63.Реакция лизиса (рл)

Одним из защитных свойств иммунной сыворотки является ее способность растворять микробы или клеточные элементы, поступающие в организм.

Специфические антитела, обуславливающие растворение (лизис) клеток, называются лизинами. В зависимости от характера антигена они могу быть бактериолизинами, цитолизинами, спирохетолизинами, гемолизинами и др.Лизины проявляют свое действие только в присутствии дополнительного фактора – комплемента.

Комплемент, как фактор неспецифического гуморального иммунитета, обнаружен почти во всех жидкостях организма, кроме спинномозговой жидкости и жидкости передней камеры глаза.Комплемент – это сложная система сывороточных протеинов. Комплемент способствует лизису микробных клеток и эритроцитов.

Различают реакцию бактериолиза и гемолиза.

Суть реакции бактериолиза состоит в том, что при соединении специфической иммунной сыворотки с соответствующими ей гомологичными живыми микробными клетками в присутствии комплемента происходит лизис микробов.

Реакция гемолиза состоит в том, что при воздействии на эритроциты специфической, иммунной по отношению к ним сывороткой (гемолитической) в присутствии комплемента, наблюдается растворение эритроцитов, т.е. гемолиз.

Реакция гемолиза в лабораторной практике используется для определения тира комплемента, а также для учета результатов диагностических реакций связывания комплемента «Вассермана».

Титр комплемента – это наименьшее его количество, которое обуславливает лизис эритроцитов в течение 30 минут в гемолитической системе в объеме 2,5мл. Реакция лизиса, как и все серологические реакции происходит в присутствии электролита. 

В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови больных, реконвалесцентов и бактерионосителей используются серологические реакции. Для постановки таких реакций применяются диагностикумы - препараты, содержащие взвесь обезвреженных микроор-ганизмов или определенные антигены. Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций связана не только с явным их преимуществом перед живыми культурами микробов (безопасность в работе), но еще и потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувствительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные свойства. Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего используются химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко. В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной гемагглютинации, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы. Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации. Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с ад-сорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., при-меняют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные антителами. Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации. В настоящее время в лабораториях используются следующие диагноста кумы. 1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Применяется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных. 2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-аптител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглютинации с сывороткой больных. 3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Используются в реакции агглютинации для определения заболевания в прошлом (анамнестическая реакция агглютинации) и реже с диагностической целью. 4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции агглютинации при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства. 5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных фенолом), подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона. 6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллеэной инфекции. 7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенсибилизированные очищенным Vi-антигеиом S. typhi, применяется в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства. 8. Гриппозный диагностикум представляет собой аллантоисную жидкость инфицированных вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и инактивированную мертиолатом или формалином. Диагностикумы необходимы при постановке РТГА с парными сыворотками больных для уточнения клинического диагноза и циркулирующего типа вируса гриппа. 9. Диагностикум вируса клещевого энцефалита получают из суспензии мозга белых мышей, зараженных вирусом клещевого энцефалита. Суспензию подвергают центрифугированию (для осветлення) и инактивируют химическими веществами. Диагностикум используется в РТГА и РСК с сывороткой больных при диагностике заболевания.

65. Состояние повышенной чувствительности организма на повторное воздействие антигена называется аллергией. Состояние аллергии наступает через 2-3 недели после заражения и особенно легко выявляется при болезнях с хроническим течением, сопровождающихся премуницией (при сапе, туберкулезе, бруцеллезе), т. е. инфекционным нестерильным иммунитетом. Аллергия возникает на повторное внедрение аллергена. Аллергены – это антигены, на которые в организме возникает аллергическая реакция. Аллергены могут иметь различное происхождение: 1) бытовыми; 2) лекарственными; 3) животного происхождения; 4) растительными; 5) пищевыми; 6) инфекционными. В основе аллергии могут лежать гуморальный и клеточный иммунный ответ. По механизмам и клиническим проявлениям выделяют четыре типа аллергии.

1. Анафилактический. Образуются комплексы АГ – АТ, которые фиксируются на различных клетках-мишенях, тучных клетках, базофилах, сенсибилизируя их к соответствующему аллергену. При повторном попадании аллергена в организм происходит выделение медиаторов аллергии. Анафилактический шок Развивается при повторном введении сыворотки и других препаратов. Первое введение аллергена называют сенсибилизирующим. Через 1-3 недели после него в организме накапливаются анафилактические антитела, которые адсорбируются на клетках (тучных, базофилах) Вторую инъекцию называют разрешающей. Вновь введенный препарат взаимодействует с анафилактическими антителами на поверхности клеток. Это приводит к повреждению клеток, из них выделяются биологически-активные вещества: гистамин, серотонин, брадикинин и др., принимающие участие в развитии шока. Шок у человека связан с резкими перепадами артериального давления.  2. Цитотоксический. При повторной сенсибилизации образующийся комплекс АГ – АТ ведет к цитолизу – гибели собственных клеток.( Сывороточная болезнь) 3. Иммунокомплексный. При повторном введении антигена избыток комплекса АГ – АТ приводит к мощной активизации комплемента.(Феномен артюса) 4. Клеточный. В его основе преобладает клеточный иммунный ответ. За развитие реакции ответственны Т-киллеры. Развивается гиперчувствительность замедленного типа. Лежит в основе инфекционной аллергии. Атопии. Это повышенная чувствительность к веществам пищевого, растительного и лекарственного происхождения, у лиц с наследственной предрасположенностью. Вещества, вызывающие атонии, обычно являются простыми гаптенами, реже сложными гаптенами или полноценными антигенами. Они вызывают в организме выработку иммуноглобулинов Б, аинтител-реагинов, обладающих способностью фиксироваться на клетках кожи и слизистых Инфекционный аллерген – слабый аллерген, состояние аллергии развивается только в его присутствии.

