5. Белковые тела (реакция вишняков а-трибуле)

В каловых массах могут содержаться в растворенном состоянии нуклеопротеиды, сывороточный белок и муцин. При нормальной функции кишечника нуклеоиротеиды пищи с каловыми массами не выделяются вовсе или же выделяются в виде следов. Если исключена ускоренная эва­куация кишечного содержимого, то белковые тела, обнаруживаемые в каловых массах, представляют белки не пищевого, а тканевого проис­хождения. Они являются указанием на наличие воспалительных и язвенных процессов, связанных с разрушением клеточных элементов кишечной стенки и эксудацией тканевой жидкости. Их обнаружению придают определенное диагностическое значение при кишечных заболе­ваниях.

Принцип метода . При прибавлении к эмульсии кала реактивов, оса?кдающих белки и муцин, образующиеся хлопья адсорбируют микро­организмы и детрит, взвешенные в каловой эмульсии. Хлопья оседают на дето, и эмульсия просветляется.

Ход определения. Приготовляют 3% водную эмульсию кала, растирая в ступке 3 г кала со 100 мл дистиллированной воды. В 3 широкие пробирки наливают по 15 мл каловой эмульсии. В первую пробирку приливают 2 мл насыщенного водного раствора сулемы, во вторую —2 мл 20% трихлоруксусной кислоты, в третью —2 мл 20% уксусной кислоты, в четвертую контрольную —2 мл дистиллированной воды.

Содержимое пробирок смешивают опрокидыванием и оставляют до следующего дня (12—18 часов) при комнатной температуре. На следую­щий день отмечают степень просветления жидкости по сравнению с контрольной, в которой жидкость остается мутной. Интенсивность просветления обозначается: + + + резко положительная реакция, + + положительная реакция, + слабо положительная реакция и т.д. Про­светление в пробирке с уксусной кислотой указывает на увеличенное количество слизи. Сулема и трихлоруксусная кислота осаждают белки, причем последняя осаждает только неизмененный белок и кровь, тогда как сулема - и белок денатурированный (загнивший). Проба с, сулемой чаще дает положительный результат.

Реакция позволяет оценивать степень поражения кишечной стенки. Она может быть использована для дифференцирования язвенных процес­сов в кишках от поносов токсического происхождения.

Реакция неспецифична для дизентерии, однако в терапевтических клиниках ею широко пользуются, особенно при неясных колитах. При динамическом наблюдении (повторные исследования через 10—12 дней) она дает возможность контролировать процесс эксудации.

В детской практике ей можно придавать лишь грубо ориентировоч­ное значение, так как у детей раннего возраста моложе 1 — 11/2 лет эндогенные белки встречаются при ряде парентеральных заболеваний, не сопровождающихся поражением кишечника.

Отрицательный результат реакции не доказателен, так как даже при поражении толстых кишок белковые жидкости могут подвергаться бактерийному разложению.

6. Органические кислоты

Определение органических кислот может служить мерилом интен­сивности процессов брожения в кишечнике. Органические кислоты жир­ного ряда —уксусная, масляная, муравьиная, молочная и т.д. — являются по преимуществу продуктами брожения углеводов, и лишь незначительная часть их образуется при расщеплении жиров и белков.

Принцип реакции. К разведенному калу прибавляют раствор полуторахлористого железа и затем гидрат окиси кальция до ясно ще­лочной реакции на фенолфталеин. Образующийся при этом коллоидный гидрат окиси железа адсорбирует стеркобилин и мельчайшие взвешенные частицы (микроорганизмы, детрит), препятствуя их прохождению через фильтр. Одновременно органические кислоты гидратом окиси кальция переводятся в кальциевые соли. Кальциевые соли кислот брожения (в отличие от кальциевых солей щавелевой кислоты, фосфорной кислоты и др.) растворимы в воде и переходят в фильтрат. В дальнейшем к ней­трализованному фильтрату добавляют соляную кислоту, которая вытес­няет органические кислоты из их солей. В тот момент, когда процесс вытеснения закончен, получается избыток свободной соляной кислоты, который резко меняет рН фильтрата. Момент этот определяется переменой цвета индикатора.

Реактивы : 1) 30% водный раствор полуторахлористого железа; 2) фенолфталеин —обычный 1% спиртовой раствор; 3) гидрат окиси кальция —Са(ОН)2 (гашеная известь в порошке); 4) 0,1 н. раствор НС1; 5) 0,1 н. раствор КаОН; 6) индикатор—0,5% спиртовой раствор диметиламидоазобеизола.

Ход реакции. Из хорошо размешанного кала отвешивают в фарфоровой ступке 10 г, отмеривают в цилиндре 100 мл дистиллирован­ной воды и, тщательно растирая кал, приливают к нему понемногу воду, всего около 80—90 мл. Сюда же приливают 2 мл раствора полу­торахлористого железа (1) и 20—30 капель фенолфталеина (2). В дру­гую маленькую ступку всыпают около 2 г гидрата окиси кальция (3), растирают его в небольшом количестве воды, оставшейся в цилиндре, и сливают в ступку с разведенным калом. Все вместе тщательно разме­шивают. Если гидроокиси кальция взято достаточно, то смесь окраши­вается в красный цвет; в противном случае прибавляют ее еще немного.

Дав смеси постоять 10 минут, фильтруют ее через складчатый бумажный фильтр. Фильтрат должен быть прозрачным, красного цвета.

В широкую пробирку отмеривают 25 мл фильтрата и нейтрализуют 0,1 н. раствором НС1 (4) до слабо розового цвета. Случайно прилитый избыток НС1 можно устранить приливанием нескольких капель 0,1 н. раствора N3011 (5). Количество НС1, пошедшей на нейтрализацию (обычно несколько миллилитров), не имеет значения для дальнейшего хода исследования. К нейтрализованному фильтрату прибавляют 12—15 капель индикатора (6) и титруют из бюретки 0,1 н. раствором НС! до перемены цвета из желтого в оранжевый. Определение можно производить и в 10 мл фильтрата, приливая соответственно меньшее количество индикатора.

Расчет. Количество 0,1 н. раствора НС1, потраченной при титро­вании, соответсвует содержанию органических кислот в 25 мл фильт­рата: его умножают на 4, чтобы привести к 100 мл фильтрата, соответ­ствующим 10 г кала (при работе с 10 мл фильтрата нужно умножать не на 4, а на 10). Эту цифру, выражающую содержание органических кислот в 10 г кала, и принято указывать в анализе.

В норме она колеблется между 14 и 16 мл, а при усиленных про­цессах брожения быстро увеличивается до 20, 25, 30 и даже 40.