- •Московский государственный университет
- •История исследования плазмид.
- •Идентификация плазмид. Идентификация на генетическом уровне.
- •Идентификация на молекулярном уровне.
- •Распространение плазмид.
- •Классификация плазмид.
- •Поверхностное исключение и летальный зигозиз.
- •Несовместимость и группы несовместимости.
- •Молекулярная и генетическая организация плазмид.
- •Молекулярная организация.
- •Генетическая организация факторов переноса.
- •Генетическая организация конъюгативных коинтегративных плазмид.
- •Генетическая организация неконъюгационных плазмид.
- •Поддержание в клетках.
- •Репликация. Базовый репликон.
- •Распределение между клетками в процессе деления.
- •Генетическая регуляция.
- •Конъюгационный перенос.
- •Свойства бактерий, контролируемые плазмидами. Плазмиды лекарственной резистентности. Общая характеристика и механизмы действия.
- •Мутации внехромосомных факторов резистентности.
- •Элиминация r-факторов.
- •Лекарственная конверсия.
- •Продление чувствительности к лекарствам.
- •Плазмиды бактериоциногении.
- •Плазмиды и патогенность бактерий.
- •Атрибуты патогенности.
- •Плазмиды и патогенность e. Coli.
Молекулярная и генетическая организация плазмид.
Генетическая организация разных плазмид отличается большим разнообразием, так как среди плазмид, на основе их функциональной специфичности, различают факторы генного переноса, представляющие собой структуры, содержащие лишь гены репликации и переноса, благодаря которым обеспечивается непрерывность поддержания плазмид этого типа и распределение их между дочерними клетками, а так же их трансмиссивность и генетические детерминанты различных свойств.
Конъюгационные коинтегративные плазмиды – коинтеграты, состоящие из фактора генного переноса(RTF) и генов, детерминирующих фенотипические свойства бактерий. Каждый из составных компонентов такой плазмиды содержит в своем геноме гены репликации.
Неконъюгационные плазмиды - генные детерминанты различных свойств. В бактериальных клетках они лишены способности придавать клеткам свойства генных доноров (они не способны к самостоятельной передаче, но, благодаря наличию генов репликации, стабильно поддерживаются в клетке и передаются дочерним клеткам).
Молекулярная организация.
Плазмиды – молекулы ДНК, с размерами от 1 350 МД и более (1000550000 нуклеотидов). Чаще всего размеры лежат в пределах от 36 МД и от 5070 МД (последнее множество размеров принадлежит конъюгационным плазмидам).
Молекуле плазмидной ДНК присущи различные конформации: может быть 2-хцепочечная кольцевая форма (в результате смыкания одной из цепей ДНК – «релаксированная» форма), в результате смыкания обеих цепей образуется ковалентно закрытая сверхспиральная кольцевая форма.
Конформации
плазмидной ДНК (суперспирализованная,
линейная и кольцевая релаксированная)
Для большинства бактерий и плазмид обычна суперспирализированная форма. У микроорганизмов ряда видов встречаются плазмиды в линейной форме, например, у стрептомицетов – плазмида SCP1.
Значительная часть сверхспиральной ДНК отдельных плазмид находится в «релаксационном» комплексе с белком.
Кольцевая форма молекулы ДНК плазмиды характерна лишь для бактерий, но не для грибов и растений, где она существует в линейной форме.
Генетическая организация факторов переноса.
К чистым факторам переноса относят, например, факторы F и F-подобные (pAP22-4, pAP38, pAP39, pAP41) и pTRA1, фактор T, идентифицированный в E.coli, Shigella, Salmonella, Proteus, Klebsiella, Aerobac-ter, фактор , обнаруженный в S. typhimurium, и pAA1000 – в S. suipestifer (Пехов А.А. 1981), в Pseudomonas – фактор АP, а в Vibrio – фактор P и др. Наиболее полно их генетическая организация изучена на примере F-плазмиды, у которой не только изучены гены переноса – tra, репликации – rep, несовместимости – inc и др. но и картированы. Имеется 22 гена tra: M, J, A, L, E, K, B, V, C, W, U, N, F, H, G, S, T, D, I, Y, Q, Z. Гены tra A, L, E, K, B, V, C, W, F, Q, H, G – детерминируют синтез белков F-пилей, например, F-подобные pED208 – детерминируют синтез 17 пилей (в случае 0.5 – 1.5 пили в среднем на клетку), гены tra N и G детерминируют устойчивость конъюгационных пар клеток (донор – реципиент), tra M, Y, G, P, I, R, U – контролируют метаболизм конъюгации, tra S, T – поверхностное исключение, tra J - генетическая регуляция переноса плазмид.