Инфекционная аллергия развивается: 1) при хронической форме дизентерии, гонореи, туберкулезе, в третичном периоде сифилиса; при этом образуются гуммы – опухолеподобные разрастания лимфоидной ткани; 2) при особо опасных инфекциях: чуме, сибирской язве, туляремии, бруцеллезе; 3) при глубоких микозах; 4) в период реконвалесценции при тифопаратифозных заболеваниях. При ряде инфекций может быть использован аллергологический метод диагностики, 1) при туберкулезе – проба Манту с туберкулином; 2) при хронической форме дизентерии – проба Цуверкалова;

66.Анафилаксия  при вакцинации и введении сывороток: а) противовирусные вакцины — соберите анамнез относительно гиперчувствительности к белкам куриных яиц; б) анатоксины (напр. противостолбнячный, антидифтерийный, антиботулинический или против яда змей) — применяйте человеческие сыворотки; если это невозможно, а вы подозреваете аллергию, применяйте сыворотку животных, предварительно используя или антигистаминный препарат, или ГКС п/о либо в/в; в) при аллергодиагностике — отдайте предпочтение prick-тестам, а не внутрикожным пробам; больным с аллергией на пыльцу растений не делайте кожных проб во время пыления; провокационные пробы с препаратами, применяемыми внутрь или эндотрахеально, проводите только в стационарных условиях; у пациентов с анафилаксией в анамнезе более предпочтительно определение специфических IgE в сыворотке, чем выполнение кожных проб. По тяжести течения различают 4 степени анафилактического шока: 1 степень (легкая): продолжительность развития — от нескольких минут до 2 ч, характеризуется зудом кожи, гиперемией кожных покровов и сыпи; 2 степень (средней тяжести): средняя степень тяжести анафилактического шока характеризуется наиболее развернутой клинической картиной: токсидермией, отёком Квинке, конъюнктивитом, стоматитом, циркуляторными нарушениями — учащением сердцебиения, болями в сердце, аритмией, понижением АД, приступа бронхиальной астмы с проявлением цианоза, наличием желудочно-кишечного (тошнота и рвота, вздутие живота, отёк языка, боли внизу живота, понос с примесью крови в кале, резкие боли в животе) и почечного (позывы к мочеиспусканию, полиурия) синдромов. 3 степень (тяжёлая): проявляется потерей сознания, острой дыхательной и сердечно-сосудистой недостаточностью (одышка, цианоз, стридорозное дыхание, малый частый пульс, резкое снижение артериального давления, высокий индекс Алговера); 4 степень (крайне тяжёлая): молниеносно развивается коллапс (бледность, цианоз, нитевидный пульс, резкое снижение АД), коматозное состояние (с потерей сознания, непроизвольными дефекацией и мочеиспусканием), зрачки расширены, реакция их на свет отсутствует. При последующем падении артериального давления пульс и АД не определяются, останавливается сердце, прекращается дыхание. 67. Аллергическая реакция II типа или цитотоксический тип аллергической реакции обусловлен эффекторным действием IgG (первых трех подклассов) или IgM, вырабатывающихся к поверхностным антигенам клеток макроорганизма.

А. Причинными аллергенами при этом типе аллергической реакции выступают антигены, вторично связанные с клеточной поверхностью (чаще всего – лекарственные вещества-гаптены, образовавшие с поверхностными белками клеток крови или эндотелия сосудов комплексные аллергены).

Б. Патогенетическая схема развития аллергической реакции II типа заключается в следующем. Антитела, взаимодействуя на поверхности клеток с аллергенами, вызывают активацию на этих клетках комплемента, что служит причиной развития так называемой комплементзависимой цитотоксичности, или обуславливают атаку этих клеток (клеток-мишеней) NK-клетками, обуславливая развития так называемой антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦТ).

