- •Российский университет дружбы народов
- •К практическим занятиям по биохимии
- •Авторский коллектив:
- •Предисловие как пользоваться этим учебным пособием?
- •Список сокращений и условных обозначений
- •Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •1. Общие требования безопасности
- •Классификация химических реактивов в биохимической лаборатории
- •2. Требования безопасности перед началом работ
- •3. Требования безопасности во время работы
- •4. Требование безопасности в аварийных ситуациях
- •5.Требование безопасности по окончании работы
- •Раздел 1: Аминокислоты и простые белки Введение
- •1.1 Проверка знаний по органической химии
- •1.2. Цветные реакции на белки и аминокислоты. Реакции осаждения и денатурации белков а. Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •Б. Реакции осаждения и денатурации белков
- •1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых
- •1 .4. Диализ белков. Бумажная хроматография аминокислот
- •А. Диализ
- •1.5. Коллоквиум I по теме «Аминокислоты и простые белки»
- •Раздел 2: Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты Введение
- •2.1 Действие амилазы на крахмал. Влияние температуры на активность амилазы а. Действие амилазы на крахмал
- •Б. Изучение влияния температуры на скорость ферментативной реакции
- •2.2. Количественное определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови с п-нитрофенилфосфатом
- •2.3. Коллоквиум II по теме: «Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты» Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Варианты заданий на компьютерном тестировании
- •Правильные ответы
- •Раздел 3: Витамины, липиды, гормоны Введение
- •3.1. Количественное определение витаминов с и р.
- •3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови
- •3.4. Коллоквиум III по теме «Витамины, липиды, гормоны»
- •Раздел 4: Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов Введение
- •4.1. Специфичность действия ферментов распада углеводов: амилазы и сахаразы
- •4.2. Количественное определение глюкозы. Построение «сахарных кривых»
- •4.3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах. Количественное определение пирувата в моче
- •4.4 Коллоквиум IV по теме: «Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов»
- •Правильные ответы
- •Раздел 5: Обмен липидов и его регуляция Введение
- •5.1. Кинетика действия липазы.
- •5.2. Количественное определение фосфатидилхолинов (лецитинов) по фосфору
- •I. Приготовление рабочего раствора сыворотки.
- •II. Определение концентрации фосфатидолхолинов по содержанию фосфора.
- •5.3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови
- •5.4. Количественное определение малонового диальдегида
- •5.5. Коллоквиум по теме «Обмен липидов»
- •Раздел 6: Переваривание белков и обмен аминокислот
- •6.1. Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока.
- •6.2. Количественное определение аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови
- •6.3. Доказательство проявления активности аланин-аминотрансферазы (АлАт) методом бумажной хроматографии
- •6.4. Экспресс-метод определения повышенного содержания фенилаланина в плазме крови
- •6.5. Количественное определение мочевины в моче ферментативным уреазным/фенол-гипохлоритным методом
- •6.6. Количественное определение креатинина в моче
- •6.7. Коллоквиум по теме: «Обмен простых белков» Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Правильные ответы
- •Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. Введение
- •7.1. Определение общего билирубина в сыворотке крови
- •7.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче
- •7.3. А. Определение активности -амилазы в моче
- •7.3. Б. Составные части мочи в норме и при патологии
- •7.4. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови
- •7.5. Определение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови
- •7.6. Коллоквиум по теме: «Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка». Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Правильные ответы
- •Раздел 8: Подготовка к экзамену
- •8.1. Основные вопросы, выносимые на обсуждение
- •8.2. Пример экзаменационного тестового задания по курсу биохимии
- •59. Найти соответствие между процессом и его графическим изображением
- •60. Цикл мочевинообразования установил
- •Ответы к экзаменационному тесту
- •Раздел 9: Приложения
- •9.1. Термины, различающиеся по смыслу, но сходные по написанию и звучанию
- •9.2. Стандартные биохимические наборы и реактивы, используемые в практикуме
- •9.3. Рекомендуемая литература
- •Содержание
- •Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. 126
- •Раздел 8: Подготовка к экзамену 148
- •Раздел 9: Приложения 161
3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови
Адреналин опосредованно, через рецепторы, усиливает в клетках печени распад гликогена, замедляя его синтез, в результате чего свободная глюкоза поступает из клеток в кровь. Концентрация глюкозы в крови повышается.
Инсулин в печени оказывает прямо противоположное действие на обмен глюкозы, но в первую очередь, он опосредованно, через рецепторы способствует быстрому поглощению глюкозы из крови жировой тканью и мышцами. Концентрация глюкозы в крови снижается.
