Химическое исследование каловых масс

1. Кровь

При некоторых заболеваниях (язвенные процессы, злокачественные новообразования) кровь содержится в кале в виде так называемой «скрытой крови» (дериватов гемоглобина), ускользающей при макро- и микроскопическом исследовании и обнаруживаемая только с помощью химических реакций.

Проведение химического исследования требует соблюдения опреде­ленных правил.

1. Так как испражнения представляют собой неоднородную массу, то прежде чем приступать к исследованию, необходимо тщательно перемешать весь доставленный кал или брать материал из разных мест. В оформленном кале иногда необходимо исследовать отдельно кал, взятый с поверхности и из середины калового столба, так как при трещинах заднего прохода, геморрое и т.д. примесь крови может содержаться только в поверхностном слое.

2. Перед проведением исследования больной должен быть в течение нескольких дней на определенной («безгемоглобиновой») диете: из пищи исключаются мясо, рыба во всех видах, яйца весенней кладки и зеленые части овощей. Желательно так же исключить лекарственные препараты. Исследованию подвергают кал четвертой дефекации с момента соблю­дения диеты.

Химические реакции для определения кровяного пигмента принад­лежат к каталитическим реакциям. В них участвуют: 1) вещество, легко отдающее кислород, 2) вещество, легко окисляющееся, 3) катали­затор. Из веществ, легко отдающих кислород, обычно употребляют перекись бария, перекись водорода, озонированный скипидар, а в качестве легко окисляющихся - бензидин, гваяковую смолу, пирамидон и др. Все эти вещества, окисляясь, дают характерное изменение цвета. Железо гемоглобина, перенося кислород, является катализатором.

1) Реакция с бензидином по Грегерсену является наиболее широко применяемой. Окислитель—перекись бария, окисляющееся вещество - бензидин.

Реактивы: 1) бензидин 0,025 г; 2) перекись бария 0,1 г. Отве­шивают 0,1 г (или 0,2) бензидина, делят это количество на 4 (или 3) равные части, после чего каждую смешивают с 0,1 г перекиси бария. Смешанные порошки можно держать в запасе в сухих чистых бумаж­ках. Непосредственно перед производством реакций порошок всыпают в пробирку с 5 мл 50% уксусной кислоты и взбалтывают содержимое пробирки. Раствор при стоянии быстро темнеет, но пригоден к употреб­лению в течение нескольких часов, хотя после потемнения раствора чувствительность реакции снижается.

Проведение реакции. Кал намазывают довольно толстым слоем на чистое предметное стекло, кладут его на белый фон и обли­вают 2—4 каплями реактива. В присутствии крови тотчас или спустя 1 — 2 минуты появляется синее или зеленое окрашивание.

Перекись бария можно заменить перекисью водорода. Реактивы: 1) насыщенный раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте (хранить в склянке темного стекла в темном месте); 2) 3% раствор перекиси водорода, свежеприготовленный из пергидрола. Произведение реакции. К 2 мл реактива (1) приливают 1 — 1,5 мл реактива (2) н обливают препарат этой смесью.

2) Реакция с гваяковой смолой (реакция Деена-Вебера).

Реактивы: 1) ледяная или 80% уксусная кислота; 2) спирт ректификат; 3) эфир; 4) свежеприготовленная гваяковая настойка; 5) 3% перекись водорода, свежеприготовленная из пергидрола (т.е. пергидрол, разведенный водой в 10 раз); 6) хлороформ.

Приготовление гваяковой настойки: берут на кончик ножа растертую в порошок гваяковую смолу, всыпают в сухую пробирку, обливают 2—6 мл спирта (2) и дают отстояться. Отстоявшаяся жидкость должна иметь цвет портвейна, для реакции берут ее, не задевая осадка.

Приготовление озонированного скипидара. Продажный скипидар наливают в плоский сосуд (чашечка Петри, тарелка) и оставляют на свету не менее, чем на 48 часов, после чего сливают в склянку темного стекла и держат незакупоренной.

Проведение реакции. Из доставленного материала отбирают при помощи деревянной лучинки около 1 чайной ложки кала (заранее размешав его или беря из разных мест), переносят в фарфоровую или стеклянную ступку и растирают в ледяной или 80% уксусной кислоте, взятой в количестве, достаточном для получения полужидкой кашицы (если испражнения жидки, то кислоты берут около 1/3 его объема). приливают около 3—5 мл эфира, все вместе тщательно размешивают и сливают в пробирку. Дают эфирному слою отстояться, переносят его в другую чистую сухую пробирку, приливают 5—10 капель гваяковой настойки (3) и 25—30 капель озонированного скипидара или 10—15 капель 3% перекиси водорода (5). При наличии крови тотчас или через 1—3 минуты появляется синее или фиолетовое окрашивание раз­личной интенсивности. Окраска яснее, если сюда же прилить около 1 мл воды и 1 мл хлороформа, прибавляя последний по каплям до тех пор, пока эфирный слой, смешавшись с хлороформом, не осядет на дно.

3) Реакция с пирамидоном. Кал разводят водой приблизительно в 10 раз; затем в пробирку наливают равные количества разведенного кала и 5% раствора пирамидона в 90° алкоголе, приливают 10—12 капель 30% уксусной кислоты и несколько капель свежеприготовленной 3% перекиси водорода. При значительном содержании крови тотчас же появляется фиолетовое окрашивание. При малом содержании крови окраска появляется спустя некоторое время и менее интенсивная.