1. Активация на поверхности клеток макроорганизма комплемента вызывает гибель этих клеток в результате или комплементзависимого цитолиза или комплиментзависимого фагоцитоза . Комплементзависимый цитолиз наступает как результат множественных повреждений клеточной оболочки сформировавшимися на ней в результате активации комплемента . обусловлен опсонизацией клетки-мишени появившимися на её поверхности активными фракциями системы комплемента, являющимися опсонинами (см. раздел 27). Следует также отметить, что и сами антитела к поверхностным аллергенам клетки-мишени тоже могут играть роль опсонинов, обуславливая тем самым повышенную активность по отношению к этим клеткам макрофагов. Антителозависимая клеточная цитотоксичность, как было сказано выше, обусловлена антителами против поверхностных аллергенов клетки-мишени, адсорбированными на её поверхности. NK-клетки имеющие рецепторы к Fc-фрагментам молекулы иммуноглобулина, вызывают лизим клеток с адсорбированными на их поверхности антителами. 70. Аллергическая реакция этого типа 3 развивается при значительном избытке антигена, что влечёт за собой образование большого количества иммунных комплексов малых и средних размеров, которые обладают токсическим действием. Вследствие этого такой тип аллергической реакции называется иммунокомплексным.. Иммунные комплексы (ИК) могут вызывать воспалительную реакцию и разрушение тканей организма, эти состояния и являются основными патогенетическими механизмами аллергических реакций III типа. Патогенетическая схема развивающейся при этом типе аллергии воспалительной реакции заключается в следующем.

а. Иммунные комплексы откладываются в эндотелии сосудов, в базальной мембране почечных клубочков, в дерме, в других тканях.

б. В местах отложения ИК происходит активация комплемента.

в. Локально, в месте событий, появляются активные фракции комплемента C3a, C3b, C5a, которые и вызывают цепь событий, основные из которых следующие.

1. Повышение проницаемости сосудов.

2. Привлечение в эту зону полиморфноядерных лейкоцитов.

г. Результатом этих событий и является развитие воспалительной реакции.

2. Патогенетическая схема развивающегося при этом типе аллергии разрушения тканей организма заключается в следующем.

а. Иммунные комплексы фагоцитируются.

б. Так как они обладают токсическим действием, то могут повреждать и даже разрушать поглотившие их фагоциты.

в. Выделившиеся из разрушенных фагоцитов протеолитические ферменты вызывают разрушение тканей организма.

В. Клинические проявления иммунокомплексного типа аллергической реакции зависят от места образования иммунных комплексов.

1. При образовании иммунных комплексов в кровотоке оба участника иммунного комплекса – и аллерген и антитело – находятся в плазме крови. Как результат развивается, например, геморрагический васкулит или, другой пример, сывороточная болезнь.

2. При образовании иммунных комплексов в ткани, аллерген тем или иным путём вводится в эту ткань, а антитело – поступает из крови. Типичным клиническим проявлением такой иммунокомплексной аллергической реакции является феномен Артюса, изучаемый в курсе патологической физиологии.

71. Аллергическая реакция IV типа (гиперчувствительность замедленного типа – ГЗТ) или клеточный тип аллергической реакции, в отличие от других типов аллергических реакций развивается без участия антител, в числе прочих эффекторных клеток, активированных макрофагов. Причинными аллергенами ГЗТ наиболее часто выступают антигены полисахаридной природы и низкомолекулярные пептиды.

Б. Патогенетическую схему развития ГЗТ можно представить следующим образом: малые доза аллергена (особенно при внутрикожном его введении) вызывают активацию Т-хелперов первого типа, которые выделяют цитокины (прежде всего – ИЛ-2), активирующие Т-эффекторы ГЗТ и макрофаги.

1. Иммунная активация макрофага – очень важное эффекторное звено ГЗТ. Для такой активации макрофаг должен получить два информационных сигнала.

а. Контактный информационный сигнал – контакт неактивированного макрофага с Т-хелпером первого типа. Такой контакт происходит в результате специфического взаимодействия двух молекул: CD40 на поверхности макрофага и CD40L (т.е. лиганда CD40) на поверхности Тh-1. При этом инфицированный макрофаг имеет больше шансов на контакт с иммунным Т-хелпером, потому что в этом случае их взаимодействие происходит и в результате взаимодействия молекул TCR (на поверхности Т-хелпера) и презентированного антигена (на поверхности макрофага).

б. Дистанционный информационный сигнал – гамма-интерферон, секретируемый не только Т-хелперами первого типа, но и CD8-лимфоцитами (цитотоксическими лимфоцитами, ЦТЛ), а также NK-клетками.

2. Активированный макрофаг резко отличается по своим свойствам и роли, которую он играет в организме, от неактивированного макрофага. Отличительные признаки активированного макрофага можно свести к двум положениям.

а. Активированный макрофаг обладает способностью к завершенному фагоцитозу многих микроорганизмов, в отношении которых у неактивированного макрофага наблюдается незавершенный фагоцитоз, например – микобактерий, грибов и др.

б. Активированный макрофаг отличается, по отношению с неактивированным макрофагом, повышенным синтезом цитокинов, которые и опосредуют защитный эффект ГЗТ

72. Термин “специфическая диагностика аллергических заболеваний” подразумевает комплекс методов, направленных на выявление аллергена или группы аллергенов, способных спровоцировать развитие аллергического заболевания. Основным принципом специфической диагностики аллергических заболеваний является выявление аллергических антител или сенсибилизированных лимфоцитов и продуктов специфического взаимодействия аллергенов (АГ) и антител (АТ).     Объем специфического аллергологического обследования определяется после сбора аллергологического анамнеза и включает:

• проведение кожных тестов(Постановка кожных тестов является диагностическим методом выявления специфической сенсибилизации организма путем введения через кожу аллергена и оценки величины и характера развившегося при этом отека или воспалительной реакции. Существуют разные методы кожного тестирования с аллергенами: прик-тесты, скарификационные, аппликационные, внутрикожные тесты. 

