. Основным методом диагностики стрептококковых инфекций является выделение чистой культуры стрептококков. Исследуемый материал, кроме крови, засевают в чашки Петри с 5% кровяным агаром. . Источником инфекции при стрептококковых заболеваниях является только человек — больной или носитель патогенных стрептококков. Основной путь передачи воздушно-капельный; возможна передача через предметы, загрязненные больным, а также через третьих лиц, соприкасавшихся с больным. Специфическое лечение и профилактика. проводится препаратами группы пенициллина благодаря сохранившейся чувствительности к этому антибиотику и высокой активности его в отношении стрептококка. Другие антибиотики применяются в случае непереносимости пенициллина.

Билет №15