2 курс / Гистология / Книжки и сборники / OBSchAYa_I_ChASTNAYa_gistologia4

РАЗДЕЛ 1. Микроскопческая техника

А.В. АЗНАУРЯН, К.Т. СААКЯН, М.Р. ТАТОЯН

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

Учебное пособие для иностранных студентов, обучающихся на русском языке

Под редакцией доктора медицинских наук Артищевой М.Ю.

ЕРЕВАН ЕрГМУ им. М. Гераци

2011

1

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

1. Микроскопческая техника

УДК 611.01810 ББК 28.86я7 А356

A 356 Общая и частная гистология: Учебное пособие для иностранных студентов, обучающихся на русском языке/А.В. Азнаурян, К.Т. Саакян, М.Р.

Татоян; Ред. М.Ю. Артищева. – Е.: Идз-во ЕрГМУ им. М. Гераци, 2011. – 237с.

Структура и содержание учебного пособия максимально привязаны к процессу изучения соответствующего курса, что делает его очень удобным для студентов и преподавателей. Материал изложен, с одной стороны, четко

икратко, а с другой – полно и в тесной связи со смежными дисциплинами (анатомией, физиологией, биохимией).

Текст богато иллюстрирован, содержит много цветных схем, рисунков

иснимков препаратов, которые для лучшего восприятия учебного процесса расположены по тексту.

Пособие предусмотрено для иностранных студентов ЕрГМУ, обучающихся на русском языке.

УДК 611.01810 ББК 28.86я7

2

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

РАЗДЕЛ 1. Микроскопческая техника

СОДЕРЖАНИЕ

Раздел 1. Микроскопическая техника

ТЕМА 1. Устройство микроскопа ТЕМА 2. Приготовление гистологического препарата

Раздел 2. Общая гистология

ТЕМА 3: Кровь, мезенхима ТЕМА 4: Собственно соединительные ткани и их специальные

виды ТЕМА 5: Скелетные соединительные ткани

ТЕМА 6: Мышечные ткани ТЕМА 7: Нервная ткань

ТЕМА 8: Эпителиальнaя ткань

Раздел 3. Частная гистология

ТЕМА 9: ПИЩЕВАРИТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА ТЕМА 10: ВЫДЕЛИТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА ТЕМА 11: МУЖСКАЯ ПОЛОВАЯ СИСТЕМА ТЕМА 12: ЖЕНСКАЯ ПОЛОВАЯ СИСТЕМА ТЕМА 13: НЕРВНАЯ СИСТЕМА ТЕМА 14: ОРГАНЫ ЧУВСТВ ТЕМА 15: ЭНДОКРИННАЯ СИСТЕМА

ТЕМА 16: СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТАЯ СИСТЕМА ТЕМА 17: ДЫХАТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА ТЕМА 18: КОЖА И ЕЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ТЕМА 19: ОРГАНЫ КРОВЕТВОРЕНИЯ

3

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

1. Микроскопческая техника

РАЗДЕЛ 1

Микроскопическая техника

Основные инструменты, используемые в гистологии, - это микроскопы (световые и электронные).

Поэтому в разделе рассматриваются техника

гистологического исследования и методы приготовления гистологических препаратов.

ТЕМА 1. Устройство микроскопа ТЕМА 2. Приготовление гистологического препарата

4

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

РАЗДЕЛ 1. Микроскопческая техника

Устройство микроскопа

Световой микроскоп имеет три системы: оптическую, осветительную и механическую.

1. Оптическая система микроскопа включает объектив и окуляр.

Объектив (5) – это система линз, которая присоединяется к тубусу (7) снизу и непосредственно направляется на объект. Обычные увеличения объектива: x8, x20, x40 (сухие объективы), х90 (иммерсионный объектив).

Окуляр (6) вставляется в тубус сверху. Применяются окуляры с увеличением x7, x10, x15.