• провокационные тесты(В зависимости от вида аллергена и способа его введения в организм различают конъюнктивальный, назальный, ингаляционный, подъязычный провокационные тесты.)

• лабораторную диагностику( В клинической практике наиболее широко используются следующие методы специфической диагностики, проводимые in vitro:метод иммуноферментного анализа (ИФА) для определения специфических IgE радиоаллергосорбентный тест (РАСТ) для выявления специфических IgE 

73. Несмотря на вариабельность иммунологических показателей в норме, иммунный статус можно определить путем постановки комплекса лабораторных тестов, включающих оценку состояния факторов неспецифической резистентности, гуморального (В-система) и клеточного (Т-система) иммунитета. Оценка иммунного статуса проводится в клинике при трансплантации органов и тканей, аутоиммунных заболеваниях, аллергиях, для выявления иммунологической недостаточности при различных инфекционных и соматических заболеваниях, для контроля эффективности лечения болезней, связанных с нарушениями иммунной системы. В зависимости от возможностей лаборатории оценка иммунного статуса чаше всего базируется на определении комплекса следующих показателей: 1) общего клинического обследования; 2) состояния факторов естественной резистентности; 3) гуморального иммунитета; 4) клеточного иммунитета; 5) дополнительных тестов. При общем клиническом обследованииучитывают жалобы пациента, анамнез, клинические симптомы, результаты общего анализа крови (включая абсолютное число лимфоцитов), данные биохимического исследования. Гуморальный иммунитетопределяют по уровню иммуноглобулинов классов G, M, A, D, Е в сыворотке крови, количеству специфических антител, катаболизму иммуноглобулинов, гиперчувствительности немедленного типа, показателю В-лимфоцитов в периферической крови, бласттрансформации В-лимфоцитов под действием В-клеточных митогенов и другим тестам. Состояние клеточного иммунитетаоценивают по количеству Т-лимфоцитов, а также субпопуляций Т-лимфоцитов в периферической крови, бласттрансформации Т-лимфоцитов под действием Т-клеточных митогенов, определению гормонов тимуса, уровню секретируемых цитокинов, а также постановкой кожных проб с аллергенами, контактной сенсибилизацией динитрохлорбензолом. Для постановки кожных аллергических проб используются антигены, к которым в норме должна быть сенсибилизация, например проба Манту с туберкулином. Способность организма к индукции первичного иммунного ответа может дать контактная сенсибилизация динитрохлорбензолом. В качестве дополнительных тестовдля оценки иммунного статуса можно использовать такие тесты, как определение бактерицидное™ сыворотки крови, титрование СЗ-, С4-компонентов комплемента, определение содержания С-реактивного белка в сыворотке крови, определение ревматоидных факторов и других аутоантител. Таким образом, оценка иммунного статуса проводится на основании постановки большого числа лабораторных тестов, позволяющих оценить состояние как гуморального и клеточного звеньев иммунной системы, так и факторов неспецифической резистентности. Все тесты разделены на две группы: тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го (общего и относительного числа лимфоцитов, основных субпопуляций (Т- и В- клетки), фагоцитарной активности лейкоцитов, концентрации иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови.

Общее (абсолютное) и относительное число лимфоцитов определяют по данным клинического анализа крови. Содержание Т- и В- лимфоцитов подсчитывают в реакции иммунофлюоресценции, используя меченые моноклональные флюоресцирующие сыворотки к специфическим поверхностным антигенным маркерам)уровня могут быть выполнены в любой клинической иммунологической лаборатории первичного звена здравоохранения, они используются для первичного выявления лиц с явно выраженной иммунопатологией. Для более точной диагностики используются тесты 2(определение отдельных субклассов иммуноглобулинов (особенно Ig G, секреторного Ig A) и В-лимфоцитов, регуляторных и эффекторных клеток.)го уровня. 74. Иммунодефициты — это нарушения нормального иммунного статуса, обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа. Различают первичные, или врожденные (генетические), и вторичные, или приобретенные, иммунодефициты. Первичные, или врожденные, иммунодефициты. В качестве первичных иммунодефицитов выделяют такие состояния, при которых нарушение иммунных гуморальных и кле-точных механизмов связано с генетическим блоком, т. е. генетически обусловлено неспособностью организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности. Расстройства иммунной системы могут затрагивать как основные специфические звенья в функционировании иммунной системы, так и факторы, определяющие неспецифическую резистентность. Возможны комбинированные и селективные варианты иммунных расстройств. В зависимости от уровня и характера нарушений различают гуморальные, клеточные и комбинированные иммунодефициты. Врожденные иммунодефицитные синдромы и заболевания представляют собой довольно редкое явление. Причинами врожден-ных иммунодефицитов могут быть удвоение хромосом, точечные мутации, дефектферментов обмена нуклеиновых кислот, генетически обусловленные нарушения мембран, повреждения генома в эмбриональном периоде и др. Как правило, первичные иммунодефицита проявляются на ранних этапах постнатального периода и наследуются по аутосомно-рецессивному типу. Проявляться первичные иммунодефициты могут в виде недостаточности фагоцитоза, системы комплемента, гуморального иммунитета (В-системы), клеточного иммунитета (Т-системы) или же в виде комбинированной иммунологической недостаточности. Вторичные, или приобретенные, иммунодефициты Вторичные иммунодефициты в отличие от первичных развиваются у лиц с нормально функционировавшей от рождения иммунной системой. Они формируются под воздействием окружающей среды на уровне фенотипа и обусловлены нарушением функции иммунной системы в результате различных заболеваний или неблагоприятных воздействий на организм. При вторичных иммунодефицитах могут поражаться Т- и В-системы иммунитета, факторы неспецифической резистентности, воз-можны также их сочетания. Вторичные иммунодефицита встречаются значительно чаще, чем первичные. Вторичные иммунодефицита, как правило, преходящи и поддаются иммунокоррекции, т. е. восстановлению нормальной деятельности иммунной системы. Вторичные иммунодефицита могут быть: после перенесенных инфекций (особенно вирусных) и инвазий (протозойные и гельминтозы); при ожоговой болезни; при уремии; при опухолях; при нарушении обмена веществ и истощении; при дисбиозах; при тяжелых травмах, обширных хирургических операциях, особенно выполняемых под общим наркозом; при облучении, действии химических веществ; при старении, а также медикаментозные, связанные с приемом лекарств.