Цель работы
Убедиться, что введение гормонов изменяет концентрацию глюкозы в крови животных.
Принцип метода
Моделирование биологического эксперимента с использованием лабораторных животных – кроликов.
Выполнение работы
Оцените свои наклонности и выберите для себя роль “хирурга”, “терапевта” или “аналитика”. Хирурги будут брать кровь из ушной вены кроликов в стерильных условиях. Терапевты – рассчитывать и вводить (стерильно) кроликам под кожу живота гормональные препараты. Аналитики – определять концентрацию глюкозы в крови животных до и после введения гормонов. Оценивать результаты будут все, занося полученные аналитиками экспериментальные данные в таблицу.
Следует отметить, что эксперимент не причиняет вреда кроликам при внимательном выполнении всех описанных ниже манипуляций, однако лучше использовать «виртуального» кролика или ограничиться демонстрацией (моделированием) всех ниже перечисленных процедур.
Двух кроликов (натощак) взвешивают, и пока “хирурги” в стерильных условиях берут кровь (1 каплю) из ушной вены кроликов, “терапевты” рассчитывают дозы гормональных препаратов: 1,5 МЕ инсулина и 0,35 мл 0,1% раствора адреналина на 1 кг массы кроликов. Результаты расчетов записываются на доске и проверяются преподавателем. При необходимости коммерческие препараты гормонов разводят стерильным физиологическим раствором. В это время “аналитики” определяют исходные концентрации глюкозы в крови каждого кролика с помощью глюкометра (см. раздел 4.2.Б), а “терапевты” вводят (в стерильных условиях) под кожу живота рассчитанную дозу инсулина одному кролику и адреналина - другому.
Через 30 минут после введения гормонов вновь берется кровь из другой ушной вены кроликов и повторно определяется концентрация глюкозы. Кролику, которому вводили инсулин, дают пить 40% раствор глюкозы.
|
Концентрация глюкозы, ммоль/л |
|
Кролик И (инсулин) |
Кролик А (адреналин) |
|
До введения гормонов |
|
|
Через 30 мин после введения гормонов |
|
|
Разница |
|
|
Выводы
Тестовые задания по теме: «Гормоны»
1) Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»
К группе эйкозаноидов относятся: простагландины, простациклины, тромбоксаны и лейкотриены.
Гормоны способны регулировать деятельность отдельных ферментов или ферментных систем.
Биологическая активность гормонов проявляется при очень низких концентрациях в крови.
Альдостерон относится к глюкокортикоидам.
Вазопрессин - гормон передней доли гипофиза.
Тироксин может синтезироваться из тирозина.
Влияет ли деятельность гипофиза на функцию других желез внутренней секреции?
Известны ли гормоны циклопептидной структуры?
Можно ли синтезировать гормоны искусственным путем?
Эффективно ли пероральное применение инсулина?
Проникает ли адреналин в цитоплазму клеток?
Является ли арахидоновая кислота предшественником простагландинов?
Либерины и статины регулируют секрецию тропных гормонов гипофиза.
цАМФ и цГМФ - вторичные посредники пептидных гормонов.
Аденилатциклазная и протеинкиназная системы обеспечивают многократное усиление гормонального сигнала.
Фосфодиэстераза расщепляет циклические нуклеотиды.
Кальмодулин - это внутриклеточный Са-связывающий белок.
Стероидные гормоны проникают через плазматические мембраны и связываются с внутриклеточными рецепторами.
Обладают ли производные витамина D гормональной активностью?
Изменяет ли инсулин проницаемость клеточных мембран для глюкозы, аминокислот, ионов К+ и Са2+?
Связываются ли мембранные G-белки с ГТФ?
Эффективно ли применение инсулина как анаболитического средства при истощении организма?
Усиливают ли глюкокортикоиды глюконеогенез?
Относится ли инозитол-1,4,5-трифосфат к вторичным посредникам?
2) Выбрать один правильный ответ
К гормонам пептидного строения нельзя отнести:
|
В регуляции липидного обмена не участвует:
|
Вторичные посредники гормонального сигнала:
|
К стероидным гормонам нельзя отнести:
|
3) Найти соответствие, установив последовательность участников передачи гормонального сигнала в клетку
1. 2. 3. 4. 5. |
А. ц-АМФ Б. G-белок В. аденилатциклаза Г. мембранный рецептор Д. гормон |