Дослід 1. Визначення кількості гемоглобіну в крові

Мета роботи. Оволодіти методикою визначення гемоглобіну крові.

Матеріали та обладнання. Гемометр Салі, 0,1 n розчин HCl, піпетки, вата, спирт, настойка йоду, кров, стратифікатор, годинникове скло, дистильована вода.

Рис. 38. Гемометр Салі

1 - штатив гемометра,

2 - запаяні пробітки зі стандартним розчином солянокис-лого гематину,

3 - градуйована пробірка,

4 - піпетка для вимірювання крові.

Хід роботи: В градуйовану піпетку гемометра Салі (рис. 30) налити до відмітки з цифрою 2 (10) 0,1 n розчину HCl. Кров, отриману шляхом проколу крайової вушної вени кролика, насисати в капілярну піпетку до відмітки 02 мм. Опустити капіляр на дно градуйованої пробірки і обережно видути з нього кров так, щоб верхній шар 0,1 n розчину HCl залишався прозорим. Не виймаючи капіляр із розчину, 2-3 рази промити його 0,1 n розчином HCl з верхнього шару. Вийняти капіляр з пробірки, старанно перемішати її вміст скляною паличкою і поставити в штатив на 5 хвилин. Утворений соляно - кислий гематин надає гемолізованій крові коричневий відтінок. Після закінчення вказаного часу до розчину краплинами додають дистильовану воду до отримання рівного однакового забарвлення за стандартом, помішуючи скляною паличкою.

Поділка на шкалі, до якої піднялася рідина, показує кількість гемоглобіну в грам-відсотках і в одиницях Салі. Перерахунок з однієї шкали на іншу дуже простий, наприклад: 15г% 6=90од., 75од:6=12,5г%.

Дослід 2. Одержання кристалів геміну і гемоглобіну

Мета роботи. Ознайомитися і оволодіти методикою отримання кристалів геміну і гемоглобіну.

Матеріали та обладнання. Морська свинка, або кролик, кров коня, мікроскоп, водяна баня, термометр, пробірки, предметні і покривні скельця, скляна паличка, канадський чи піхтовий бальзам, сірчанокислий амоній (насичений розчин), дистильована вода, льодяна оцтова кислота, NaCl кристалічний.

Хід роботи.

1. Отримання кристалів геміну. Краплю крові нанести на предметне скельце, додати до неї одну краплю оцтової кислоти і кристалик NaCl, нагріти до появи пари, після чого препарат обережно підсушити біля полум’я горілки.

Замалювати мілкі кристалики солянокислого геміну, які мають вигляд ромбиків, які часто з’єднуються у вигляді хрестів (рис. 39).

2. Отримання кристалів гемоглобіну:

Перший спосіб. На предметне скельце нанести краплину свіжої крові з вуха морської свинки і краплину піхтового бальзаму. Перемішати скляною паличкою і накрити покривним скельцем. Через 5-10 хвилин помістити препарат під мікроскоп і розглядати його спочатку при малому, а потім при великому збільшенні. Замалювати утворені кристали гемоглобіну вишнево червоного кольору.

Рис. 39. Кристали геміну

Другий спосіб. В пробірку налити 1 мл свіжої крові морської свинки. Поставити пробірку у водяну баню при 60°С і декілька разів струсити пробірку. Через 5-10 хвилин настає гемоліз, кров стає прозорою і в ній починається кристалізація гемоглобіну. Скляною паличкою краплю крові нанести на предметне скельце, накрити її покривним скельцем і розглянути під мікроскопом кристали гемоглобіну.

Третій спосіб. В пробірку налити 1 мл крові коня, додати 2 мл води, вміст змішати з рівною кількістю сірчанокислого амонію і поставити пробірку в штатив на 10-20 хвилин. Розглянути і замалювати кристали гемоглобіну.