Результирующее увеличение микроскопа – это произве-

дение увеличений объектива и окуляра, например: 20х10=200 раз.

Таким образом, функция оптической системы – формирование увеличенного изображения объекта на сетчатке глаза наблюдателя.

2.Осветительная система микроскопа включает источник света, зеркало, диафрагму и конденсор.

Источник света (1) может быть встроен в микроскоп либо находиться вне микроскопа.

Зеркало (2) собирает лучи от источника и направляет их на препарат снизу.

Диафрагма (3) представляет собой систему непрозрачных пластинок с отверствием посередине. Она ограничивает световой поток, падающий на препарат.

Конденсор (4) состоит из линз, которые фокусируют лучи света на препарате. Поднимая и опуская конденсор (с помощью винта), можно настраивать фокусировку лучей. Иногда диафрагма вмонтирована в конденсор.

3.Механическая система микроскопа – тубус (7), шта-

тив (8), колонка (9) и предметный столик (10).

С колонкой связаны макро- и микрометрическиe винты.

5

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

1. Микроскопческая техника

Они поднимают и опускают колонку с тубусом для фокусировки изображения объекта на сетчатке глаза наблюдателя.

Предметный столик на многих микроскопах может перемещаться в горизонтальной плоскости, что позволяет рассматривать различные участки препарата.

Осветительная система

1 – источник света

2 – зеркало

3 – диафрагма

4 – конденсор

Оптическая система

5 – объектив

6 – окуляр

Механическая система

7 – тубус

8 – штатив

9 – колонка

10 – предметный столик

Приготовление гистологического препарата

По способу приготовления различают следующие виды гистологических препаратов: срезы тканей органов (толщиной от 5 мкм и более); мазки (крови, костного мозга и т.д.) и

отпечатки (например, селезенки); пленочные или тоталь-

ные препараты (брюшины, мягкой мозговой оболочки). Чаще всего используются срезы. В этом случае приготовление препарата включает шесть этапов:

1. Взятие и фиксация материала

Из исследуемого органа вырезают небольшие кусочки (0.5х1х1см) и погружают их в фиксатор (формалин, метанол и др.) – обычно на 24ч.

Фиксация производится для предупреждения процессов аутолиза (самопереваривания) тканей. Это достигается путем денатурации (коагуляции) белков фиксирующим агентом. После фиксации образцы промывают проточной водой в течение нескольких часов (для удаления остатков фиксатора).

6

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

РАЗДЕЛ 1. Микроскопческая техника

2. Обезвоживание (дегидратация)

Предварительно образцы обезвоживают (иначе гидрофобный уплотнитель не сможет проникнуть в ткань). Для этого их “проводят” по батарее растворов этилового спирта с возрастающей концентрацией: 70%, 80%, 96% и 100% - до 24ч ( в зависимости от размеров образца) в каждом растворе.

3. Уплотнение (заливка в парафин)

Образцы помещают в смесь ксилол-парафин, затем – в жидкий парафин на 1-2 ч при 52-56ОС; дают парафину, остывая, затвердеть; вырезают из него блок с заключенным образцом и закрепляют на деревянном кубике.

4. Приготовление срезов

Кубики вставляют в объектодержатель специального прибора – микротома, используемого для приготовления срезов. Микротомный нож направляемый под углом к поверхности парафинного блока срезает с него тонкий слой – срез заданной толщины. Срезы помещают на поверхность теплой воды для их расправления, а затем – на предметное стекло.

5. Окрашивание срезов

Перед окрашиванием образцы освобождают от парафина, “проводя” по батарее растворителей: ксилол, этиловый спирт

100% -80%-60%, вода (по 2-5 мин.).

Применяемые в гистологической технике красители подразделяют на 4 типа: кислые, основные, нейтральные и индифферентные.