По времени возникновения выделяют антенатальные (например, ненаследственные формы синдрома ДиДжорджи), перинатальные (например, нейтропения новорожденного, вызванная изосенсибилизацией матери к антигенам нейтрофилов плода) и постнатальные вторичные иммунодефицита. По клиническому течению выделяют компенсированную, субкомпенсированную и декомпенсированную формы вторичных иммуноде-фицитов. Компенсированная форма сопровождается повышенной восприимчивостью организма к инфекционным агентам, вызывающим оппортунистические инфекции. Субкомпенсированная форма характеризуется склонностью к хронизации инфекционных процессов. Декомпенсированная форма проявляется в виде генерализованных инфекций, вызванных условно-патогенными микробами (УПМ) и злокачественными новообразованиями. Известно разделение вторичных иммунодефицитов на: Физиологические, новорожденные,пубертатного периода, беременности и лактации,старения,биоритмичности,экологические, сезонные, эндогенные интоксикации, радиационные,СВЧ, патологические, постинфекционные, стрессовые, регуляторно-метаболические, медикаментозные, онкологические. 75. Аутоиммунное заболевание - это заболевание, обусловленное аутоантителами (антителами к собственным антигенам) и цитотоксическими Т-лимфоцитами , направленными против собственных антигенов.  Развитие аутоиммунных реакций может быть обусловлено нарушением продукцииантиидиотипических антител , контролирующих выраженность и продолжительность иммунного ответа. При многих аутоиммунных заболеваниях отмечается повышение активности тех клонов Т-хелперов , которые стимулируют образование аутоантител. Показано, что некоторые лимфоциты при аутоиммунных заболеваниях могут стимулировать пролиферацию В-лимфоцитов и синтез антител. Некоторые из этих антител связываются с растворимыми антигенами и в виде иммунных комплексов откладываются в тканях, вызывая воспаление . Другие, непосредственно связываясь с тканевыми антигенами и комплементом, приводят к повреждению тканей.

В качестве аутоантигенов могут выступать любые ткани, клетки и компоненты плазмы, в том числе сами иммуноглобулины. Так, ревматоидный фактор , например, - это аутоантитела к IgG

Все аутоиммунные заболевания можно разделить на шесть групп по происхождению: 1. Аутоиммунные осложнения иммунодефицитных заболеваний, например, ревматоидный артрит у пациентов с наследственным дефицитом IgA. 2. Аутоиммунные осложнения опухолей, т.н. паранеопластические синдромы, например, миастенический синдром Ламберта-Итона при мелкоклеточной аденокарциноме лёгких. 3. Неонатальные формы аутоиммунной патологии, связанные с трансплацентарной миграцией аутоантител из организма больной матери, например, болезнь Грейвса новорождённых. 4. Лекарственно-индуцированные формы аутоиммунной патологии, например, синдром СКВ при приёме изониазида. 5. Аутоиммунные осложнения инфекционных болезней, в частности – синдром Рейтера при хламидиозе, лайм-артрит при боррелиозе, синдром Гийена-Барре при инфекции, вызванной Campylobacter jejuni и др. 6. Идиопатические аутоиммунные заболевания, т.е. болезни с неустановленной этиологией.