Кислые красители - это кислоты и кислые соли. Наиболее используемые красители данного типа – эозин (имеет яр- ко-розовый цвет) и кислый фуксин. Структуры, имеющие сродство к кислым красителям и поэтому окрашиваемые ими, называются оксифильными. В таких структурах должны содержаться основные группы. Как правило, оксифилией отличаются белки.

Основные красители - эти красители по своей химичес-

7

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

1. Микроскопческая техника

кой природе являются основными солями. К ним, в частности,

относят гематоксилин, толуидиновый синий и кармин.

Структуры, красящиеся основными красителями, называются базофильными. Это структуры, богатые органическими кислотами – ядра и рибосомы клеток (содержат много нуклеиновых кислот), а также аморфный компонент межклеточного вещества (содержит гиалуроновую кислоту и ряд других кислых субстратов).

Нейтральные красители - это смеси основного и кислого красителей. Каждый из этих компонентов окрашивает “свои” структуры. Но есть и структуры, называемые нейтрофильными, которые окрашиваются сразу обоими веществами (например, специфические гранулы нейтрофильных лейкоцитов).

Индифферентные красители - это красители, имеющие гидрофобную природу. Они являются водонерастворимыми и липофильными – судан III, судан IV. Проникая в клетки, судан III растворяется в жировых и липидных каплях (если таковые имеются) и тем самым окрашивает их в ярко-оранжевый цвет.

Окраска гематоксилином и эозином - это наиболее распространенный способ окраски. В нем используется основной и кислый красители. Поэтому выявляются почти все клетки и многие неклеточные структуры. Причем:

-ядра клеток, благодаря своей базофилии, окрашиваются гематоксилином в фиолетовый цвет,

-цитоплазма, проявляя оксифилию, красится эозином в розовый цвет.

6.Заключение срезов в консервирующую среду

Окрашенный препарат опять обезвоживают (проводя по батарее спиртовых растворов с возрастающей концентрацией), затем просветляют (в карбол-ксилоле и ксилоле) – для удаления лишней краски. На препарат наносят каплю консервирующей среды (например, канадского бальзама) и накрывают покровным стеклом. При этом указанная среда должна иметь такой же коэффициент преломления света, как и стекло.

8

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

РАЗДЕЛ 2. Общая Гистология

РАЗДЕЛ 2

Общая гистология

Во взрослом организме клетки и образуемые ими компоненты межклеточного вещества составляют различные ткани.

Общая гистология – это учение о строении, развитии и жизнедеятельности тканей организма.

По указанным в определении трем признакам (морфологии, происхождению и функции) различают четыре основные группы тканей: эпителиальные ткани (покровные и железистые эпителии), ткани внутренней среды организма (кровь и кроветворные ткани, а также соединительные ткани), мышечные ткани и нервную ткань.

ТЕМА 3: Кровь, мезенхима ТЕМА 4: Собственно соединительные ткани и их специальные

виды ТЕМА 5: Скелетные соединительные ткани

ТЕМА 6: Мышечные ткани ТЕМА 7: Эпителиальнaя ткань ТЕМА 8: Нервная ткань

9

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ

РАЗДЕЛ 2. Общая Гистология

МЕЗЕНХИМА

Мезенхима (эмбриональная соединительная ткань) образуется в основном в процессе гаструляции из внезародышевой мезодермы. Она располагается между зародышевыми листками и осевыми органами и состоит из рыхло расположенных малодифференцированных клеток и гомогенного межклеточного вещества. Из нее образуются:

-Кровь и лимфа

-Соединительные ткани

-Гладкая мышечная ткань

-Микроглия нервной ткани

КРОВЬ

Функции крови: транспортная, дыхательная, трофическая, защитная, гомеостатическая - поддержание постоянства внутренней среды организма.

Как и все ткани внутренней среды, кровь состоит из:

Белки плазмы крови продуцируются в основном клетками печени и выполняют важные функции:

•определяют онкотическое давление и вязкость крови,

•выполняют защитную и транспортную функции,

•участвуют в коагуляции крови.

10

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ГИСТОЛОГИЯ