76.Микробиологические (бактериологические, микологические, вирусологические) методы основаны на выделении чистой культуры возбудителя и ее последующей идентификации на основании морфологических, культуральных, биохимических, антигенных (серологических) и других признаков. Располагая чистой культурой бактерий, можно определить их родовую и видовую принадлежность, факторы патогенности, а также чувствительность к антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам. Микологические исследования осуществляются реже, чем бактериологические, поскольку микроскопическая диагностика микозов достаточно надежна Во многих случаях вирусологический метод используют для ретроспективной диагностики вирусных инфекций. Все микробиологические методы имеют определяющее значение в лабораторной диагностике, являются наиболее информа-тивными и достоверными, особенно если они подтверждены дополнительными серологическими данными. Алгоритм бактериологического (вирусологического, микологического) исследования складывается из следующих основных этапов:

1) первичная микроскопия (необязательный); 2) первичный посев для выделения чистой культуры; 3) накопление чистой культуры; 4) изучение комплекса биологических свойств выделенной культуры и ее идентификация. Идентификацию чистых культур (до вида микроорганизма) проводят с учётом морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, токсигенных и антигенных свойств микроорганизма. Большинство исследований включает определение чувствительности к антимикробным препаратам у выделенного возбудителя. Для эпидемиологической оценки роли микроорганизма проводят внутривидовую идентификацию определением фаговаров, биоваров, резистентваров и т.д.

77. Пиогенные (гноеродные) бактерии - бактерии, способные вызывать местное гнойное воспарение или общую, генеративную инфекцию (пиемия, сепсис). К пиогенным  бактериям относятся гноеродные кокки (многие стафилококки, стрептококки, гонококки) и некоторые другие бактерии (группа протея, синегнойные, сибиреязвенные). Пиогенные  бактерии вызывают гнойное воспаление слизистых оболочек серозных полостей (брюшины, плевры, перикарда) или в глубине тканей (гнойная инфильтрация, флегмона и др.). Кокки – это многочисленная и широко распространенная группа микроорганизмов. Несмотря на свою многочисленность, болезнетворными для человека являются только стафилококки, стрептококки, пневмококки, гонококки и менингококки, которые объединены одним общим названием – пиогенные (гноеродные) кокки.  Общие свойства

правильная или относительно правильная шаровидная форма; отсутствие жгутиков (неподвижны); спор не образуют развитие процессов с образованием гноя. ноеродные кокки.

Стафилококки. Видовой состав. Свойства. Антигенная структура. Чувствительность к факторам внешней среды. Устойчивость к химиопрепаратам и антисептикам. Факторы патогенности. Стафилококковые инфекции. Гнойно-воспалительные заболевания. Сепсис. Иммунитет и принципы микробиологической диагностики. Препараты для иммунопрофилактики и иммунотерапии. Химиопрепараты. Антисептики.

Стрептококки. Общая характеристика. Классификация по биологическим свойствам и антигенной структуре. Пиогенные стрептококки. Свойства. Антигенная структура и серовары. Факторы патогенности. Роль в патологии полости рта. Стрептококковые инфекции. Патогенез сепсиса и гнойно-воспалительных заболеваний. Микробиологическая диагностика. Этиология, патогенез, иммунитет и принципы диагностики. Профилактика острых и хронических стрептококковых инфекций. Химиопрепараты.

Нейссерии. Общая характеристика, классификация.

Патогенные нейссерии. Гонококки, свойства, факторы патогенности. Распространение, патогенез, иммунитет, принципы микробиологической диагностики гонореи и гонобленнореи. Профилактика гонококковых заболеваний. Поражения полости рта.

Менингококки, свойства, факторы патогенности. Патогенез и клинические формы менингококковых инфекций, иммунитет, принципы микробиологической диагностики. Препараты для иммунопрофилактики. Химиопрепараты.

абораторная диагностика. Основной метод — бактериологический; разрабо­таны и внедрены серологические реакции.

В случае необходимости (при интоксика­циях) прибегают к биологической пробе. Материалом для бактериологического ис­следования служат кровь, гной, слизь из зева, носа, отделяемое ран, мокрота (при стафилококковой пневмонии), испражнения (при стафилококковом колите), в слу­чае пищевых интоксикаций — рвотные массы, испражнения, промывные воды же­лудка, подозрительные продукты.

Материал засевают на кровяной агар (гемолиз), на молочно-солевой (молочно-желточно-солевой) агар (угнетается рост посторон­них бактерий за счет NаСl, лучше выявляются пигмент и лецитиназа). Выделенную культуру идентифицируют по видовым признакам, определяют у нее наличие основ­ных признаков и факторов патогенности (золотистый пигмент, сбраживание маннита, гемолиз, плазмокоагулаза), обязательно проверяют чувствительность к антибио­тикам, в случае необходимости проводят фаготипирование. Из числа серологичес­ких реакций для диагностики гнойно-септических заболеваний применяют РПГА и ИФМ, в частности для определения антител к тейхоевой кислоте или к видоспецифическим антигенам.

Тинкториальные свойства. По Граму стафилококки, стрептококки и пневмококки окрашиваются положительно, а менингококки и гонококки – отрицательно. Гонококки под влиянием химиопрепаратов могут менять свойства и образовывать грамположительные формы.Специальные методы окраски – по Бурри-Гинсу для выявления капсул.Менингококки и гонококки хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, фуксином, бриллиантовым зеленым и др.). Культуральные свойства.Стафилококки, стрептококки и пневмококки – факультативные анаэробы, менингококки и гонококки – аэробы. Хемоорганотрофы. Оптимальное значение рН 7,2-7,6, температура 37⁰С. Время культивирования – 24-48 часа. 

78. Стафилококки -сферические грамположительные неподвижные аспорогенные бактерии рода Staphylococcus из семейства Staphylococcaceae. три вида стафилококков:

1.S. aureus – золотистый стафилококк, патогенный. Он колонизируют слизистые оболочки носовой полости, носоглотки и кожи

2.S. epidermidis -условно-патогенный,является постоянным обитателем кожи и слизистых оболочек. Чаще всего вызывает заболевания у человека при использовании протезов, катетеров, дренажей.

3.S. saprophyticus - непатогенный стафилококк, колонизирует кожные покровы половых органов и слизистую оболочку мочеиспускательного канала.

Морфология. Стафилококки – сферические,скоплений неправильной формы, напоминающих гроздь винограда. Жгутиков и капсул не имеют; споры не образуют. Грамположительные.

Культивирование. Аэробы или факультативные анаэробы. Хорошо растут на универсальных питательных. Характерное свойство большинства штаммов - способность расти в присутствии 10% хлорида натрия и 40% желчи.

На МПА образуют круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии с ровными краями .Колонии могут быть окрашены взолотисто-желтый,лимонно-желтыйили белый цвет, так как стафилококки вырабатывают нерастворимые в воде пигменты..S. aureus синтезирует золотистый или оранжевый пигмент, встречаются и беспигментные штаммы; у большинства штаммовS. saprophyticus пигментообразование отсутствует.

Рост в МПБ сопровождается диффузным помутнением с последующим выпадением рыхлого хлопьевидного осадка. В столбике желатина при посеве уколом через  с обильным ростом по линии укола намечается начальное разжижение среды, которое затем увеличивается, и образуется воронка, наполненная жидкостью. На кровяном агаре патогенные штаммы стафилококков образуют значительную зону гемолиза эритроцитов.

Биохимические свойства. Стафилококки ферментируют с образованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, фруктозу, сахарозу, ксилозу, глицерин, манит.Выделяют аммиак и сероводород, не образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты; продуцируют каталазу, фосфатазу, уреазу, а патогенные штаммы - аргиназу. Свертывают и пептонизируют молоко, разжижают желатин, иногда свернутую сыворотку крови. Каталазоположительные.

Факторы патогенности. Патогенные стафилококки синтезируют и секретируют высокоактивные экзотоксины и ферменты патогенности.. Экзотоксины.

1. Мембранотоксины (гемолизины, гемотоксины, стафилолизины).

.2Лейкоцидин - вызывает дегрануляцию и разрушение лейкоцитов. .Энтеротоксины - термостабильные полипептиды, образуются при размножении энтеротоксигенных штаммов стафилококков в питательных средах, продуктах питания (молоко, сливки, творог и др.), кишечнике. Устойчивы к действию пищеварительных ферментов.

.Гистотоксин - летальный и дермонекротический.

Б. Ферменты патогенности.

1.Коагулаза (коагуляция плазмы крови).2.Гиалуронидаза (разрушает гиалуроновую кислоту, способствует проникновению микробов в ткани).

3.Фибринолизин (растворяет фибрин).4.ДНК-аза (разрушает ДНК).

5.Лецитиназа (разрушает фосфолипиды).

Наибольшую роль в патогенности стафилококков играет коагулаза - бактериальная протеаза, свертывающая плазму крови. Антигенная структура. В настоящее время у стафилококков выделяют более 50 антигенных субстанций, разделяемых на родовые, видовые и типовые антигены. Родовые антигены способны перекрестно реагировать с изоантигенами клеток организма человека, что может приводить к развитию аутоиммунной патологии.

Тейхоевые кислоты - видоспецифические полисахаридные антигены.S. aureus содержит рибитолтейхоевую кислоту (полисахарид А),S. epidermidis - глицеринтейхоевую кислоту, называемую полисахаридом В. Тейхоевые кислоты активируют систему комплемента по альтернативному пути, свертывающую калликреин-кининовуюсистемы, а также облегчает адгезию бактерий к эпителиальным клеткам.и способны ингибировать поглотительную активность фагоцитов.

Протеин А . Штаммы, продуцирующие большое количество белка А, обладают более высокой резистентностью к фагоцитозу.

Устойчивость. Стафилококки относительно резистентные микроорганизмы. Прямые солнечные лучи убивают их только через несколько часов. В пыли они сохраняются50-100суток, в высушенном гное - более 200 суток, в бульонной культуре -3-4месяца,обладают высокой чувствительностью к бриллиантовому зеленому

Многие штаммы чувствительны к антибиотикам - бензилпенициллину, полусинтетическим пенициллинам, стрептомицину, левомицетину, тетрациклину, фузидину, а также нитрофурановым препаратам. Однако часто встречаются и резистентные к антибиотикам штаммы. контролируется R- плазмидами.

Патогенез. В организм стафилококки проникают через поврежденную кожу и слизистые оболочки, энтеротоксины - с пищей.

Стафилококковые инфекции чаще развиваются и тяжелее протекают в условиях снижения естественной резистентности организма и при иммунодефицитных состояниях, аллергии.

Клинические проявления. Инфекции, вызываемыеS. aureus, включают более 100 нозологических форм (кожные гнойничковые инфекции, эндокардиты, артриты, пневмонии, инфекции мочевыводящей системы и др.). Особое место занимают поражения, вызванные действием токсинов – синдром “ошпаренного младенца”, синдром токсического шока, пищевые отравления.

Лабораторная диагностика. Исследуют раневой экссудат, гной абсцессов, ран, кровь. При необходимости исследуют пробы пищи.

Предварительный диагноз можно поставить при микроскопии мазков, окрашенных по Граму.

Окончательный диагноз устанавливается на основании выделения возбудителя следующими методами:

-посев на ЖСА, МПА, КА;

-посев на дифференциально-диагностическиесреды – КА, ЖСА, молочно-

солевой агар (МСА), молочно-желточно-солевойагар;

-коагулазный тест;

-серологическое исследование (ИФА или РПГА);

-идентификация с помощью типовых бактериофагов;

-биологическая проба на котятах для обнаружения энтеротоксинов;

-определение чувствительности к антибиотикам.

Патогенные штаммы на кровяном агаре образуют вокруг колоний зону гемолиза.

На чашках с молочно-солевым и на обычном МПА отмечается образование пигмента.

На желточно-солевом агаре большинство патогенных стафилококков вызывает реакцию на лецитиназу, которая проявляется образованием вокруг колоний зоны гемолиза.

Для выделения чистой культуры из подозрительной колонии производят пересев на МПА.

Для полной характеристики патогенных штаммов определяют способность ферментировать манит, коагулировать плазму крови, выделять фибринолизин, лецитиназу, ДНКазу, обладать потенциальной гемолитической активностью, выделять дермонекротоксин, токсин общего действия и энтеротоксин, а также проводят фаготипирование.

В связи с широким распространением штаммов стафилококков, резистентных к лекарственным препаратам, проводят определение чувствительности выделенных культур к антибиотикам на плотной среде методом бумажных дисков.

Иммунитет. Здоровые люди обладают естественной резистентностью к стафилококковой инфекции. Она обусловлена барьерной функцией кожи и слизистых оболочек, фагоцитозом и наличием специфических антител, образуемых в результате естественной иммунизации.

Биопрепараты. Для профилактики и лечения стафилококковых инфекций разработаны и применяются аутовакцина, стафилококковый иммуноглобулин, антистафилококковую донорскую гипериммунную плазму. Иногда местно применяют бактериофаг. Стафилококковый анатоксин: получают из нативного анатоксина путем осаждения трихлоруксусной кислотой и адсорбцией на гидрате оксида алюминия. Стафилококковая вакцина: взвесь коагулазоположительных стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяют для лечения длительно текущих заболеваний.

79. III. Стрептококки (Streptococcus) - бактерии, относящиеся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus.Род Streptococcusвключает 21 вид.).

Морфология.  В мазках они располагаются парами или короткими цепочками, особенно при выращивании в жидких питательных средах, Клеточная стенка стрептококков содержит тейхоевые кислоты, углеводы и пептидогликаны, на ее поверхности расположены фимбрии, а у патогенных видов имеется капсула.У человека стрептококки заселяют слизистые оболочки, кожу и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности организма или отдельных его тканей (травма, ожог и др.), вызывая пневмонии, отиты, менингиты и другие заболевания. Иногда стрептококки осложняют вирусные и бактериальные инфекции.

По классификации Берджи стрептококки подразделяются на 3 группы:

1.Гноеродные гемолитические стрептококки. К ним относитсяS. pyogenes 

2.Зеленящие стрептококки -S. viridans (термофильные, фекальные).

3.Молочнокислые стрептококки –S. lactis (молочный стрептококк),S. cremoris (сливочный стрептококк).

По гемолитическим свойствам различают альфа-гемолитические стрептококки (неполный или частичный гемолиз, зеленая окраска среды), бетагемолитические стрептококки (полный гемолиз), негемолитические стрептококки(гамма-стрептококки,не дающие видимого гемолиза).

По происхождению и значению выделяют следующие виды стрептококков:

-пиогенные стрептококки - возбудители гнойных инфекций и сепсиса;

-лактис-стрептококки- кислотообразующие стрептококки, встречающиеся в молоке и используемые при изготовлении молочных продуктов;

-энтерококки - первично встречающиеся в кишечнике, вне кишечника являются причиной воспалительных процессов.

Антигенная структура. Все стрептококки подразделяют на 17 серологических групп, обозначаемых латинскими буквами. Группа А - возбудители большого числа инфекций у человека, В - возбудители мастита у коров; группы В, С, D, Е - возбудители инфекций у животных разных видов. Антиген, позволяющий определить серогруппу, представляет собой полисахарид(С-вещество)клеточной стенки.

Факторы патогенности стрептококков.

1.Экзотоксины:-гемолизины(термолабилен) - обусловливают разрушение эритроцитов; являются антигенами, вызывают образование нейтрализующих антител;

-лейкоцидин - разрушает лейкоциты, угнетает их фагоцитарные свойства;

-летальный токсин (некротоксин) - при внутрикожном введении кролику вызывает некроз кожи и других тканей.